Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.2 (522942), страница 155
Текст из файла (страница 155)
|Ч)сЬ 61ТР, С)5В ю88евя ияп8 ап "ехсепяоп" сеп|регасиге оГ 60 С ъчКЬ а Погас)оп оЕ ас 1еаьс 4 пипшев. ТЬе циа16у оЕ вес)ивисе В печет аь Вопд ъчЬеп Ьаье апа!о85 аге иве6 |п р!асс оЕ сопчепсюпа1 ПЫТРь, 1с В сЬеге|оге Ье1РЕи! со!оа6 еасЬ ьес оГ геассюпь )псо е|ЕЬс а6)асепс 1аиеь оЕ а ро1уасгу!а|иЫе Ве1 |п сЬе ог6ег !АТС1ТАС, ТЬВ епвигеь сЬас еасЬ оЕ йе Гоиг ьег)иепсш8 геассюпь !ь а6)асепс со йе осЬег сЬтее апд аПоъчь йе огбег оГ с1оье!у врасед Ьапбв со Ье Песегш!пе6 июге еавПу. КеЕегепсеь: МП!ь ап6 Кгаспег (1979)с ВапЫег ап6 ВаггеП !1983); Вап ес а1.
!1986); '1аЬог ап6 К)сЬагйвоп !! 987а); 1ппВ ет а1, (1988). ТЬе тпесЬ|пе Вгоир ас сЬе Ы-7 роя6оп оЕ 7-беата-дСТР В сЬоиПЬ| со ргес! иде Гоппасюп оГ Ноо8все!п Ъопбь ап6 йегеЬу со юрргея Соппасюп оГ весоп6агу ьсгиссигеь (Ватт сс а1. 1986). Ночтечет, й|ь п|есЬ- апып Ьаь япсе Ьееп саПе6 )псо |)иевссоп !!епьеп ес а1. 1991), 1с поъч всеп|ь !Псе!у йас 7-деака апа1о8в сиге сои|ргевяопь Ьу гейтс)п8 чет6са! ьсасЫп8 1псегасс!опь Ьепчееп рш|пеь (8ее1а ес а1.
1982, 1989; !епьеп ес а1. 1991). 7-Пеага-ПСТР В ейес6че ас гево1йп8 п|апу сошртеьяопь ргеседе6 Ъу а С геьЫие. Соп|ргеяюпь рге- седед Ьу А аге Ьевс гево!чей Ьу 7-Паата-ПАТР ог Ьу а сои|Ьлпа6оп оЕ Ьо|Ь апа1о85 Депьеп ес а1. 1991). Весаые |Ье ые оЕ 7-беата-ПСТР ассепсиасеь раыеып йе сЬаш-сегтпшасюп геасиоп, ьес)иепсш8 геасбопь сопса|пш8 йе Ьаье апа!о8 йои!д а1|чауь Ье п|п |п рата!ЬП ъчПЬ всапбаг6 геассюпь сопса|пш ПСТР. 5иЬяиисюп оЕ 7-беата-ПСТР Еог с)СТР саиьеь пис1ек асЫ| со пи8гасе ьПВЬс!у Еаьсег сЬ|оиПЬ ро!у- асгу!ашЫе Пе15. ТЬе циаПсу оГ вес)иепсе В печет аь Пооб ъчЬеп Ьаье апа!о8в аге иве6 ш р!асе оЕ сопчеп6опа! 6)4ТРь. 1с В оГсеп Ье!РГи! со 1оа6 еасЬ ьес оЕ геас6опь Гпсо е)8Ьс а6)асепс 1апеь оЕ а ро!уасгу!аи|Ые Пе! ш йе огбсг а2АТСа2ТАС.
ТЬВ епюгеь сЬас еасЬ оЕ |Ье Еоиг веъ)иепсш8 геассюпь В а6)асепс со сЬе осЬег йгее ап|1 аПоъчь йе осбек оЕ с!оье!у ьрасед Ьапбь со Ье Песеппшеб июге еая!у. КеГегепсе: Мпиьаъча ст а1. (1986). ТЬе тпей|пе Вгоир ас |Ье Н-7 роьиюп оЕ 7-деага-ПАТР шау ргес1ибе Гоппабоп оЕ Ноо8всеш Ьопбв ап6 йегеЬу юрргея Гоггпа6оп оЕ ьесопбагу ягиссигев.
Ноъчечег, 7-беата-ИМАТР и|ау а1ьо сиге соп|- ргеяюпь Ьу ге6ис!и8 чесс!та) ьсасЫп8 |псегас6опь Ьеичееп рш)пеь Депьеп ес а1. 1991). 7-беата-6АТР Ье1рь со гево1че соспргеьяопь ргесебе6 Ьу ап А геьЫие. ТЬВ суре оЕ соси ргеяюп июа1- 1у саппос Ье теьоЪе6 Ьу 7-беата-ПСТР а!опе. КсГегепсе; )спаси е| а1, !1991). 1пс1ияоп оЕ Гоппаи|Ые )п ьециепс)п8 Пе15 тип ас 50'С Ьаь Ьееп герогсе6 со теюЪе сои|ргеяюпь. Ночтечег, Ве!ь сопсаиип8 ЕоппатпЫе плп ь1оъчег ап6 соо!ег йап сопчепсюпа! ро!уасгу1ашЫе Пе!ь тип ас сЬе ьаи|е чо!са8е.
1| В июаПу песеяагу со |псгеаве |Ье чо1|а8е Ьу -1096 со и|а|пса1п сеп|регасиге. Весаые Пе!ь сопсашш8 Еогп|ашЫе аге ехсгеп|е)у ьск1|у ап|1 йСТки1| со дгу, И и Ьея ъчЬегечег ровяЫе со Песке йе ъчес Пе! Гог ехроюге со Х-гау ПЬп. КеЕегепссь: Магбп 11987); КосЬе)еаи ес а!. 11992). Гпстеаяп8 йе чо1са8е гаВеь йе сегпрегашге оЕ сЬе Пе! ъчЬьсЬ, Ы шгп, ПеьсаЪ|1|кеь ьесогйагу ьсгиссшев. 1)пГогсипасе17, Ь а1ьо Пепегасеь всеср сеи|регасиге Вгайепп асгоя йе 81ая р1асев, ъчЬ|сЬ йев стас!|. Тлеаш)пасюп оГ сусояпе ъчПЬ Ь|ял!Псе ог ЬВи16|е р!ы п|ейохуапипе сопчегп йе Ьаве со шасП ап6 гедисеь йе росеп6а! Гог С-С Ьаье ра|пп8. КеГегепсе: АгпЬагпитпуап ап6 Мако (1980). 1и)огтапоп Рапе1л 12.111 7-ОЕАХА-СЕСТР ° То гейече сотргеляоил ш сЬа!и-сегиипадоп Е>ХА лес)иепсси8 (Вап ес а1. 1986; Мсхиьалча ес а1, !98б). 7-деева-дСТР са мед аь а >шЬягасе ш сЬа)п ехсепяопнегиипасюп геасссопа сЬас сопсаш елйег по дСТР ог е>)исгпо!аг апюииса оЕ дСТР апд йе Ьаье аиа! о8.
$)пдег сЬеае сопдсссопя тапу согпргеаа)опь йас аге ргеседед Ьу С аге гезо1чед. Сотргеза)опа ргеседед Ьу А аге тоге еЕВссепс1у ге1!ечед Ьу 7- деаы-дАТР, лчЬегеаа согпроипд сотргеаяопь гпау гес)шге а соплЬ>падоп оЕ 7-деаха-дС>ТР апд 7- деала-дАТР ()епзеп ес а!. $991; р1еаае а!ао аее сЬе шЕопиадоп рапе! оп СОМРКЕ55$О$95 !Ь$0ксА 5ЕС~$)ЕЬ$С)МС СЕЕ5). ° Весаиле 7-деага-дСТР (аУ) ассеисиасел раилел ш сЬе сЬаш-сеппшассоп геасдоп, ае>!кепс)п8 геасссопь сопсаш1п8 сЬе Ьаье апа1о8 аЬои!д Ье гии сп рага11е1 лчссЬ асап>1агд геасссопа сопсашш8 дСТР. !п адд)с(оп, Ьесаиае сЬе >!кайсу оЕ лес)иепсе Ь печег аз 8оод ъчЬеп Ьаае апа1о8а аге ыед сп р!асе оЕ сопчепдопа1 дЬ)ТРя еасЬ лес оЕ геассюпа ьЬои1д Ъе 1оаде>1 шсо е$8Ьс ад!асепс сапеа оЕ а ро!уасгу!аплЫе 8е! ш сЬе огдег аХАТСаУТАС.
ТЬЬ епаигев сЬас еасЬ оЕ сЬе Еош вес)кепс)и8 геасиопа са ад)асепс со йе ойег сЬгее апд а11олча сЬе огдег оЕ с1оае1у зрасед Ьапда со Ье десегиипед пюге еая1у. ТЬе >шЬадсшюп оЕ 7-деаха-дСТР Еог ВСТР саклей пис!есс ассда со ш$8гасе а!$8Ьс!у Еаяег йгои8Ь ро!уасгу1атЫе 8е1я ° То Еас$11сасе РСК атр)фспс(оа оЕ РЬ)А сегир1асеа сопла!иси8 СЕС-псЬ ге8)опа ог яаЫе зесопдагу асгиссигеь (МсСоп1о8ие ес а1. 1988). Нолчечег, йеге (а а рисе со рау Еог йЬ спсгеаьед еЕЕ>ссепсу.
лл>Ьеп 7-деаха-дС>ТР са виЬьсссисед Еог дСТР ш РСК, сЬе геял1ип8 атр1>6ед Егацтепс Ь геяасапс со с)еача8е чдй плапу геаспсдоп епхутеа лчЬоае гесо8шдоп ясеа сопсасп опе ог илоге С геак$иев, Еог ехасир1е, ЕсоЯ1, 5та1, 5а(1, Ргй Ва>пН1, 5ааЗА, А)и!, апд Асс! (Сите ес а1. 1991 8 О !! с Н нн с- СФ ! !! Фсн с~ с л О !! Π— Р— Осна О ! ОН Й Н ОН Н О О !! !! НΠ— Р— Π— Р— ОН ОН Е1СЕ)ЙЕ 12-13 5$гисСиге оЕ СЬе Ьсис1еоС)де Апаса 7-деаха-дСТР 7-деала-дСТР (а1ао са!1ед 7-ага-дСТР) )а а Ьаае апа(о8 оЕ дСТР сЬас деьсаЬ>!гаек $псгато!еси1аг шсегасдоы гп а)п81е-асгапдед пис1есс асЫа (аее р)8иге $2-$3).
ТЬе ялЬьдсисюп оЕ7-деаха-дСТР Еог дСТР тиас 1!!се!у гедисеа чег6са) асасЫп8 1псегасдопа Ьеслчееп ад)асепс риппе геасдиеа Ьесаиае оЕ а!сегадопа оЕ сЬе р е1ессгоп туалет апс$ а десгеаае ш сЬе д)ро!е июисепс (5ее!а ес а!, $982, 1989; )епаеп ес а!. 1991). 7-деага- дСТР Ь иаед ипдег сЬе Ео1!ои>си8 с)гсишьсапсеа си то!еси1аг с1опш8: 12.112 СЬаргег 12: РХА Пег)иепс!пП 01СНЕО11О01МЕТНТЕБ1ЕАЫЕ РгсЫогогПгпеЕЬу!я1апе Ь опе оЕ а 1агае Еапи!у оЕ огаапоаП(соп охЫе ро1ушегь ЕЬаг с1Ьр!ау гегпаг1гаЫу ЫПЬ сЬеписа! агаЬ)1Ьу апй ап ипиьиа! !ас)с о( айЬеяче ргорегг(еа.
ТЬе Ъеаг )гпогчп оЕ гЬеае сошроипйа аге (1) сППу рог!у, юЬоае йеЕогшаг!че, е1авг)с, апс1 гесо(ПпП ргорегг!еа аге юге го Ье жеП )спочгп го гЬоае и Ьо агеылр ш гЬе 1960а, апй (2) ОАК, а гечоЫпд агееп Поо ЕЬас игам а аоигсе оЕ йеППЬг Еог 4-уеаг о1йа !и гЬе 1990я !п пю1еси1аг с!оп(пП, огдапояПсоп огййе ро!ушегь аге ыей со ргечепс !оя оЕ шагейа! Ъу айаогрг!оп опсо яраг(асея Р)сЫогос1ипегЬу1я!апе, Еог ехагпр!е, Ь гЬе асгЫе шПгееПепс гп я!аппйпП зо!игюпа гЬаг аге сошшоп!у ыес( со ргечепс гЫп ро1уасгу1ашЫе ае!а иаей Еог РЫА аеииепс(па Егогп ьг(с)йпП го гЬе!г аиррогг(па П1ая р1агеа. Моя сопипегс!а1 я!апЫ1пП ю1шюпа сопгаш 29а сПсЫогос1ппегЬу!я!апе й(аао1чей )п 1,1,1-гйсЫогоегЬапе. ТЫа пах!иге ь япеагей очег гЬе киг(асе оЕ опе оЕ ЕЬе пчо П!аза р!агеа апй аПоъчей го йгу ш а)г.
А гпоге ечеп апй йигаЫе соайпц сап Ье асЬгечей Ьу агапй(пП гЬе р1агеа гп а ЬагЬ оЕ 5чА сПсЫогос1ипегЬу!я!апе гПако!чей ш сЫогоЕопп ог Ьергапе. ТЬе ц1ая р!агеа аге аПогчей го г)гу аг гоогп гешрегагиге апй ЕЬеп Нпаей шапу Пшел х(гЬ Н,О ЬеЕоге иге. БшаП !сепо (е.ц., писго(иае гиЬек апй йьрокаЫе ргрегге При) ыес1 ш гЬе Махаш-Я1Ьегг гпегЬос1 оЕ РЫА аег)иепсша аге Ьеаг яПсопией Ьу ечарогаг)че йероягюп оЕ а япаП апюипг оЕ ипгП1игей гПсЫогойр гпегЬу!я1апе шяйе а П!ая йеяссагог. О1аааи аге (а гЬеп Ьа)сей 1ог 2 Ьоига аг 180 С апй р1ааг)сгчаге ь г!окей ехгепяче1у и пЬ Н О Ье(оге иае. 1п~ог|паг(оп Рапе!ь 12.113 КЕА01В(С АВ[ АЕ)ТОКАО!ОСКАРН Кеал[шц РХА ье|рлепсея (гоп| це!я В ап асл)шгес[ яРПП вЂ” || В по| ая еаьу ая П 1оо1|я. ТЬе (оцоиппц 16| о| Нрь гпау Ье!р |о я(шрПгу йе ргосеы ап|1 пншвнхе ргоЫешь.
Ая ьооп аь йе ашогаецоцгарЬ и |1ече!оре|1,!аЬе1 |Ье 61ш |чвЬ гЬе |1а|е, ехроя иге Пгпе, ап|$ паше| ну |Ье |егпр1асея. ||Маг)с еасЬ ье| о( ьес[иепсшц геасиопь с1еаг1у. 1пгПсасе |Ье огс[ег ог |Ье яел(иепсшц геасповя !вас[ел[ ш еасЬ (апе (е.ц., СТАС). Ве |иге со |$!ы[пцн(ьЬ йе!е6 ап|$ йе пцЬг ыл[еь о( йе це!. ТЬе ппаце о( йе гасцоасцче 1п1| ог сЬепв1иш(поня шаг(сег ьЬон[|$ арреаг пехг |о йе яес)непс(пц геасПоп |Ьа| |чая (оас)е|$ оп |Ье Пгы !гас)с о( |Ье це1.
|гл|Ьеп ьеагсЫпц (ог соггеяропс(енсе Ьепчееп а пе|ч РХА яел[непсе ап|$ опе |Ьа| В а)геас(у )споьчп, ог (ог очег1ар Ьевчееп согпр1егпеп|агу ьес)непсеь ог яеПиепца! це! 1оа|$ь, 1оо)с (ог оЬчюш "ыцпа|игеь" яисЬ ая Ьо|поро1уше|цс гнпь (е.ц., сопьеси|!че Т гея(с[иея) ог аПегпа|шц риппе ап|$ рупвнсцпея (е.ц., СТСТСТ). Овсе (оввс!, ияе йеяе ыцпа|игеыо 1оса|е йе ье|)пенсе ол ш|егеы с(ик[с[у. Кеа|$ апс[ гесогс( ап ип(споьчп ьесрлепсе ас!еаы глч(се, ргеуегаЫу Ьу |$1ггегепг реор1е.
А1|егпацче1у, еп|ег |Ье ьес!пенсе пеке 16 а сошрн|ег-аы|ьгед це1 геа|$ег |ь нье|$. Сошраге йе пчо геас[[пць ап|$ геьо1че |Ье сцясгерапс[еь Ьу саге6|1 ге|пьресПоп апй, 11 песеыагу, Ьу (иг|Ьег ьел(непсшц. ЪЬеп геасцпц РХА яел)иепсеь цепегаге|$ оп а в|асЬ~пе, сошраге ьерага|е ьел)иенс(пц геас|юпь оп а согпршег ап|$ геяо1че сцясгерапс|ея Ьу ге(пьресПоп ну |Ье ог[ц!па! со!ог-сос)ее[ ргш|ои|. Рау саге(61 анеп|юп |о реа$| Ье(ВЬгь апс[ очег1арь, ап|$ ая(с |Ье регьоп ш сЬагце о( йе шасЫпе |о Ье!р ге|о!че |$(ьсгерапс[ея. Ь" |Ье це! Ьаь Ьееп !оас(ес[ ш |Ье огс[ег ТССА ог СТАС, геас[ йе ьел)пенсе о( |Ье согпр1егпепсагу ыгап|$ (3' |о 5') Ьу П|рр|пц |Ье ан|огагцоцгарЬ очег апс$ геа|$шц |Ье це! ггош |Ье Ьовош. (ТЬе |гас[|я оп йе П(ррес$ аи|огагцоцгарЬ аге геа|$(гош 1е6 |о г(цЬг апс[ |Ье(г ог|1ег В аышпеП |о Ье ТССА ог СТАС.) ТЬе (оцоьч(пц цшдеПпеь аге ияе6|1 |чЬеп геагцпц це1ь: Рау ьрес(а! а||епПоп |о царя ог ипечеп ярасшц!п |Ье аигога|$(оцгагпь.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
