Айала, Кайгер - Современная генетика - т.1 (947304), страница 58
Текст из файла (страница 58)
Участки линейной ДНК могут быть клонированы в двух ориентациях, [н [НИ з,о 0,5 Рис. 9.20. Карты сайгон рестрикции молекул ДНК из условия задачи 9.7. 1) Каковы два способа ориентации? 2) Совместная обработка рестриктазами Н[л[?П! и Нйа1 дает фрагменты длиной ! н 6,5 т. и.н. Какова ориентация клон , ого фрагмента? ' 9.8. Фрагмент ДНК длиной в 1О пар ну)нзефтидов был помечен с 3'-конца и последовательность нуклеотидов определялась способом, схематически изображенным на рис.
9.8. Результаты предста- 293 9. Методы работы с ДНК С т л С 1,О 0,8 0,6 с ОЛ 0,2 ! 1О 75 100 сы Рис. 9.21 Кинетика ренатурации фрагментированной ДНК троглодита из условия залачи 9.12. влены в таблице. Какова нуклеотидная последовательность фрагмента? 9.9. Расщепление ДНК фага Х рестрнктазой Н1л ЙП1 дает семь фрагментов !рис. 9.7).
Продумайте постановку простого эксперимента с использованием полинуклеотидкиназы, позволяющего определить, какие из двух фрагментов содержат концевые точки ДНК). 9.10. Дано два препарата интактной ДНК фага Х: один дикого типа и второй Х г)да1. Фаг Х дда1 комплементирует мутанты по гену К, но не комплементирует мутанты по гену э' !см, рис. 7.7).
Сравните картину распределения Н!н 6Н1- рестриктов, которую вы ожидаете получить при расщеплении ДНК Х Ыда1, с соответствую- щей картиной для ДНК фага дикого типа, представленной на рис. 9.7. Полный ответ требует решения задачи 9.9. 9.11. Используемые при клонировании фаги смогут включать до 20 т.п.н, интегрированной чужеродной ДНК.
С другой стороны, космиды !гибрид фага Х с плазмидой) могут включать и переносить до 54 т.п.н. чужеродной ДНК. Что бы вы выбрали при создании библиотеки ДНК человека и почему? Геном человека содержит около 3.104 нуклеотидных пар. 9.12. На рис. 9.21 изображен график кинетики ренатурации фрагментированной ДНК троглодита. Что вы можете сказать о его геноме, основываясь на следующих данных; 1) геном Е. сод содержит 3,2.
1О' пар нуклеотидов и имеет мол. массу 2,5 10 Да; 2) график кинетики ренатурации ДНК Е, со!!, производившейся в тех же условиях, что и представленный на рис. 9.21, характеризуется значением со!па — — 5; 3) содержание ДНК в сперме троглодита составляет 37,5.10в Да. 9.13. Серьезные разногласия вызывает вопрос о том, являются ли хромосомы эукариот унинемными или полинемными, т. е. содержат ли они одну или несколько идентичных ДНК. Как может способствовать решению этого вопроса исследование кинетики ренатурации? Оглавление Предисловие редактора перевода 5 Предисловие 7 ! Введение 13 Вирусьг 14 Прокариоты: бактерии и сине-зеленые волоросли Одноклеточные и многоклеточные эукариоты 18 М иго з 22 Мейоз 26 Значение мейоза 33 2 Мсндедсвскдя гсист ик,г 37 Первые представления о наследственности 37 Открытие законов наследственности 38 Методы Менделя 39 Доминантность н рецессивность 40 Расщепление 42 Гены-носители наследственности 46 Независимое комбинирование 48 Тригнбридные скрещивания 50 Множественные вплели 53 Генотип и фенотип 56 3 Хромосомиые основы нгзсзс,1сзвсниосги 64 Гены и хромосомы 64 Наследование, сдепленное с полом 67 Нерасхождеиис Х-хромосом 70 Вторичное нерасхождение 72 Сцепленное с полом наследование у человека н других видов 75 У-хромосома 80 Опрелеленне пола 80 Отношение полов 84 4 Приро;1ц геистиче ко1о мгггериндн КХ Бактерии как экспериментальный объект 89 Экспериментальные исследования бактериофагон 91 ДНК - трансформирующий фактор шгевмококка 93 Нуклеиновые кислоты — настедствснный материал вирусов 96 Химический состав и строение нуклеиновых кислот 100 Модель структуры ДНК Уотсона .Крика 104 Проверка модели Уотсона-Крика 108 Различные формы организации двухцепочечной ДНК 113 Оглавление 295 Организация ДНК в хромосомах 1!6 Общие особенности реплнкации ДНК 120 5 1 сиом аукарио г 127 Рекомбинация сцепленных генов 129 Генетические карты !34 Трехфакторные скрещивания 135 Генетическая интерференция 137 Когда происходит кроссинговер? !39 Мейоз у грибов 140 Цитологичсскне наблюления кроссинговера 144 Корреляция между генетическими и цитологическими картами хромосом дрозофилы ! 45 Внеядерная наследственность 150 6 Тонкая сгруктура !еиа !59 Бактериофаг как генетическая система 160 Система гП бактсриофага Т4 161 Природа мутаций в области гП !63 Функциональные особенности гП-мутаций 166 Цистрон 168 Картирование гП-мутадий с помощью делеций !70 Предельная разрешающая способность рекомбинационного анализа 175 Уточнение генетической терминологии 175 Комплементационный анализ у высших эукариот 176 Рекомбинационный анализ тонкой структуры гена у высших эукариот: дрозофила 179 7 Гсиом вируса !90 Размножение бактериофагов 191 Мутантные бактериофаги 193 Комплементационный анализ условно летальных мутаций фага фХ174 195 Рскомбинвционный анализ мутантов фага фХ!74 197 Умеренный бактериофаг Л 204 Гены фага Л 205 Профаг Л 208 Сопоставление генетической и физической карт фага Л 211 Организация генома фатов Т2 и Т4 213 Ьакзсриад1и!!!1 !с!113к! 227 Мутанты Е сей 228 Генетические элементы Е.
сой 230 Р-фактор: генетический элемент, определяющий пол бактерий 231 Физическое картирование бактериальиых генов методом прерванной коньюгацив 236 Кольцевая форма генома Е. сой 238 Рсштаммы и часзичиые диплоиды 239 Подвижные генетические элементы (транспозоны) 241 Генетическое картироваиие Е. сой 246 Коиъюгационное картирование 247 Трансдукционное картирование 249 Обзор результатов генетического анализа 255 9 Мето,п! рг!бг!!ы с 2!!1К 260 Кинетика ренатурации ДНК 26! Рестрикция ДНК и ферменты молификации 266 Рестрикционный анализ молекул ДНК 270 Определение последовательности нуклеопгдов в ДНК !секвенирование) 273 Метод рекомбинантных ДНК 275 Векторы для клонирования ДНК 277 Библиотеки геномов 281 Обзор методов работы с ДНК 288 УВАЖАЕМЫЙ ЧИТАТЕЛЬ! Ваши замечания о содержании книги, ее офор- млении, качестве перевода и другие просим при- сылать по адресу: 129820, Москва, И-110, ГСП, 1-й Рижский перв д.
2, издательство «Мнрп УЧЕБНОЕ ИЗДАНИЕ Франциско Айала, Джон Кайгер СОВРЕМЕННАЯ ГЕНЕТИКА В ТРЕХ ТОМАХ Том 1 Научный редактор М.Р. Погосбекова Мл. редактор О.В. Шагинян Художник Л. М. Муратова Художественный редактор А. Я. Мусин Технический редактор М.
А. Страшнова Корректор Н. В. Андреева ИБ ЬЧ 6143 СЛВНО В НабОР 24.1086. ПОДПНСВЛО К Псеетп 21.0987. ФОРМВГ 10 Н \00'Ае. БУМаГа афевтНВЯ Уп 1. ПЕЧетз офсетная Гврллтурв вймс Обьем 9,25 бум. л уел. печ, л, 2405. уел. креот. 4843. Уч нзд. л 25,16 Изд. М 4!4951. Тнрвм 15НВ зкз. Звк 1215. Цена 2 р. 20 к. ИЗДАТЕЛЬСТВО еМИН 129820, ГСП, Мсскм, И-110, 1-й Рнпскнй пер., 2 Молвйскнй волн~рвфкамбн в Союзполнгрвфпро в пр Госудврс ленном «омнтете СССР по де вм элвтель в, полнгрвфнн л кннлной торгонл» г. Молвйск, ул М рв, 93. .