Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.2 (522942), страница 67
Текст из файла (страница 67)
1977). ° Ак теротгет епаутек ш попгагцоасс|че куксетпк со г(есесс апд !оса!Ье пис!ек ас(сЬ ап6 ргосешк. 1п йЬ саке, |Ье а))са1ше РЬокрЬасаве Ь соп)ицасег( со а Пцапб юсЬ ак ксгерсачЫш |Ьас крес|6сацу шсегасо |чпсЬ а Ью6пу1асес( сагцес тпо1еси!е (1еагу ес а1. 1983). ОерЬоврЬогу!а11оо Кеасс!оов АПса1ше РЬокрЬасакек сап теп|оче 3'-РЬокрЬасе цгоирк (тоги а чапесу оГ киЬксгасе шо1еси1ек, (пс1и6(пц 3'- РЬокрЬогу1асед ро1упис1еосЫек апд с)еохупис!езде 3'-п|опорЬокрЬасек (КеЫ апс( Ъчцкоп 1971).
Ноъчечег, йе п|аш ые оГ ВАР С1Р ап6 5АР (п шо)еси1аг с!оп( пц Ь со сага(уте сЬе гетпоча( оГ сеьпша! 5'- РЬокрЬасе геядиек Ггош япц!е- ог доиЫе-астап|)е6 Гл)ч)А ап|1 йХА. ТЬе гею!сшц 5'-Ьу|1гоху) сегпиш сап по 1опцег са1|е рагс |п 1|цасюп геассюпк Ьис аге юЬксгасек ш гагцо1аЬе!шц геассюпк саса1уае|1 Ьу ро!упис!еосЫе Ыпаке (СЬасопак апг( чап г(е цапйе 1980).
А1сЬоицЬ |Ье ике6|1иекк оГ ацсацие РЬокрЬасакек |п 5' !аЬецпц оГ пис!е(с ас||Ь Ь ипгцкрисед, йе(г ча! ие ш ргечепсшц ке! Г-Пцасюп Ь |поте с(еЬасаЫе. ТЬеге Ь по |1оиЬ| сЬас с)ерЬокрЬогу1а6оп ге|1исек тес(гси!аптасюп оГ Ппеаг р1акгпЫ у|ХА апс( сЬегеГоге гцгпш(кцек йе Ьас)сцгоипг( оГ сгапкГогшес( Ьассепа1 со!ошек сЬас саггу "егпрсу" р!аяпиЬ (П1т)сЬ ес а1. 1977; 1й-Ного|чкт апс( Виг1|е 1981; Ечапк ес а1. 1992). АП соо (тес)иепс!у, Ьосчечег, |Ьеге Ь а рагаце! Йесцпе )и сЬе пшпЬег оГ со!оп|ек |Ьас саггу йе с)еягед гесотпЬ|папс.! п а|Ыи|оп, ю|пе шчек6цасогк Ье!|е| е йас сЬе ргекепсе оГ 5'-Ьус(тоху! цгоирк шау !еа|1 со ап |псгеаке ш |Ье Гге|рлепсу оГ геаггапце|1 от 6е!есе6 с1опек. Рог |Ьеке геакопк, гцгесс|опа! с!опшц Ь |Ье ргеГеггес( гпесЬо6 ччЬепечег сЬе арргорг(асе геяпс6оп ясек аге ача|!аЫе. Ргорег11ев оГ А!!га!1ое РЬоврЬаГавев АПЫше РЬокрЬасакек же|1 |п ию!еси1аг с!ошпц 6(ар!ау шаиша! асс(ч(су ш аП|а!ше ТгЬ Ьийегк (РН 8.0 со РН 9.0) |п сЬе ргекепсе оГ 1о|ч сопсепсгасюпк оГ Хпл' (<! шм).
° ВАР Ь кесгесе|1 ш |попоп|епс Гоги| (М, = 47,000) |псо сЬе репр1акпис красе оГ Е. соц, |чЬеге Ь 6!шегЬек аис( Ьесоп|ек саса1у6сацу ас6че (Вга|ЬЬа|ч ес а!. 1981). Ас пешга! ог аП|а!ше РН, сцп|епс ВАР сопсашк ир со ях Хпл | юпк, с|го оГ лчЬ|сЬ аге еяеп6а! Гог еитуша6с ас6ч|су (Гог геч(есч, р!еаке кее Со!егпап апд Сесьпк 1983). Оп1у опе оГ сЬе с|го саса!у6с ясек рег сцгпег и ас6че ас 1о|ч сопсепсга6опк оГ аг66- с|а) юЪксгасек, ъчЬегеак ЬосЬ Ьесогпе асьче ас ЬьцЬег сопсепсга6опк (Нерре1 ес а1. 1982; у|Те !987). ВАР Асг/игу| Рьоврпа|авв Яипвпвге| 8|пд1е- от боише-в|тапбеи 0|чА апб ВНА; тВСТРв апб бНТРв а!|савпе рьоврьасаве 5'он ОНА ОГ 5'онВНА к|васс|оп| б'роНА ог 5' рйНА ЕГСЕ)КЕ 9-9 Ое Ьок Ьог 1агюп Ас11ЫС оГА11|а1(пе РЬок Ьагакек ЕиЕогтас!оп РаиеЬ 9.93 В а гегпаг!саЫу зсаЫе епкуспе апй са геяасапс со шассгчасюп Ьу Ьеас апй йесегВепся Рог сЫа геааоп, ВАР ь й!ЕЕсси!с со геточе ас сЬе епй оЕ с(ерЬоарЬогу1абоп геасс!опа.
° С!Р (а а йииепс В!усоргосеш, сотроаей оЕ сио 514-геяйие июпогпега, ЕЬас Ь Ьоипй со ЕЬе р1аяпа тегпЪгапе Ьу а РЬоарЬассйу!шоясо! апсЬог (НоЕЕспапп-В1ите ес а!. 1991; ССге!аа!В ес а1. !993) апй счЬоае орсипа! епкуисассо асСпйсу йерепйа оп ЕЬе сопсепсгасюпь оЕ МВс~ апй 7пс'. Боте Хп'~, Ьоипс) ас а сага!ус!с ясе, В геци(гей Еог гаса!ус!с асс(ч!су. МВс+, счЫсЬ Ыпйа ас а й!ЕЕегепс ясе, (а ап а)!оасег!с асс!часог. Носчечег, Хпс', (Е ргеаепс ш ЫВЬ сопсепсгабопя сч!!! сотресе Еог ЕЬе МВс~ ЫпгВпВ ясе апй ргечепс сЬе а11оасепс ас6час!оп (Регп1еу 197Ц.
С!Р сап Ье геагВ!у й(Веасей иЬЬ ргосе(паче К апй(ог шассгчасей Ьу Ьеас(пВ (со б5"С Еог 30 ииписеа ог 75 С Еог 10 — 15 иипшеа) (п сЬе ргеаепсе оЕ 1О тхс ЕСТА. ТЬе йерЬозрЬогу!асей ТсЫА сап сЬеп Ъе рипбей Ьу ехсгасс!оп чйсЬ РЬепоЬсИого(опп, ° БАР В ьо1асес1 Егот агсс!с аЬптр апс1 Ва епкутас!с ргорегбеа аге яии1аг со сЬоае оЕ С1Р. Нпйсе ВАР, БАР (а ипасаЫе ас е!ечасей сетрегасигеа апй, ассоггВпВ со сЬе тапиЕассигега, сап Ъе сотр1есе!у(пас6- часей Ьу ЬеабпВ со б5'С Еог ! 5 ииписея Ночгечег, то!еси!аг Ью!оВу сЬас ясеа оп сЬе счеЬ Егес!иепс!у сопса(п сопипепса Егосп сысогпега счЬо аиВВеас сЬас сЬе апаше псау пос Ъе сотр!есе!у !пас6часей Ъу ЬпеЕ Ьеас!пВ. То Ье Еа(г, аЬоис ап ециа! пшпЪег герогс ЕЬас сЬеу Ьаче по ргоЫета ш шасс!час(пВ БАР. Ноъчечег, Со Ье оп сЬе зауе яйе, ъче гесопипепй Ьеа6пВ со 70 С Еог 20 пиписеа со епаиге сотр!есе !пас6ча6оп оЕ БАР.
А)(га!ше РЬоарЬасааеа аа а Вгоир аге шЫЬссей Ьу шогВап(с огсЬорЬоьрЬасе Я(сс!е апй 17е11а Моп(са 1950), Ьу сЬе!асога оЕ гпеса1 юпа яюЬ аа ВЕ7ТА апс1 ЕСТА, Ьис пос со а оп!Веапс ехсепс Ьу г1йаоргору1- ВиогорЬоарЬасе, а рои егуи! шЬ(ЬЬог оЕ осЬег аеппе Ьуйго!ааеа (РаЫсЬ апй ЫеиЬаиа 19бб). г-РЬепу!а(атпе ь а попеоисре66че шЬсЬсгог оЕ С1Р (ЪЧе!аа!В ес а1.
1993). 9.94 С/|арсе< 9: РтерагаНоп и/'гса<Е/о!аЬе)е<Е РИА ап<! К)ь/А РгоЬеь КЕГЕКЕ)ЧСЕЯ АаьЬеии Н.С., Ео8|епЬе<8 Т., апЛ Еагьеп Е !997. 5иЬ<гасЕче ЬуЬпйгабоп Еог сЬе Во!а|юп оЕ Л)ЕЕ<сепг)а!1у ехргемес) Вепеь ияп8 та8пес)с ЪеаЛь. Мейой Мо1. В|о1.
69| 115 — 128. АЛать М.Р., Кег!ача8е А.К., НеВсЬгпапп К.Р., Ри1Лпег К.А., Ви1| С.!., Еее Х.Н., К|г)<пем Е.Е, )Ае)посо<)< К.С., Сосаупе !.Р., ИЫ<е О., ес а1.! 995. 1пЬ)а! амемгпеп| оЕ Ьшиап депе йчегясу апЛ ехргемюп рас|егпь ЬаьеЛ ирои 83 пиПюп пис!ео|Ыеь оЕ сРХА ье<)иепсе. Ха<иге (юрр!. 6547) 377| 3 — 174. АКга|ча! 5., СЬгВ|оЛои1ои С., апЛ СаК М.!.! 986.
ЕЕЕ<)епс те|Ь- о<Ь Еог а|сасЬ~п8 поп-гайоасбче !аЬе!ыо |Ье 5' епсЬ оЕ ьуп|Ьебс о118оЛеохупЪопис!ео|Ыеь. Хис1е)с А<1Ль Кеь. 14| 6227— 6245. Ап8егег ЕМ., Сох К.Н., апЛ Ап8егег К.С. 1987. Ретопь|гаВоп оЕ |Вюе-ьрес|йс Вепе ехргеьяоп Ъу ш ясн ЬуЬпйгаЕоп. Мейой Еагуто1. 152: 649 — 66! Апьог8е 1Ы., 5ргоа| В., Яе8еп|апп !., 5сЬьча8ег С., апЛ уеп)<е М. 1987. Аи|огпасеЛ РХА ьес)иепс)п8: 0!сгаьепяВче Ле|ес|юп оЕ Пиогеьсепс Ьап<Ь с1ипп8 е!ессгорЬогеяь, №с1е|с А<ЕЛ| Кеь.
15: 4593-4602. Апсе<!пега Е апЛ В)гЛ А. 1993. ХшпЬег оЕ Срб В1апЛь апЛ Вепеь |п Ьшиап апЛ тоиье. Ргос. Хай Асай 5с|. 90: 11995 — 1!999. . 1994. Ргейсс)п8 |Ье |оса! пшпЬег оЕ Ьшпап Пепе| Есоттепг). №|. бепех 8: 114. Ахе! К., Ре|8е!ьоп Р., апЛ 5сЬшг б. 1976. Апа1уяь оЕ йе сагир!ехЬу апЛ йчегясу оЕ п|КХА Егот сЫс1<еп 1|чег апЛ очЫисс.
СеП 7: 247 — 254. Ва1еь К.К., Наппоп К., 5иий П, С.К., апЛ 5апсегге К.Е !993. 5)п8!е-ьсгаиЛ<Л КХА ргоЬеь ВепегасеЛ !гоп| РСК-ЛепчеЛ РХА сетр1а|еь. Мо1. СеП. Ргобеь 7: 269 — 275. Вап|1е ).А. ап|1 НаЬп Ч<.Е. 1976. Согпр1ехиу апЛ сЬагассег|гаВоп оЕ ро!уас)епу1асес1 КХА )и сЬе |поиье Ъга|п.
СеП 8: 139 — 50. Васга 5.К., Ме|г8аг К5., апс1 Но!! 1п8ычог<Ь М.А. 199! . А ятр1е, ейесЕче гпе|Ьос) Еог |Ье сопягиссюп оЕ юЬсгассеЛ сРХА 1|Ьгапеь. Сепе|. Аиа1. ТесЬ. Арр1. 8: 129 — 133. ВеЬепеК К. апЛ Кип)<е! Т.А. 1989. ТЬе иье оЕ паЕче Т7 РХА ро)у|пегаье Еог ы|е-йгес|еЛ гпнса8епеяь. ХисППс АсиЬ Ке|. 17| 5408. ВеЬепе)< К., !оусе СМ., Б|г8егаЫ МР., апЛ Кип1<е! ТА.! 990. ТЬе ВЛе!Ку оЕ РХА ьуп|Ьеыь саса!угес1 Ьу с1ег1чабчеь оЕ Еьсйеп<ЬЫ соП у|ХА ро1угпегаье 1.
/. В|о!. СЬет. 265: 13878 — 13887. Вес1< Р.!., Сопга!ег 5., ЪС<а<Л С.Е., апЛ Мо!)псих !.!. 1989. 5е<!иепсе оЕ Ъас|егюрЬа8е ТЗ РХА Егот Вепе 2.5 |ЬгоиВЬ Вепе 9. /. Мо1. Вю1. 210| 687-701. Вес!< 5. апЛ Коыег Н. 1990. Арр!|саВопь оЕ йохесапе сЬеии!ипипеьсепс ргоЪеь со гпо!еси!аг Ь|о1о8у Ееггашт Ааа1.
Сгегт )1991! 63| 848). Апа1. Сбет 62| 2258 — 2270. Вес1| 5., О'КееЕЕе Т., Сои11 !.М., апЛ Кояег Н. 1989. СЬепп)ипипеьсепс Лесесбоп оЕ РХА: АРР11саВоп Еог РХА ье9иепс|п8 апЛ ЬуЬпйгаВоп. ХисЬПс А<1Ль Кеь. 17: 5115— 5123. Вееье ЕЯ апЛ ЯеКг Т.А. 1991. 5|гас|ига! Ьаяь Еог |Ье 3'-5' ехопис1еаье асс)ч)су о/Вьсбеп<Ыа соП РХА ро1утегаье 1; А си<о теса! юп гпесЬапВт. ПМВО /. 10: 25 — 33.
Вееье !.5., Е|егЬуьЫге Ъ'.С., апЛ Яе|сг ТА. 1993а. 5|гас|иге оЕ РХА ро!угпегаье 1 К1епочч Ега8тепг Ъоипс1 со Лир!ех РХА. 5<1еисе 260| 352 — 355. Вееье 1.5., РпеЛгпап !.М., апЛ 5сеиг Т.А. 199ЗЬ. Сгуьга! ягиссшеь о1 |Ье К!епо|ч Ега8тепс оЕ РХА ро!у|пегаье 1 сагир)ехеЛ |чиЬ Леохупис1еояЛе спрЬоьрЬасе апЛ ругорЬоьРЬасе.
ВйсЬетеигу 32| 14095 — 14101. ВепгЛп8ег Е.А., К|есЬ А.К., Япг1еу К.Е., апЛ Ки<Ьа<П< К.К. 1995. Еча!иа|юп оЕ сЬе ьресгВсЬу оЕ а1Ы)пе РЬоьрЬасаье-соп)иВа|ес) о!18опс!ео|Ые ргоЪеь Еог Еогепяс РХА апа1уяь. Арр). ТЬеос В)есггорПог. 4| 16! — 165. Вег)<пег К.Е апЛ РоП< 'ы|.К. 1977. Ро!упис1ео|Ые Ыпаье ехсЬап8е геасиоп: ОиапсиаВче амау Еог геяпс|1оп епЛопис!еаье- Вепега|еЛ 5'-РЬоьрЬогу! |егпип) |п РХА. / В|о1. СЬ<т. 252| 3176-3184.
В)ьЬор !.О. 1974. ТЬе Вепе пшпЬегь Вате. СеП 2| 81 — 86. ВЬЬор !.О., Мог|оп 1.С., Ко|ЬаьЬ М., апЛ К1<Ьа<Льоп М. 1974, ТЬгее аЬипЛапсе с!амеь )и НеЕа сеП темеп8ег КХА. №тге 250: 199 — 204. В!апсо Е, ВегпаЛ А., В1аьсо М.А., апЛ 5а!аь М. 1991. А Вепега1 ьсгисшге Еог РХА-ЛерепЛеп| РХА ро!утегаьеь (егга|ши беае )199!) 108| 165). Сеое 100: 27 — 38. Вопа!Ло М.Е, 1.еппоп С., апЛ 5оагеь М.В. 1996. Хогп|а1иаЕоп апЛ юЪ|гасЕоп: Т|чо арргоасЬеыо Еас|11|а|е Вепе Л)ьсочег~.
бепоте Пеь. 6: 791 — 806. Вогспег С. апЛ Сп/Е||Ь !. !993. ЕаЪе11п8 ьрес|Вс епЛь оЕ РХА |чЬЬ Ъ|оВп, Ьюсш-ыгер|алЛ!и ог гайоас||че пис!ео|Ыеь. Соттепм Е0 Я В|осЬеписа) Согр.) 20: 1 — 5. Во|ч|е!1 Р.Р. 1999. Орсюпь ача|1аЫе — Егои| ьсагс со БпЬЬ вЂ” гог оЪсаш|п8 ехргеьяоп Лага Ьу иисгоаггау. Ха|. Сеоег. 21: 25 — 32. ВгаЛ|Ьа|ч К.А., Сапсе<Ыа Е, Епсмоп ЕН., Хеитапп РА., Рксо11 5.Р., 5сЫеяп8ег М.!., Я|пеуег К., апЛ 1|а1ьЬ К,А 198!. Апипо асЫ ье<)иепсе оЕ Еь<Ь<п<Ь)а соП аП<а!)пе РЬоьРЬа|аье. Ргос.