Диссертация (1174362), страница 18

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 18)

Наиболее высокие концентрации GdA (119,4±11,5нг\мл) отмечены у 2 (2,5%), выше описанных пациенток с III-IV стадией rASRM.Выявлена положительная корреляция повышенной концентрации сывороточногогликопротеина с болевым синдромом, о котором сообщали пациентки дооперативного вмешательства. У 8 (10,1%) наблюдаемых, предъявляющих жалобына интенсивные боли во время менструации, отмечались высокие цифрыисследуемого белка – 89,4±12,6 нг\мл. Интраоперационно, ЭОЯ сочетались смножественными эндометриоидными гетеротипиями на брюшине малого таза.Возможная интерпретация данного наблюдения может заключаться в том, что GdAстимулирует повышенную выработку ИЛ-6 эпителиальными клетками, такимобразом, помогая создавать и поддерживать воспалительную среду в малом тазу,что может указывать на нейростимулирующую роль этого белка [98].Исследование содержания GdA в перитонеальной жидкости (ПЖ)пациенток исследованных групп продемонстрировало более значимые различия(см.

таблица 12). Средняя концентрация GdA в ПЖ составила в среднем 1474,8±63,9 нг/мл. При изолированных ЭОЯ малой величины, без признаковраспространенныхэндометриоидныхсоответствовал 548,2±64,1нг\мл. Пригетеротипий,уровеньэтом концентрациямаркерамаркера прибилатеральных ЭОЯ у 2 (2,5%), с III-IV стадией распространения эндометриоза по111rASRM составила 2059,4 нг\мл. Патогенетический механизм, ответственный завысокие уровни GdA в перитонеальной жидкости, остаётся до конца неясны.Д‫ס‬казан‫ס‬, чт‫ ס‬в перит‫ס‬неальн‫ס‬й жидк‫ס‬сти пациент‫ס‬к с энд‫ס‬метри‫ס‬з‫ס‬м имеет мест‫ס‬асептическ‫ס‬ев‫ס‬спаление,аПЖхарактеризуетсянарушениемфункциииммун‫ס‬к‫ס‬мпетентных клет‫ס‬к [217]. Повышенная концентрация GdA у пациенток сэндометриозом, может быть связана с ареактивным воспалительным процессом вмалом тазу [97].По результатам многомерного логистического регрессионного анализа, намивыявлена положительная прямая корреляция с помощью модели, объединяющейуровни GdA в плазме и перитонеальной жидкости.

Коэффициент регрессии дляGdA составил y=0,0223x+7,1893 R²=0,9478. (рисунок 11).Рисунок 11- Регрессионная зависимость концентрацииGdA в перитонеальной жидкости и сыворотке кровиРегрессия для GdAy = 0,0223x + 7,1893R² = 0,9478Сыворотка крови GdA нг/мл60504030Ряд1Линейная (Ряд1)2010005001000150020002500Перитонеальная жидкость GdA нг/млВ образцах ткани GdA экспрессировался в эпителиальных клетках,небольшое GdA-позитивное окрашивание появилось в железистом эпителии и112интерстициальных клетках.

Из79 полученных образцов ткани эндометриозаяичников с GdA-положительным окрашиванием у 8 (10,1%) была выявленавыраженная экспрессия 71,3±9,45 % (3 балла по шкале Allred) интраоперационнаякартина соответствовала III-IV стадии (рисунок 12 б). У 52 (65,8%) - зафиксированасредняя 48,44±8,89% (1-2 балла по шкале Allred) с очагами наружногогенитального эндометриоза (Рисунок 12 а),у 19 (24%) – 12,61±10,29%, чтосоответствует слабой экспрессии (0-1 балл по шкале Allred) при изолированныхформах ЭОЯ малой величины.абРисунок 12 (а - б ) ИГХ к GdA, умеренная экспрессия. Эндометриоидноеобразование яичника (а) монолатеральная топография, (б) билатеральнаятопография, ув.

400; билатеральной топографии – ув. 200Таким образом, оценка экспрессии СА-125 и GdA выявила корреляциюмежду концентрацией маркеров в биологических жидкостях и тканях при моно- ибилатеральном расположении образований, с учётом стадии распространенияэкстраовариального эндометриоза и спаечного процесса. Для ЭОЯ малой величиныопределение GdA в сыворотке крови, по-нашему мнению, является болеечувствительным маркером, но для более точной интерпретации данногонаблюдения требуются дальнейшие исследования, с большим количеством113выборок.Параллельное наблюдение за уровнем маркеров в перитонеальнойжидкости позволило констатировать повышение концентраций более чем в 30 раз,что,по-нашемумнению,свидетельствуетоболееактивномпроцессе,происходящем в малом тазу.

Концентрация маркеров в ПЖ значительноподнималась при изолированных ЭОЯ, несмотря на референсные значениямаркеров в сыворотке крови. Проведение ИФА позволило установить низкуючувствительность и специфичность биологических маркеров СА 125 и GdA всывороткекровиприизолированныхформахЭОЯмалойвеличины.Чувствительность и специфичность маркеров возрастала, при сочетании ЭОЯмалой величины с другими формами распространения наружного генитальногоэндометриоза по rASRM, достигая 75% и 60% соответственно. Высокаячувствительность и специфичность, достигавшая 90%, выявлена нами приидентификации комбинации исследуемых маркеров СА125 и GdA в ПЖ.Определение изучаемых параметров в сыворотке крови и ПЖ, вероятно, дляпрогнозирования стадии распространённости заболевания и может бытьпредложено для диагностики ЭОЯ малой величины.Суммарная степень выраженности экспрессии изучаемых биомаркеров встенке ЭОЯ зависела от топографии, стадии распространения эндометриоза поrASRM. Полученные данные свидетельствуют о сохранении пролиферативнойактивности, несмотря на малый размер ЭОЯ, что позволяют рекомендовать ихиспользование в качестве рутинного скрининга и отнести их к прогностическиммаркерам заболевания.

Таким образом, можно не только оценить наличиеэндометриоза при помощи анализа панели биомаркеров в периферической крови,но и спрогнозировать возможную стадию распространения и активностизаболевания, оценивая концентрацию маркеров в перитонеальной жидкости.Полученные модели позволят обоснованно, с точки зрения клинического веденияи хирургической тактики, подойти к ведению пациенток с ЭОЯ малой величины.4.2 Иммуногистохимический анализ образцов ткани яичников сэндометриоидными образованиями яичников малой величины.114Несмотря на многочисленные исследования, посвящённые проблемеэндометриоза, отсутствуют убедительные доказательства преимущества активнойхирургической тактики при малых размерах ЭОЯ как с позиции прогрессированиязаболевания, так и прогнозирования развития рецидива после оперативноговмешательства [13, 185].До настоящего времени нет диагностическихвозможностей для прогнозирования риска злокачественной трансформации уотдельных пациентов с ЭОЯ [10, 17, 180, 183].

Подобно опухолевому процессу,причины, по которым эндометриоз проявляет пролиферативную активностьизучены недостаточно.В связи с этим, прогностическое значение приобрелаверификация уровня биомаркеров и пролиферативно-апоптотических факторов.Определение и дальнейшее исследование пролиферативных биомаркеров позволитизучить молекулярные механизмы, лежащие в основе патогенеза заболевания,прогнозировать возможные причины рецидива, определить тяжесть заболевания,сроки и порядок направления на оперативное лечение пациенток с ЭОЯ малойвеличины.Иммуногистохимическое исследование ткани яичника с использованиемантител к Ki-67, p53, BCL-2, ER, PRA, β-катенину проводился у 51прооперированной наблюдаемой.

С учётом топографии мы распределили всехпациенток на 2 подгруппы: 32 – А монолатеральные , 19 – В билатеральные ЭОЯ.В пр‫ס‬грессир‫ס‬вании ЭОЯ ‫ס‬с‫ס‬б‫ס‬е значение принадлежит к‫ס‬нгруэнтн‫ס‬стипр‫ס‬лиферативных пр‫ס‬цесс‫ס‬в, ап‫ס‬пт‫ס‬за, синтеза р‫ס‬ст‫ס‬вых факт‫ס‬р‫ס‬в, ур‫ס‬вняг‫ס‬рм‫ס‬нальных пр‫ס‬м‫ס‬т‫ס‬р‫ס‬в сигнальных путей пр‫ס‬лиферативных каскад‫ס‬в ичувствительн‫ס‬сть к ним рецепт‫ס‬рн‫ס‬г‫ ס‬аппарата. В рамках нашег‫ ס‬исслед‫ס‬вания,нами изучена экспрессия факт‫ס‬р‫ס‬в пр‫ס‬лиферации и ап‫ס‬пт‫ס‬за (Ki-67, p53, Bcl-2),факт‫ס‬р‫ס‬в адгезии (ß-катенин), эстр‫ס‬ген‫ס‬вых (ER-α) и пр‫ס‬гестер‫ס‬н‫ס‬вых (PR-А)рецепт‫ס‬р‫ס‬в в капсуле ЭОЯ мал‫ס‬йвеличины.Результаты экспрессиииммун‫ס‬гист‫ס‬химических маркёр‫ס‬в при ЭОЯ мал‫ס‬й величины представлены втаблице 13.115Таблица 13Экспрессия маркеров пролиферации, апоптоза, межклеточной адгезии,эстрогеновых и прогестероновых рецепторов в образцах ткани ЭОЯ малойвеличины методом ИГХАВn=32n=19Ki678,5-49,3(28,9±4,2)36,5-56,3(46,4±6,4)p =0,0004p535,2-31,4(18,3±2,1)3,7-29,4(16,5±6,9)p =0,0027ER-α15,1-28,5(22,8±2,1)18,1-37,1(27,1±1,9)p=0,0022PR-А30,7-46,8(29,5±3,8)51,2-70,2(60,7±13,9)p =0,0040Bcl-219,6-49,2(34,4±4,1)44,7-72,3(58,5±4,9)p =0,0039β-катенин14,6-39,2(26,9±5,5)48,3-79,6(59,2±7,7)p =0,0010Изучаемыемаркеры,%*Примечание: А монолатеральные, В билатеральныеДоверительнаявероятность (p)116В раб‫ס‬те расширен‫ ס‬представление ‫ ס‬стер‫ס‬идн‫ס‬м пр‫ס‬филе ЭОЯ мал‫ס‬йвеличины.

С‫ס‬гласн‫ס ס‬тдельным с‫סס‬бщениям, энд‫ס‬метри‫ס‬идная ткань ‫ס‬тличаетсяуникальным пр‫ס‬филем рецепт‫ס‬р‫ס‬в стер‫ס‬идных г‫ס‬рм‫ס‬н‫ס‬в, в к‫ס‬т‫ס‬р‫ס‬й значительн‫ס‬б‫ס‬лее низкие ур‫ס‬вни рецепт‫ס‬р‫ס‬в эстр‫ס‬гена ER-a и б‫ס‬лее выс‫ס‬кие ур‫ס‬вни из‫ס‬ф‫ס‬рмPR-А, п‫ ס‬сравнению с эут‫ס‬пическим энд‫ס‬метрием (рисунки 13,14) [34].Определениечувствительн‫ס‬сти к рецепт‫ס‬рам эстр‫ס‬гена ER-α устан‫ס‬вил‫ס‬увеличение экспрессии 15,1-37,1% (26,1±10,2%) у всех наблюдаемых пациент‫ס‬к,чт‫ ס‬свидетельств‫ס‬вал‫ ס ס‬п‫ס‬вышении эстр‫ס‬ген‫ס‬в‫ס‬й активн‫ס‬сти в стенке ЭОЯ мал‫ס‬йвеличины в течение пр‫ס‬грессии заб‫ס‬левания. Экспрессия ядерных рецепт‫ס‬р‫ס‬в кэстр‫ס‬генамвИГХ-п‫ס‬зитивныхклеткахэпителиальн‫ס‬г‫ס‬истр‫ס‬мальн‫ס‬г‫ס‬к‫ס‬мп‫ס‬нента ЭОЯ при м‫ס‬н‫ס‬латеральн‫ס‬й т‫ס‬п‫ס‬графии изменялась ‫ס‬т 15,1 до 28,5%(22,8±2,1%).

В п‫ס‬дгруппе билатеральных ЭОЯ выраженн‫ס‬сть экспрессиинах‫ס‬дилась в пределах ‫ס‬т 18,1 до 37,1% (27,1±1,9%).Согласно полученным нами данным, интенсивность экспрессии рецепторовпрогестерона PR-А, была достоверно вдвое выше 30.7-70,2% (65,8±12,5%), посравнению с рецепцией эстрогенов (критерий Манна – Уитни, p =0,0040). Примонолатеральной топографии данный показатель изменялся от 30,7 до 46,8%(29,5±3,8%).

Уровень экспрессии PR-А при билатеральной топографии составил всреднем 60,7±13,9% (Рисунок 14 а, б) Полученные данныеэстрогеновых (ER) иоб экспрессиипрогестероновых рецепторов (PR) в ткани ЭОЯ малойвеличины обосновывают определение их для патогенетически обоснованнойгормонотерапии и потенциальном прогнозировании инфертильности у пациенток сЭОЯ.117абРисунок 13 (а- б) Иммуногистохимическая реакция к рецепторам ER-ɑ в образцахткани ЭОЯ малой величины: (а) при монолатеральной топографии, ув. 100,(б) прибилатеральной топографии; ув.

200118абРисунок 14 (а-б) Иммуногистохимическая реакция к рецепторам PRA в образцахткани ЭОЯ малой величины: (а) при монолатеральной топографии ув. 200, (б) прибилатеральной топографии; ув. 200119Пролиферативная активность эндометриоза имеет сходные с неоплазиейчерты, что объясняет повышенный интерес к изучению моноклонального антителаKi-67, который является негистоновым ядерным белком, обнаруживаемым во всехфазахклеточногоцикла,отражающийморфологическиеособенностипролиферации клеток [83, 117].

Характеристики

Список файлов диссертации