Методы общей бактериологии (том 3) (947294), страница 37
Текст из файла (страница 37)
Проверяют также состояние резиновых прокладок. Между стаканом и гильзой заливают дезинфицирующий раствор, чтобы в том случае, если разобьется стакан, материал подвергся дезинфекции. К тому же это создает хорошую амортизацию. Следует позаботиться о ЧАСТЬ Рь ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ РАБОТЕ В ЛАБОРАТОРИИ том, чтобы культуральный материал не загрязнился дезинфицирующим веществом.
Рекомендуется также не забывать о том, что если стакан разобьется, то из-за высокой концентрации клеток и большого разбавления дезинфицирующего вещества инфекционный материал может дсзинфицироваться не полностью. Надосадочную жидкость лучше не выливать нз центрифужных стаканов, а отсасывать. Если ее необходимо слить, протирают внешний край стакана дезинфицирующим раствором, так как, если этого не сделать, на следующей стадии может образоваться аэрозоль. Отсасывают надосадочную жидкость с помощью вакуумной системы, содержащей безопасные емкости и фильтры, Центрифужный стакан заполняют таким образом, чтобы край, крышка или ватная пробка не становились влажными от культуры. Завинчивающиеся крышки илн крышки, охватывающие края сверху, безопаснее крышек, входящих внутрь.
В последнем случае между крышкой и краем стакана обычно собирается некоторое количество жидкости. Даже стаканы с завинчивающимися крышками небезопасны: если края запачканы и неплотно прилегают к крышке, некоторое количество жидкости может попасть на внешнюю стенку стакана. Не рекомендуется закрывать центрифужные стаканы алюминиевой фольгой, потому что при центрифугнровании она часто слетает или рвется.
Стаканы и гильзы необходимо тщательно уравновешивать. Не следует смешивать гильзы, стаканы н пластмассовые вкладыши из разных наборов. Если на этих предметах не указан вес, удобно пометить каждый комплект своей краской. Металл, из которого сделаны высокоскоростные роторы, постепенно изнашивается, и если их используют на разных центрифугах, то для каждого заводят тетрадь, в которой отмечают количество часов работы на предельной или пониженной скорости. Если это не соблюдается, может произойти Опасная и дорогостоящая поломка.
Чтобы предотвратить коррозию или другие дефекты, которые могут привести к развитию трещин, необходимы частые проверки роторов, их очистка н сушка. Если ротор обрабатывают дезинфицирующим раствором, то после этого его промывают водой и вы- яа првдотврлщпнив злнлжпиия и двзиновкция сушнвают. Регулярно проверяют состояние резиновых колец и крышек центрифужных стаканов и смазывают их в соответствии с рекомендациями фирмы-изготовителя. Если стаканы сделаны из различных материалов (например, целлулоидные, полипропиленовые, из нержавеющей стали), следят за тем, чтобы использовались крышки, предназначенные для соответствующих типов. Крышки часто внешне похожи, но если их надевают на несоответствующие им стаканы, последние могут давать течь. При хорошем хранении стаканов и роторов и правильном с ними обращении этого ие происходит. 24.2.6.
Перемешивание и разрушение клеток При использовании для разрушения бактерий смесителей, миксеров, ультразвуковых дезннтеграторов, коллоидных мельниц, струйных мельниц, дробилок, а также ступок с пестиками соблюдают следующие правила. Используют биологически безопасный бокс. Используют безопасные смесители, в которых предотвращена утечка жидкости в месте входа вращающейся оси в дао сосуда. В случае отсутствия защиты от утечки перед работой необходимо убедиться в том, что ее нет. Для этого проводят предварительные испытания, используп стерильную воду, физиологический раствор или раствор метиленового синего. Во время работы на смеситель вешают полотенце, смоченное дезинфицирующим раствором. Сразу после работы смеситель н остатки стерилизуют.
Для смешивания инфекционных материалов стараются не использовать стеклянные емкости. Иногда для предотвращения разрушения ножей н уменьшения нагревания содержимого требуется охлаждать емкость смесителя. После прекращения работы смесителя емкость не открывают по крайней мере в течение 1 мин, давая возможность осесть азрозолю.
24.2.7. Обращение с жинотными Животные способны распространять патогенные микроорганизмы через слюну, мочу или экскременты. В отсутствие специальной информации все животные должны рассматриваться как разносчики инфекции. Чтобы уменьшить разнесение пыли и находящихся в клетке отходов, с ними обращаются очень осторожно. Использованные клетки, где содержались животные, стерилизуют автоклавированием вместе с отбросами, емкостями и поилками.
ЧАСТЬ ТЕ ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ РАБОТЕ Б ЛАБОРАТОРИИ Когда кормят, поят или забирают из клеток инфицированных животных, надевают плотные перчатки. Нельзя передвигать предметы в клетке голыми руками. При инъекции животным бактерий надевают защитные перчатки. Следует ограничить движения животных (например, с помощью специальной небольшой клетки для приматов) или ввести им успокаивающие средства, чтобы избежать распространения опасного биологического материала или заражения других животных и персонала. Экспериментальные животные подвергаются воздействию аэрозолей бактерий в вентилнруемых клетках, в безопасных боксах класса 1П или в комнатах, где персонал пользуется вентилируемыми костюмами. Большую опасность представляют огромные клыки крупных обезьян.
Они играют важную роль в передаче естественно возникающих опасных обезьяньих вирусных инфекций, так как обезьяны часто кусаются. Эти зубы должны быть затуплены илн удалены хирургическим путем ветеринаром. Многие зоонозы, в том числе инфекционный гепатит и туберкулез, передаются от обезьян людям. Вновь поступившие животные могут быть заражены, и от ннх могут заразиться лица, находящиеся с ними в тесном контакте. Чтобы избежать этого, необходимо применять личные защитные средства и использовать клетки, приспособленные для содержания зараженных животных.
Двери в помещениях с животными всегда держат закрытыми, за исключением тех случаев, когда необходимо войти и выйти. В эти помещения нельзя допускать посторонних лиц. В каждом помещении с животными должна находиться емкость с дезинфицирующим раствором, который следует ежедневно обновлять. Ои предназначен для дезинфекции перчаток и рук, а также для общей дезинфекции. Руки, полы, стены н кормушки клеток регулярно моют проверенным дезинфицирующим раствором соответствующей концентрации.
Сточные желоба на полу помещений с животными периодически наполняют водой или дезинфицирующим раствором, чтобы газы, образующиеся в стоках, не поднимались вверх. Сбритые волосы и другие отходы нельзя 24. ПРЕДОТВРАЩЕНИЕ ЗАРАЖЕНИЯ И ДЕЗИНФЕКЦИЯ бросать в сточный желоб на полу, поскольку они засоряют канализационные трубы. Необходимо выполнять инструкцию по контролю за насекомыми и грызунами в каждом помещении с животными н в местах, где хранится корм. Особое внимание обращают на то, чтобы живые животные, особенно мьн ши, не могли проникнуть к отходам.
Вскрытие зараженных животных производят в безопасном боксе. При этом поверх лабораторной одежды надевают хирургическую накидку, а на руки резиновые перчатки. Перед вскрытием шерсть животных обрабатывают подходящим дезинфицирующим раствором. По окончании вскрытия весь биологически опасный материал помещают в подходящие емкости и немедленно стерплизуют, а грязные инструменты кладут на поднос и заливают дезинфицирующим раствором.
Внутреннюю поверхность безопасного бокса и загрязненные поверхности дезинфицируют. Перед тем как снять с рук перчатки, их тщательно очищают в дезинфектанте, подготовив тем самым к стерилизации. Мертвых животных помещают в специальные непротекающие емкости, автоклавируют н надежно связывают перед кремацией. 24.2.8. Применение вакуумных систем Вакуумная фильтрация суспензий и отсасывание культуральнгях сред и надосадочных жидкостей из центрифужных стаканов в приемные колбы — это обычные лабораторные процедуры, Чтобы предотвратить засасывание бактериальных аэрозолей или забрасывание жидкости в вакуумную систему, на пути к источнику вакуума устанавливают воздушный фильтр, а между приемной колбой и воздушным фильтром помещают колбу для забрасываемой жидкости. На рис. 24.2 показаны два способа защиты вакуумной системы.
В обоих патронообразный фильтр служит эффективным барьером, препятствующим проникновению аэрозолей в вакуумную систему. Обычно фильтры способны задерживать находящиеся в воздухе частицы размером 0,45 мкм или больше. К таким фильтрам относится, например, фильтр с фирменным названием П111рог (ОРА 3001 АХР15; Ра!! Согр., Соиг11апб, 207 ЧАСТЬ Р!, ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ РАБОТЕ В ЛАБОРАТОРИИ Б !! Рис. 24.2. Два способа защиты вакуумных систем от загрязнения. 1 — подвод вакуума! 2 — фильтр; 3 — стеклянный разбрызгивательк 4 — дезиифиццрующий раствор; б — колба для сбора забрасываемого материала, 6 — приемная колба; 7 — центрифужный стакан; 8— зажим; У вЂ” резиновая груша; 1Π— стеклянная воронка Бюхнера; 11 — чашка с культурой тканй.
11'1' 13045). При сборке любого аппарата используют гибкие резиновые шланги, хорошо прилегающие к стеклянным трубкам. Стенки резиновых шлангов должны быть достаточно толстыми, чтобы не возникало осложнений при работе с вакуумом. В качестве колб для забрасываемого материала используют колбы емкостью от 250 до 4000 мл в зависимости от имеющегося пространства и количества жидкости, которое может быть заброшено. Эти колбы должны содержать дезинфицирующий раствор.
В них необходимо добавлять пеногасители (например, пеногаситель Доу Корнинг А), так как движение пузырьков воздуха через дезинфицирующий раствор может привести к тому, что пена достигнет 208 24 НРедотвРАщение 3АРАжения и дезинФекция фильтра и нарушит вакуум. Если фильтр загрязнился или требует замены, то его и колбу можно безопасно удалить, перекрыв линию между фильтром и источником вакуума. Перед сменой фильтр и колбу обязательно автоклавируют.
После этого в систему вставляют новый фильтр и приводят установку в исходное состояние. 24.2.9. Различные манипуляции Водяные бани и бани с аппаратами Варбурга, используемые для ннактивации, инкубирования бактерий или постановки опытов с ними, должны содержать дезинфицирующее вещество. Для бань с холодной водой рекомендуется использовать 70%-ный пропиленглнколь.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
