Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 125
Текст из файла (страница 125)
«" с» а Ю а о се < < 3 с7 сй бб Е бй б .с о % сй сй о о Е "В с В. с с о .с '-." с о б © д Ц с я «С о о бй Е.с Г. б с с Ц с сс Е -о й о с»й Я с о о о с й бй б .с с. о с .о о с о б бй б с, о о. о с Ц с 'И бй с о. с с Ц с О с о б с »Е ЕЙ о «б Я с с б .с с бб м м о :Е о Ц » ".«» « .с Ь .с -о л С О бй м б .с а~ В бс Ц с с а с о б .о о.
б о 'а м с., -о о с с о а с сс Е о „о о "о с В с с « м О < бй с с « Е о ,Е «Е Е о о й Ю Е с б бй с с о. Е 'сб с с < о. Ц бй б о о с Я б .с с -о с о < Х »с с Е Е с о Ц с б о' Ц бй с о. Ц с, о "о о с « й бй о „о с о м с о Ц ОЮ о с с с о а Ес бй.о с .с о. Ц о сл а» )Ц '» Е с Е Е ь с .с о о с Ц бй с с с. о В с Е й .с ~ со .о бй с с бй б б .с аа ц о аа б о Е с б .с »- о .с й » б Ю б» с с" М й о с с Ц с Я о а ЦЕ Ц о с с »»,С о . « о ц бй о о с й с В В о о .с бй бй с с «с о.
а а а с ц .о .о Е Е с о Е бй Я с Г о о « с бй с с о о о о .с Ф Е Ф с с о — ' с м б "с Ф о с. Я .Я с Я бй с с о с й с я .с о о < о й "о с Ц с Ц бй о о о с 'Е с .сс с «0 О о Ц -а о .о с « о с с сс а— с с 'б о Е о о о. Ф .с, с .с Ц Е о « .с о с б о Ф <.Е » б о с .с бй »Е с 'сс о ос Е б Я о Ц .с «с Е Е о с « со » с сй о с < сй о о й» б бй с сй « б с.
с о с В с бй о Г. С бй б .с с. о б .о < Ц «» Ц « 0-~ ,с с, о о В с.о .Е, сй В а .Е о .с о б х, «' С» ц о „д' а .с Я 'С Ц с »» ~ бй »Е о ц с о.с — ' «о о .с -' о.Я с аЕ В о 'о.с с б б с с ссо с о < О сл о '(7 < с а О М Ц с б о 'Е о Е с с \ о Ц » » й -о « Я Я с о Е с Е бй Я Ц о Я Ц о с Б сй .с о с, 'Е б -с с с 'Е «с 'с Г о б с .о Е о Ц < с оа с .с с» о с со «Г сс -'с с, о "о -о и '." «Е 'с З б а с < «Е» с Е бй с са о< Е Ы Ю ~Ф Ю а о а »б о о -с с с ».- Ц с Д йй о с»е -о Ц с о Ц м Р. с бй .с с. о б .о » с о Ц с Ц с Е с с 'о с б бб »е с о бй с с Ц с .Е о З о б с с 'Я о .с с А3.10 Аррепйх 3: Ъеееое» ппй Впееее«п! Юа«пз о о .а % о йй .с о й а о л .а с о с О 'о о й о С а -а с. й а о с а .а с» с Е й.
» о с я Е .с д. о .С йй о "о с а с с ю »й М с % се йс Б х Ц» х .« > й се ъ а а с с о <'Ъ < Цй йй )- < М 'о .Е с 0 Ю )' й с ой м ) к с М «д с с о.- с Е с о с» .о с Е а йй са. с 'л о с с о о с й 0 ) с о д ~Се Е 0 С о й а а о айс 'Б о с» «Ц ос :с ~ О )» о Ц Ц Ц «Г Ф '" а Ефс »Е '«» 'Е Е о о Е с1 лй -Е о с Е » «0 ) м ас Е й » «Ц «0 а( сс с а-. йй с с с Ц с о Ц с с» а СЕ й Е с ,.а „а о ц .с о с йй о с а о М о Я а о .о а Ю Е с а с -Д .Е о с с с с Ц 'Е с й йй с о \ .Е о 'Я 0 Е ц о Е о «0 с а'-" «Ц с ~3 «с м о й„„ йй «», о с а о с о Ц Е,. Е Л '.с с с а" Бо ЕЛ 0 с .о .» — Е йй ° о „, а с Е а йй с с Е о 0 с ) о .с С.Е о» аа с с о о ас о о й с д д о с а. с йй с 'е с с» С с йй,а с с ) о ц» л'а с о Е с с й с с с а с ,.
м с Е»Е "с с Е ~. а Ц Ц с с «\ «» Ц О а д,.а йй о .с » .с с а "о - Е с» с 0 о с Ц » с а йй )» а. '» Ъ С 0» о С 0 о ц х с» Ю Л' 0 С «:. с о а, с * о Е» с» йй о » ' а й о .а а. .о о с д с о Ц Е Е а о х с — ' о« О» 0 С » с й о .х с 'а -а й с й с .а с Е йй о о ') с Е о Е с са о с со и- а ч с О' 'о 0 О мЮ а Ц с», с 'с с о о.- а" Е о о с «»' а "а х о с с е— с с с ~Ц Е :Е с Е о о «) с р Ь Е с с с,; 'о -«» а с а о с "а с» с» ) о .- .с и ц а ) Ц вЂ” о .с д йй Е д с» й» о .о 0 Ц .С = с й о )- а ю Ю .с Е ;.С «а с а о а а а а х с ц с с 0 .С «Г ) .о с а Ц Ц Ю 0 ю о о )Е с о Е м с й» с — а а .а ') с о ,с о д с Е с с с йй д с асс Ц о ) о о а )" е Е;д 0» с о -о "о с о с» с Ц йй о с о а.
х "а Ц с йй Ц о .о СЮ О йй 0 'а о Ц а„ Ц «Г, С ь о а с о" .с Е а о Е о Е й с м » о с' йй Д Ю «Ц 0,. )» «Е Д а о 0 й Е .а о о а О с "Е Е о ) з 0 с о о с о д о Я"Б сй .с а Е 0 с о о сй с . а а 0 О й Е о с о 'о с Е ,0 С о С Ю "а о о .Е й :с ) й й 0 а с о .а о сй 0 О )» 'о м й с О с Е о а с Ю Я й .с с. о о о .Е о сй .С О й й. а о Е а .Е .д а „, о ад Е о о .В а с„:,„ сй с о с о .Д 0 с о .а х а ю а о .а С ° а 0 » а "й» а с с .й Ю 0 с Е— Ю 'Д с о ° .х с 0 а ю сй Д 2 'О й -а с о с "М Е о й.
Е »- о а Ец о с .с .Й а Е ц. :з .с 'Е с О. о о с с ' о Я "о а й о с а а' ой Я х х с о о х, е д й с й й а 0 о о а а о » о а с й» а '3 Е Е 'с Е с о с о С .о Е а Е Е .о с .а о .Е С о а 0 "о й .с й. й. о 0 .с сй с й .с д Л" Е о. .о й Е о > а о о а о а - й а о о ' .Е Е о. 'а с с о .о Е о о а Е ) Е '" о. -х й 0 . > ю о 'о с а й с о а -й о й > .а ') "а о а 0 с— 'йй о .с Е Е. Мог!фсаттопlйеттгтсттоп Еуттетт т Е, соП А4.3 МО0!НСАТ1ОМттКЕЬТК1СТ1ОМ Я'ЬТЕМ$1М Е. СОП Мосдйса6оп оЕ РЫА (а гье6 Ьу ЕтсЬегтсЬта со)|' со 6(ас(пди(аЬ Ъессчееп Па осчп депоше апд Еоге|дп РИАа !исгодисед Ьу ЬассепорЬаде |пЕес6оп, р!аяпЫ сгапаЕег, ог сгапаЕесбоп.
РЫАа чч!сЬ ЕаииПаг рапеггь оЕ шесЬу!а6оп оп адепояпе ог сусояпе геядиеа аге ииишпе со ассас1|, счЬегеаа иптпесЬу1асе|1 РЫАа ог РЫАа сч)сЬ ипЕаии!тат рассеггь оЕ ше|Ьу1а6оп аге еаппаг)се6 Еог Педгаба6оп Ъу епбодепогь геаспссюп епхушеа. Ме11су!а1спр Ессгупсед с'п Е. со1т' Ъй!д-суре а|та|па оЕ Е. соВ ехргеть РЫА ше|Ьу1|гапаЕегааеа сЬас сгапаЕег а п|ейу1 дгоир Еготп 5- адепоау!шесЬюп)пе со ап ат!еп(пе ог сусояпе геаЫие сч)сЬ(п а дейпе6 сагдес ает)иепсе. РеаспЪе6 Ье1отч аге течете сурет оЕ шейу1асшд епхутпея с1агп МеЕЬу!!гапйегахе 1п т(ат' асга|па оЕЕ.
со!1, абеи!пе геябиеа етпЬесЫе6 (и йе тес)ттепсе | ...бАТС...' саггуа шейу! дгоир апасЬе|1 со йе )9с асош (Напшап ес а!. 1978). Моте йап 99%> оЕ сЬеае п|огдде|1 а|1епше Ьааея счЬ|сЬ аге Еоипб оп Ъо|Ь асгапба оЕ йе раПпдгоиис гесодп|6оп ает)иепсе, аге Еоппеб Ьу ас6оп оЕ РЫА абеп!ие шесЬу1аае, йе ргобисс оЕ |Ье тсат депе. Р)4А адепше тпесЬу1аае ь а япд1е-я|ЪипП пис1ео|Ые-Еп|1ереп|1епс (суре П) РЫА шесЬу1сгапаЕегаае |Ьас сгапаЕега а тпейу1 дтоир Еготп 5-абепоау1тпесЬ|опше со абеи)пе геаЫиеа ш сЬе гесодпшоп аес)иепсе ' .....САТС.....' (Еог гечсетч, р1еаае аее Маппгь 1987; Ра1шег ап6 Маппиа 1994).
1п Е. со!т, т(ат шейу1абоп (а гет!и!ге6 Еог ейк)епс РЫА пияпассЬ гера(г, Еог ассигасе (п|6асюп оЕ РЫА герП- сасюп ас опС, Еог аедгедасюп ап6 раг66оп оЕ сЬгошоаотпеа саггу(пд оНС, апй Еог шос!и!асюп оЕ депе ехргеьяоп (Еог геч(есч, р1еаае аее Ра1п|ег апд Мапп|ь 1994). ТЬе СгапаЕег оЕ а шейу1 дгоир со сЬе Ыа асош оЕ а|!еп)пе р1асеа а ЬиП|у аП|у1 геаЫие )и сЬе ша)ог дгооче оЕ В-Еопп РЫА апд ргечепь с1еачаде ш |6|го Ъу аоп|е геаспс6оп епхушеа ъчЬоае гесодп(с!оп ясеа сопсаш йе аег)иепсе | .....бАТС.....|. Ву сои|таас, осЬег геасг!ссюп епхушеа гет)и(ге тпейу!а6оп ас -САТС- геядиеа со с1еаче РЫА.
ТЬе гесодпПюп ясеа оЕ аечега) геаспс6оп епхушеа (Рчи1, ВатН1, ВсП, ВфП, ХЬоП, МЬо1, ап6 ЯаиЗА1) сопса|п сЬ!а тес)иепсе, аа |1о а ргорогбоп оЕ йе а!сеа гесодп|хе6 Ьу С1а! (1 ясе |и 4), ХЬа1 (1 ясе (и 16), Тат)! (1 ясе Ы 16), МЬоП (1 ясе )и 16), ап6 НРИ (1 ясе ш 16). ТЬе (пЬ(- Ъ|6оп оЕ МЬо1 гПдеа6оп оЕ рго)сагуос(с Р!4А ргеаепь по ргасбса! РгоЫеш Ъесасье |Ье геяпс6оп епхуше ЯаиЗА! гесодп(геа ехас|1у |Ье ааше аес)иепсе аа МЬо1 Ьис ь ипайессе6 Ъу т)ат шейу1аиоп.
(№тет МапипаПап РЫА ь пос тпесЬу1асед ас |Ье Л|а роя6оп оЕ а|1епше, апд 6шя еиЬег МЬо! ог ЕаиЗА1 сап Ье чье ейесс(че1у.) Но|течет, чтЬеп П ь песе|ьагу со с1еаче рго)тагуо6с РЫА ас ечегу рояПЫе ясе чбй С!а1, ХЬа1, Тад), МЬоП, ог НрИ ог со Йеаче П ас аП сч)сЬ Вс!1, сЬе РЫА шиас Ье ргераге6 Егоп| асса(иа оЕ Е. соЕ |Ьас аге т)ат (ВасЬпап 1980; КоЪегса ес а1. 1980; МсС!едапд 1981). 1лзса оЕ геаспсбоп епхушеа счЬоае раиегп оЕ с1еачаде ь айессе6 Ьу атат шесЬу!асюп Ьаче Ьееп агьетпЫес1 Ьу Кегь!ег апд Маиса (1990) ап|1 МсС1едап|1 ап6 Ые1аоп (1992); а|Ыиюпа! |пЕоппасюп ь ачадаЫе |п йе ЪгосЬигеа оЕ шоас сопипегс|а! аиррПега оЕ епхушеа ап6 (и а ПасаЪаае оЕ геаспс6оп ап|1 пюсПВсасюп епхушеа (КЕВАДЕ) |Ьас ь ассеяяЫе ас геЬаае.пеЪ.сошт' геЬаае. 41сгп МесусуусгатЕегахе т!ст шсгобисеа шесЬу! дтоира ас йе С' роябоп оЕ йе (псегпа1 сусояпе |п йе ает)иепсе а ...ССАбб...а ог ' ...ССТбб...' ап|1 сЬегеЕоге ргечепса ог аиррге|ьеа с!еачаде Ьу геаспсс)оп А4.4 Аррепт/(х 4: 1 и утез $/тес) ти Мо1еси!аг С!оптиц епхушеа |шсЬ ах ЕсоК1 (Мапппх апт$ Могпа 1973; Мау апт$ НаШпап 1975 Ь рог июхт ригрохея тЬ!х ргоццетп саи Ъе ачоЫед Ьу ияпц Взт)ч)1, гч[6сЬ гесоцп(тех ехаст!у |Ье хаше хет)иепсе аа ЕсоКП (а1|ЬоицЬ ~т сша |Ье РМА ат а 6$ЕЕетепт!осабоп чн)тЬ(п |Ье аес)иепсе).