Диссертация (1173214), страница 17
Текст из файла (страница 17)
На сроке 7 недель частоможно встретить безсосудистые ворсины. В третичных ворсинах в центарльнойзоне встречаются единичные капилляры, чаще не более двух. В просвете сосудовможно увидеть ядерные формы эритроцитов (рисунок 13). Часто можнообнаружить ворсины с отечной стромой, очаговыми некрозами, кровоизлияниямив мезенхиму. Встречаются ворсины со склерозом стромы. В сосудах ворсин частовыявляются тромбозы.Рисунок 13 – Сосуд ворсинчатого хориона (10 недель). Окраскагематоксилин-эозин. Увеличение 600×.В нашей работе при микросокпическом исследовании некрозы ворсинхорионавыявлены у 52 человек (57,8%). Кровоизлияния в строму ворсинобнаружены у 30 человек (33,3%).
Лейкоцитарная инфильтрация хорионазафиксирована у 9 беременных основной группы (10%). Дистрофия ворсинхориона выявлена у 46 человек (51,1%). Отек стромы хориона обнаружен у 15беременных основной группы (16,7%) (таблица 17).104Таблица 17 – Микросокпическое описание гистологических препаратовхориона в основной группе (n=90).АбсолютноеПараметрзначениеЧастота, %Некротические изменения5257,8Кровоизлияния3033,3Лейкоцитарная инфильтрация910Дистрофия ворсин4651,1Отек стромы ворсин1516,7Согласнодизайнуисследованиябылапроведенакомпьютернаяморфометрия сосудов хориона (рисунок 14).Рисунок 14 – Сосуд ворсинчатого хориона (9 недель). Морфометрия впрограмме Leika Application Suite LAZ EZ Version 2.1.0. (2012). Окраскагематоксилин-эозин.
Увеличение 600×.Укаждойпациенткиосновнойгруппыпроведенакомпьютернаяморфометрия 10 сосудов ворсинчатого хориона. Полученные результатыпредставлены в таблице 18.105Таблица 18. Морфометрия сосудов ворсинчатого хориона у беременных0,480,990,129006,735,766,420,3890036,122,9751,684,62Индекс Керногана9000,050,0360,0730,008Индекс апоптоза, %9007,12,511,42,49сосуда, мкмСредний диаметрпросвета сосуда, мкмСредняя площадьпросвета сосуда, мкм²±mМахСт. отклонение,Min0,7Ср.
толщина стенкиизмерений900ПараметрСреднее, МКоличествоморфометрииосновной группы (n=90).Средняя толщина стенки сосуда в основной группе составила 0,7 мкм.Диапазон колебания данного параметра составил от 0,48 мкм до 0,99 мкм.Стандартное отклонение средней толщины стеки сосуда в основной группесоставило ±0,12 мкм.Средний диаметр просвета сосуда составил в основной группе 6,73 мкм.Данный параметр колебался в основной группе от 5,76 мкм до 6,42 мкм.Стандартное отклонение составило ±0,38 мкм.Средняя площадь просвета сосуда составила в основной группе 36,1 мкм 2.Диапазон колебания средней площади просвета сосуда хориона составил от 22,97мкм2 до 51,68 мкм2.
Стандартное отклонение данного морфометрическогопараметра в основной группе составило ±4,62 мкм2.Средний показатель индекса Керогана для сосудов ворсинчатого хорионаосновной группы составил 0,05. Диапазон колебания данного параметра составил106от 0,036 до 0,073. Стандартное отклонение индекса Керногана сосудов хориона восновной группе составил ±0,008.Индекс апопоптоза эндотелиоцитов в основной группе составил 7,1%.Параметр колебался в пределах 2,5-11,4%. Стандартное отклонение параметрасоставило в основной группе ±2,49%.Таким образом, при описании микроскопических препаратов ворсинчатогохориона в исследуемых группах получены достоверные отличия исследуемыхпризнаков. Расчет проводился с помощью параметрического критерия Стьюдента(таблица 19).Таблица 19 – Сравнительная характеристика микросокпических параметрыворсинчатого хориона в исследуемых группах (N=180).ГруппаПоказательОсновнаяКонтрольнаяУровень( n=90)(n=90)рабс.%абс.%Некротические изменения5257,866,7<0,0001Кровоизлияния3033,32527,8>0,05Лейкоцитарная инфильтрация91044,4>0,05Дистрофия ворсин4651,177,8<0,0001Отек стромы ворсин1516,71213,3>0,05Некротические изменения в ворсинах хориона выявлены в основной группес частотой значительно превышающей показатель контрольной группы (p<0,0001;t=8,76).
Дистрофия ворсин хориона также достоверно чаще встречалась восновной группе (p<0,0001; t=7,24). Остальные показатели также были выше вгруппе невынашивания беременности.При проведении морфометрического исследованиятакже полученыдостоверные отличия в исследуемых группах. Расчет проводился с помощьюнепараметрическогокритерияМанна-Уитни(таблица20).107Таблица 20 – Морфометрическая оценка сосудов ворсинчатого хориона насроке 7-10 недель.ГруппаПоказательУровень рОсновнаяКонтрольная(n=90)(n=90)Средняя толщина сосуда, мкм0,7±0,110,9±0,12<0,0001Средний диаметр сосуда, мкм6,7±0,386,9±0,93<0,05Средняя площадь сосуда, мкм236,1±4,6239,8±10,96<0,05Индекс Керногана0,05±0,0080,06±0,017<0,0001Индекс апоптоза эндотелиоцитов, %7,1±2,493,9±1,49<0,0001Толщина стенки капилляра, состоящая из монослоя эндотелиоцитов,составила 0,7±0,11 мкм у беременных основной группы и 0,9±0,12 мкм у женщинконтрольной группы (р<0,0001) (рисунок 15).Рисунок 15 – Средняя толщина стенки сосуда ворсинчатого хориона висследуемых группах.При этом показатели диаметра просвета и площади просвета исследуемыхсосудов были практически одинаковы в исследуемых группах, что говорит обунификации разработанной методики исследования сосудов ворсинчатогохориона.
Средний диаметр просвета сосуда составил в основной группе 6,7±0,38мкм, в контрольной группе 6,9±0,93 (<0,05) (рисунок 16).108Рисунок 16 – Средний диаметр просвета сосуда в исследуемых группах.Средняя площадь сосудов третичных ворсин хориона оставила 36,1±4,62мкм2 в основной группе, и 39,8±10,96 мкм2 в контрольной группе (<0,05) (рисунок17).Рисунок 17 – Средняя площадь сосуда ворсинчатого хориона висследуемых группах.Индекс Керногана также продемонстрировал достоверное отличие в нашемисследовании.
Этот показатель в основной группе составил 0,05±0,008 и0,06±0,017 в контрольной группе (р<0,0001) (рисунок 18).1090,14Индекс Керногана0,120,10,080,060,040,02Основна яКонтрольнаяГруппаРиунок 18 – Индекс Керногана сосудов ворсинчатого хориона в исследуемыхгруппах.Индекс апоптоза эндотелиоцитов в основной группе превысил покзательконтрольной группы в 2 раза.
В группе с неразвивающейся беременностью этотпоказатель составил 7,1±2,49%, в контрольной группе3,8±1,49% (р<0,0001)Индекс апоптоза эндотелиоцитов,%(рисунок 19).1512,5107,552,50Основна яКонтрольнаяГруппаРисунок 19 – Индекс апоптоза эндотелиоцитов в сосудах ворсинчатогохориона в исследуемых группах.Такимобразом,висследованииустановленыреферентныеморфометрические показатели сосудов ворсинчатого хориона при неосложненномтечении беременности. Критерий включения срока гестации от 7 до 10 недельпозволилкосвеннооценитьморофометрическиепараметрыфетальныхэндотелиоцитов, определить диапазон их референтных значений. Рассчитаныморфометрические параметры первичных сосудов хориона при несостоявшемсявыкидыше.Полученныемикросокпическиепараметрыхориальнойткани110продемонстрировали достоверные отличия в исследуемых группах.
Анализсравнений по морфометрическим показателям сосудов ворсинчатого хорионапоказал, что большинство изученных показателей были статистически выше вконтрольной группе. Индекс апоптоза эндотелиоцитов, наоборот, был выше вгруппе с неразвивающейся беременностью. Достоверное отличие большинстваизученных параметров позволяет утверждать, что морфометрические показателикапилляров ворсинчатого хориона могут являться маркером патологическихизменений в формирующемся фетоплацентарном комплексе, и их применениеправомочно в русле изучения сосудистых нарушений во время беременности.3.4.
Биохимическая диагностика эндотелиальной дисфункцииВ исследуемых группах I этапа исследования проведена диагностикаклассическихбиохимическихмаркеровпораженияэндотелия.Вработеиспользовались те показатели, которые доступны в повседневной практике иобъективно отражают изменения при эндотелиальной дисфункции. Данный этаписследования был необходим для оценки достоверности разработанных намиморфоцитометрических показателей эндотелиальной дисфункции, а такжеопределения их корреляции с традиционными маркерами поражения эндотелия.Наиболее достоверными и достаточно доступными лабораторными показателямиизучаемой патологии были выбраны:1) Высокочувствительный С-реактивный белок сыворотки крови.2) Фактор фон Виллебранда сыворотки крови.3) Микроальбуминурия.4) Белок апоптоза р53 в сыворотке крови – единственный показатель в нашемисследовании,которыйнеотноситсяктрадиционныммаркерамэндотелиальной дисфункции, нам был необходим в целях патогенетическогообоснования разрабатываемой диагностической технологии.В контрольной группе в данное обследование вошло 18 человек (таблица21).
Средний показатель С-реактивного белка в сыворотке крови составил 1,8мг/мл. Диапазон колебания данного показателя составил от 0,2 до 4,8 мг/мл.111Стандартное отклонение концентарции С-реактвиного белка в контрольнойгруппе составило ±0,84 мг/мл*.Уровень фактора фон Виллебранда составил в контрольной группе 101,6%.Диапазон колебания концентарции фактора фон Виллебранда составил 98,512,6%. Стандартное отклонение данного показателя ±9,47%Приисследованииспомощьюиммунологическогометодауровнямикроальбуминурии у беременных контрольной группы получен среднийпоказатель 0,01 мкг/мл. Диапазон колебания от 0 мг/мл до 0,03 мг/мл, стандартноеотклонение ±0,006 мкг/млКоцентрация белка апоптоза р53 в плазме периферической крови у женщинс физиологическим течением I триместра беременности составил 0,003 Ед/мл.Диапазонколебанияданногопоказателя0,001-0,01Ед/мл.Стандартноеотклонение концентрации р53 в сыворотке крови составило 0,0013 Ед/мл.Таблица 21 – Биохимические маркеры функции эндотелия у беременныхконтрольной группы.ПараметрС-реактивныйбелок, мг/млФактор фонВиллебранда(%)Микроальбуминурия(мкг/мл)Белок р53(Ед/мл)Количествоизмерений18Среднее,М1,8МахMin4,80,2Ст.