Отзыв Дикунец М.А. (Разработка и применение методов ПЦР и ИФА для анализа остаточных ДНК и белков штаммов-продуцентов в биофармацевтических субстанциях)

отзыв на автореферат диссертационной работы Ковалевой Екатерины Викторовны «Разработка и применение методов ПЦР и ИФА для анализа остаточной ДНК и белков штаммов-продуцентов в би о фармацевтических субстанциях», представленной на соискание ученой степени кандидата химических наук по специальности 03.01.06 — Биотехнология ~в том числе бионанотехнологии) Диссертация Е.В. Ковалевой посвящена одной из важнейших проблем при производстве лекарственных форм белковой природы на биотехнологическом производстве. В рецензируемой работе представлены результаты по разработке, вал идации и внедрению чувствительных и специфичных способов определения остаточных ДНК и белков штаммовпродуцентов на этапе активных фармацевтических субстанций инсулина и гистона Н1.3.

Актуальность разработки эффективных и специфичных методов оценки качества обусловлена особыми требованиями, предъявляемыми к чистоте данных препаратов ввиду особенностей их приема. Диабет— хроническая болезнь, уровень заболеваемости которого неуклонно растет и, согласно данным Всемирной организации здравоохранения на 2014 год, составил 8.5% среди взрослого населения. Больными диабетом принимаются препараты инсулина пожизненно для поддержания умеренного содержания сахара в крови.

Препараты на основе производных гистонов класса Н1 используются для химиотерапевтического лечения, поэтому, как правило, применяются в больших дозах больными с ослабленным иммунитетам и в некоторых случаях детьми, Диссертантом Е.В. Ковалевой проведена основательная исследовательская работа, в результате которой разработан специфичный способ ПЦР в реальном времени, позволяющий выявлять примеси нуклеиновых кислот штамма-продуцента в активных фармацевтических субстанциях генно-инженерного человеческого инсулина и гистона Н1.3. Интересным результатом исследования оказался эксперимент с использованием интеркалирующего красителя КУВК бйЕЕХ 1, который показал альтернативный способ оценки микробной контаминации рабочей зоны аспирационным и седиментационным методам. Также Е.В.

Ковалева в своей работе показала возможность применения нестандартного набора ИФА при анализе активной фармацевтической субстанции инсулина, разработанного для количественного определения проинсулина в плазме крови. Исследование, выполненное соискателем, показало возможности данного набора для осуществления контроля качества готовой продукции в рамках биотехнологич еского производства„характеризующейся минимальным содержанием прони сулина, что не позволял набор, разработанный специально для анализа проинсулина в субстанции инсулина. В целом, автореферат производит впечатление грамотной научной работы, выполненной на хорошем уровне с применением основных современных аналитических методов, используемых для качественного и количественного определения соединений разной химической природы.

По представленной работе можно сделать ряд замечаний и пожеланий. В частности, для предела обнаружения и предела количественного определения вместо ОЬ и ЯЬ лучше использовать стандартные сокращения ЬОР и ЬО© соответственно. Указание основного оборудования, возможно, сделало бы автореферат более информативно завершенным, поскольку зачастую именно характеристики используемых приборов позволяют достичь высокую чувствительность аналитических методов анализа. По тексту встречаются опечатки, например, на стр. 9 «определениию», стр, 14 «наличие а АФС», стр.

21 «внутисерийного», в оформлении автореферата также имеются технические ошибки ~подрисуночные надписи к рисункам 13 и 14). Учитывая все выше сказанное, можно заключить, что диссертация Е.В. Ковалевой «Разработка и применение методов ПЦР и ИФА для анализа остаточной ДНК и белков штаммов-продуцентов в биофармацевтических субстанциях» является законченной работой и соответствует п. 9 «Положения о порядке присуждения ученых степеней», утвержденного Постановлением Правительства РФ от 24.09.2013 № 842, а ее автор, Екатерина Викторовна Ковалева, заслуживает присуждения искомой степени кандидата химических наук по специальности 03.01.0б — Биотехнология (в том числе бионанотехнологии). кандидат химических наук, Директор Федерального государственн бюджетного учреждения «Антидопинг 105005, г.

Москва, Елизаветинский пер Тел. +71499) 267-73-20 Эл. почта: пос1ор1пд(®дор1пфез2.ги М.А. Дикунец .