Диссертация (1173278), страница 12
Текст из файла (страница 12)
Одним из важных биологических аспектовявляется защитная пленка слюны - «пеликула», которая представляет собойобразованный на основе белка слой на поверхности зубов. Этот органический слойможно обнаружить уже через несколько минут с начала воздействия на зубы средыполости рта. Пеликула может защищать твердые ткани зубов от эрозии, действуякак«диффузионныйбарьер»,препятствуяпрямомуконтактукислотсповерхностью зуба, что, в свою очередь, снижает скорость растворениягидроксиапатита.В течение эрозивной провокации и после нее начинают действоватьповеденческие факторы, которые способны модифицировать степень повреждениятвердых тканей зубов.
Важно отметить, что за последние десятилетия очень сильнопоменялся образ жизни людей, а также изменилось общее количество88потребляемых кислых напитков и пищи, как и частота их потребления. Висследованиях была установлена взаимосвязь между глубиной эрозии и манеройпитья, например, когда напиток удерживают во рту продолжительное время[106,169]. Парадоксально, что более здоровый образ жизни может увеличить рисквозникновения эрозии зубов, поскольку он предполагает питание, включающеепотребление большого числа фруктов и овощей, а также фруктовых и овощныхсоков.Изучение причин возникновения эрозии возможно только при наличиидостоверной информации об изменении макро- и микроэлементного составатвёрдых тканей зубов, в первую очередь эмали.
Для этой цели в последние годыбыли использованы разнообразные методы: электронная и атомно-силоваясканирующая микроскопия, лазерная масс-спектрометрия, масс-спектрометрия сионизацией проб в индуктивно связанной плазме, рентгеноспектральныймикрозондовый анализ и ряд других [3,4,6,8,9,15,18,21,29,125,133]. Ввиду этого, кнастоящему времени данные, полученные на разных приборах, с использованиемразличных методов, оказались трудно сопоставимы, поскольку результатыколичественного определения элементов отличаются в десятки (Cr, Co, Ba, Zn) илив сотни раз (Al, Mo, Re). Даже сведения о содержании наиболее существенногоэлемента - кальция - различаются в два раза.
Причинами этого являются различнаячувствительность методов, их индивидуальные особенности и ограничения. Крометого, большинство используемых методов требуют жидкого состояния образца, чтоделает невозможным прямое исследование медико-стоматологического объекта, заисключением биологических жидкостей, пробы которых тоже, как правило,требуют некоторой подготовки. Твердые образцы могут быть переведены в жидкоесостояние,например,посредствомкислотнойобработки,нопроцесссолюбилизации уменьшает концентрации определяемых элементов, и, что важно,при этом теряется информация об их распределении.В этой связи нами было предпринято исследование, целью которого явилосьповышение эффективности диагностики и лечения эрозии твердых тканей зубов на89основании данных лабораторных исследований и экспериментальной моделиэрозии.Исследование элементного состава эмали зубов в норме и при эрозиирентгенофлуоресцентным методом проводилось на базе кафедры кариесологии иэндодонтии стоматологического факультета МГМСУ им.
А.И. Евдокимова. Группаисследования включала 21 образец зубов (резцов и премоляров), на которыхимелись участки эрозии, удаленных по медицинским показаниям (рисунок 2.1). Вкачестве контроля были использованы зубы (21 образец) с интактными твердымитканями, удаление которых также было обусловлено медицинскими показаниями(воспалительныезаболеванияпародонта,необходимостьпроведенияортодонтического лечения). После удаления зубы подвергались очищению отмягких тканей, а затем помещались в раствор 95о спирта.Методом лабораторного неразрушающего исследования эмали был выбранмикрорентгенофлуоресцентный элементный анализ на приборе Bruker «M4TORNADO». Основа метода состоит во взаимодействии элементов, содержащихсяв образце, с высокоэнергетическим рентгеновским излучением, приводящим киспусканию образцом регистрируемого вторичного рентгеновского излучения(рентгеновская флюоресценция), которое является характеристикой для каждоговида атомов.
Прибор калибровали по содержанию кальция и фосфора встандартном образце гидроксиапатита Са10(РО4)6(ОН)2.В рамках данного исследования нами была проведена инфракраснаяспектроскопии ротовой жидкости (в дальнейшем используем термин «слюна»),собранной у здоровых людей и у пациентов с различной степенью развития эрозиизубов, с целью установления возможности использования инфракрасных (ИК)спектров в качестве нового простого способа диагностики этого вида патологии.Сбор нестимулированной слюны осуществлялся натощак в утренние часыпутем сплёвывания в стерильные герметичные пластиковые пробирки с пробками.Пациентам, как с выраженными эрозивными повреждениями зубов, так и сединичными случаями эрозии, были даны рекомендации воздержаться от чисткизубов и применения ополаскивателя полости рта непосредственно перед сбором90слюны.
Выполнение данной рекомендации было необходимо для того, чтобыисключить вероятность попадания частичек зубной пасты или других средствгигиены в исследуемые образцы во избежание получения ложных результатов. Дляконтроля при тех же условиях был осуществлен сбор слюны пациентов той жевозрастной группы, но без клинических признаков эрозии зубов. Собранную слюнувысушивали при 60°С в течение 12 часов, высушенные образцы прессовали скристаллическим KBr и сразу же снимали ИК-спектры.
Исследование проводилина спектрофотометре "Carl Zeiss SPECORD 80" (Германия) в диапазоне волновыхчисел 4000–400 см-1.Для воспроизведения механизма формирования эрозии нами было проведенолабораторное исследование на зубах человека, удаленных по ортодонтическим ипародонтологическим показаниям. Эксперимент проводили, когда с моментаудаления прошло не более 48 часов, во избежание возникновения изменений втвердых тканях зуба вне ротовой полости. В общей сложности в исследованиибыли использованы 20 зубов, на которых отсутствовали признаки кариеса инекариозных поражений, а также реставрации и ортопедические конструкции.Для образования эрозии в эксперименте применяли растворы кислот,содержащиеся в пищевых продуктах и напитках, в той концентрации, которуюуказывают производители на соответствующих этикетках и маркировках.Образцы визуально исследовали дважды в день до появления признаковэрозии на вестибулярной поверхности.
При появлении вышеуказанных признаковфиксировали дату и время. После этого образцы зубов с признаками эрозииисследовалиприпомощирентгенофлуоресцентногоанализаиметодомсканирующей электронной микроскопии с целью подтверждения ее идентичностиэрозии, возникающей в естественных условиях на зубах в полости рта.С целью определения оптимального метода восстановления твердых тканей зубов вобласти эрозии нами было выполнено экспериментальное исследование образцов зубов сискусственной эрозией после реставрации.
В общей сложности было использовано 36образцов зубов, по 9 в каждой группе: группа 1 – реставрация твердых тканей зубов вобласти эрозии производилась стеклоиномерным цементом VITREMER 3M ESPE; группа912 – реставрация твердых тканей зубов в области эрозии выполнялась компомером Dyract®XP; группа 3 – реставрация твердых тканей зубов в области эрозии производиласькомпозитным материалом GRADIA DIRECT; группа 4 – реставрация твердых тканейзубов в области эрозии выполнялась с использованием «сэндвич-методики».В группе 4 для реставрации твердых тканей зуба в области эрозии былиспользована «сэндвич-методика», которая предполагает использование базовогослоя из компомера, а поверхностного – из композитного материала.
В нашемисследовании мы использовали компомер Dyract® XP и композитный материалGRADIA DIRECT, которые были описаны выше.Влабораторноммикроскопиинамиисследованиибылиметодомисследованысканирующейобразцызубовсэлектроннойискусственноиндуцированной эрозией, а также различные методы реставрации твердых тканейзуба. В данной работе методом СЭМ изучали поверхность зубов в области эрозии,а также спилы и сколы зубов, проходящие через участки, где было выполненареставрация.Сколы зубов получали при помощи микротомного ножа.
При этом зубыраскалывали параллельно их длинной оси таким образом, чтобы скол проходилчерез изучаемый участок твердых тканей зуба и пломбировочного материала.Последнее достигалось при помощи нанесения специальных насечек. Спилы зубовполучали при помощи тонких дисковых фрез с напылением алмазной крошки.
Дляэтого зубы фиксировали в специальных держателях и под необходимым угломраспиливали на фрагменты требуемой толщины. В данном исследовании зубыраспиливали параллельно их длинной оси таким образом, чтобы срез проходилчерез изучаемый участок. С целью устранения смазанного слоя с поверхностиспилов их обрабатывали раствором ортофосфорной кислоты согласно методике,принятой в клинической практике. Затем их промывали в проточной воде,споласкивали в бидистилированной воде и высушивали на воздухе.Принцип действия сканирующего электронного микроскопа состоит вследующем.