Методы общей бактериологии (том 3) (947294), страница 40
Текст из файла (страница 40)
Дезинфицирующее вещество применяют в соответствующей концентрации; при неправильно выбранных концентрациях ннактивации может не произойти, а излишне концентрированные растворы могут проявить токсическое действие нли повредить материалы. От концентрации агента зависит, будет лн действие бактериостатическим или бактерицидным. Тщательно подбирают время воздействия или контакта, необходимое для дезинфекции. 22! ЧАСТЬ У!.
ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ РАБОТЕ В ЛАБОРАТОРИИ Таблица 24.5. Обобщенные сведения о деаиифицируврщих веществах, применяемых иа практике Требавааня время контакта, мнн Вспгество разведение всгетатнвггыс формы бактерий бактерналь. ньм споры НЗР) 30 30 НЗ НЗ !о 1О 10 10 !О 70 — 85% 02 — 80% 2 с) 1 Π— 50а)с 0 ! 2 Ос)с Спирт' ) Формальдегид Глутаральдегид Фенольмые соедмиепня Четвертичиые аммонневые соединения Соединения хлора'> 30 !О 500 ч.
на млн." 2о — 1800 ч. а) 1О 30 Иодофор Убеждаются в том, что концентрация вещества и время контакта соотнесены с температурой дезинфекции. В целом при более низких температурах требуются большие времена контакта, а при повышении температуры на каждые !0оС эффективность увеличивается в два-три раза. Вода, используемая для приготовления растворов дезинфицирующих веществ, должна быть соответствующего качества. Для некоторых веществ жесткость воды не должна превышать определенного предела (например, концентрация ионов кальция должна быть (300 — 400 г на ! млн,); в противном случае исчезают дезннфицирующие свойства раствора. Полезно иметь данные о количестве органических веществ на обрабатываемом объекте, поскольку при их взаимодействии с дезинфицирующими агентами активный компонент фактически удаляется из раствора.
Одно-единственное дезинфицирующее вещество не может быть эффективным нли практичным во всех слу- а! В месте, асс)именном от света н лишенном доступа воздуха. Не. с) вффеативен. Эффективная концентрация галагена. Воспламеняется. с) д) с) Раздражает дыхательные пути. АЗ ПРЕДОТВРАЩЕНИЕ ЗАРАЖЕНИЯ И ДЕЗИНФЕКЦИЯ Свовства зфчгективен прн хране. нни в течение од а) ноп недели ннактивиру.
етсв аргаачческими ве- ществами дает остаток после приме пении раздражает раздражает кожу глаза вызывает коррозию + + + + чаях. При его выборе необходимо рассмотреть следующие вопросы. Что представляет собой организм, на который направлено действие вещества (организм-мишень)? Про какие дезинфицирующие вещества и в каких формах известно, что они ннактивируют или можно ожидать, что инактивируют, организм-мишень? Какова требуемая степень инактивации? В какой среде находится организм, т. е. в простой или комплексной, на твердых или пористых поверхностях или в воздухе? Какова наибольшая ожидаемая концентрация клеток? Можно ли ожидать, что дезинфицирующий агент (жидкость, пар или газ) будет контактировать с организмами, и можно ли эффективно поддерживать контакт в течение определенного времени? Какие ограничения следует учитывать в связи с совместимостью материалов? ЧАСТЬ Ш ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ РАБОТЕ Б ЛАБОРАТОРИИ Какова устойчивость дезинфицирующего агента в используемых концентрациях и требуется ли немедленное его приготовление или у экспериментатора достаточно времени, чтобы приготовить его в рабочих концентраццях непосредственно перед использованием? В табл.
24.5 приведены практические требования и наиболее важные характеристики для нескольких кате- торий дезинфицирующих веществ, чаще других примемяемых в бактериологической лаборатории. На практике концентрации веществ и времена контакта могут отличаться от рекомендуемых фирмами-изготовителями, поскольку при составлении рекомендаций предполагается, что бактерии в высокой степени защищены органическими примесями среды. Иногда применение дезинфицирующих растворов в указанных концентрациях и в течение указанного времени не обеспечивает стерильности.
В каждом конкретном случае эффективность выбранного способа дезинфекции должна быть установлена самим экспериментатором. 24.4.3. Дезинфекция поверхности Обычно дезинфекция пола находится в ведении хозяйственной службы здания. В лабораториях и других помещениях, где имеется инфекционный материал, дезинфекцию следует производить ежедневно, например, фенол-детергентной смесью в определенном разведении с использованием чистых швабр (двухведерная процедура). Одним и тем же раствором не следует дезинфицировать площадь более 93 ме.
Применяемый дезинфицирующий агент должен иметь широкий спектр действия в отношении бактерий, грибов, вирусов и кислотоустойчивых организмов. На его активность не должна заметно влиять жесткая вода, органические вещества или хлопчатобумажная ткань швабр. Стулья, столы и крупное оборудование можно дезинфицировать, используя смесь дезиифектант — детергент в нужном разведении с помощью чистой ткани, губки или полотенца разового пользования. Поверхности некоторое время должны оставаться сырыми; их не следует протирать. Рассматривая возможность применения 0,57а-ных растворов гипохлорнта, нужно пом- 224 24. ПРЕДОТВРАШЕНИЕ ЗАРАЖЕИИЯ И ДЕЗИПФЕКЦИЯ нить, что они легко нейтрализуются в присутствии избытка органических веществ, обесцвечивают поверхности, а также вызывают сильную коррозию металлов. 24.4.4. Проливание бактериальных суспензий При проливании бактериальной суспензии внутри биологически безопасного бокса опасность для персонала, находящегося в помещении, невелика.
Тем не менее чтобы избежать распространения инфекции, рекомендуется сразу же провести химическую дезинфекцию, причем это делают при включенной вентиляционной системе бокса. Стены, рабочие поверхности н оборудование опрыскивают илн протирают дезинфицирующим составом. Смесь дезинфектанта с детергентом очищает поверхности как от грязи, так и от бактерий. Подходящим в данном случае является 372-ный раствор какого- либо иодофора (например, вескодин) или разведенный в соотношении 1:100 отбеливатель, используемый в домашнем хозяйстве (например, хлорокс), с добавлением 0,72/2 неионного детергента. Все процедуры выполняют в перчатках. Для обработки используют достаточное количество дезинфицирующего раствора так, чтобы он попал в сточные лотки и емкости под рабочей поверхностью.
Поднимают переднюю решетку и поддон и протирают все поверхности. Протирают также сточный резервуар и дезинфицирующий раствор из него сливают в контейнер. Дезинфицирующий раствор, перчатки, обтирочную ткань и губки помещают в лоток и автоклавируют. При этом непродезинфицированными остактся лишь фильтры, вентилятор, воздушные ходы н другие внутренние части бокса. Если требуется продезинфицировать бокс изнутри, то это делают с помощью газообразного формальдегидж Отвешивают 0,3 г хлопьевидного параформальдегида на каждый кубический фут (0,028 м') пространства бокса и на электроплитке вносят его внутрь бокса так, чтобы питающий шнур плитки выходил наружу. Влажность внутри бокса поднимают примерно до ?ОУо, выпарчвая на плитке воду.
Температуру нагрева плитки с параформальдегидом поддерживают на уровне 292'С. Окно бокса закрывают полиэтиленовой пленкой, закреп- 225 ЧАСТЬ Р1, ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ РАБОТЕ В ЛАБОРАТОРИИ ляя ее клейкой лентой. Если воздух из бокса выходит в комнату, то к вытяжному отверстию бокса прикрепляют гибкий шланг и подводят его к вентиляционной решетке комнаты. Когда в здании используется система рециркуляции воздуха, шланг прикрепляют к открытому окну или двери.
Если же воздух из бокса поступает непосредственно в вытяжную систему здания, то задвижку тяги закрывают. Для деполимеризации параформальдегида включают плитку, После того как деполимеризуется половина параформальдегида, примерно на 3 с включают вентилятор бокса, чтобы формальдегид распространился по всему объему.
После полной деполнмеризации вновь включают вентилятор на 3 с. Затем оставляют бокс по крайней мере на 1 ч. После этого открывают задвижку тяги бокса, обеспечивая поступление воздуха в гибкий шланг, разрезают полиэтиленовую пленку, закрывающую окно, и включают вентилятор бокса. Бокс вентилируют в течение нескольких часов, чтобы удалить все следы формальдегида. Проливание потенциально опасного биологического материала в лаборатории вне биологически безопасного бокса может подвергнуть риску тех, кто там находится.
Если это произошло, прежде всего надо избежать вдыхания любого материала, находящегося в воздухе, для чего задерживают дыхание и покидают лабораторию. Те, кто находился в помещении, предупреждают остальных об опасности и идут под душ или в раздевалку. Когда известно или есть подозрение, что заражена одежда, ее осторожно снимают, складывая зараженными местами внутрь, а затем кладут в мешок или загружают непосредственно в автоклав. Моют предположительно подвергшиеся заражению места, а также руки и лицо. Не заходят вновь в лабораторию в течение 30 мин, чтобы дать возможность осесть образовавшимся при проливании капелькам аэрозоля. Перед тем как войти в лабораторию, чтобы вымыть место, где была пролита суспензия, надевают защитную одежду (резиновые перчатки, обувь, которую можно автоклавировать, накидку и респиратор).
Если суспензия была пролита на пол, не рекомендуется надевать хирургический халат, который может соприкасаться с полом при нагибании. Рядом с местом, где пролили суспензию, 226 г4. пгвдотвглщеиив злглжвння и двзинфвкция ставят контейнер для отходов, переносят туда крупные куски зараженного материала и закрывают его крышкой. Место, где виден пролитый материал, и вокруг него осторожно поливают раствором гипохлорита, содержащим 1000 ч. на млн. доступного хлора, раствором иодофора, содержащим 1600 ч. на млн, иода или другим подходящим дезинфицирующим агентом. Обработку производят в течение 15 мин, избегая брызг. Затем бумажным или матерчатым полотенцем вытирают дезинфицирующий раствор и пролитый материал по направлению к центру. Грязные полотенца сразу гке бросают в контейнер для отходов.
Контейнер для отходов, особенно дно, протирают снаружи полотенцем, смоченным в дезинфицирующем растворе, и помещают его и другие материалы в автоклав для стерилизации. Снимают обувь, верхнюю накидку, респиратор и перчатки и стерилизуют их в автоклаве. Моют руки н лицо и, если можно, принимают душ. 24.4.5. Инструменты Зараженные шприцы, инструменты, термометры, пипетки и стеклянная посуда перед новым использованием должны быть обеззаражены.
Если возможно, конечную обработку следует проводить паром для жаропрочных предметов или окисью этилена для неустойчивых к нагреванию и чувствительных к влаге материалов. В тех случаях, когда перед употреблением необходимо обеззараживание, для дезинфекции используют раствор 2$-ного глутарового альдегида. Предметы полностью погружают в раствор на 20 — 30 мин. Прн этом полная безопасность не гарантируется, если предмет не был предварительно вымыт или если раствор уже использовали ранее.