Автореферат (1155053), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Теоретическую основу исследования составилитруды российских (Шварцбург Б.И, Кленнин В.И, Ивонин А.Г., Петровна Г.Т., Кулапина О.И.,Шейко Л. М и др.) и зарубежных (Mauro Magnanni, Ihler G. M., Pierigè F., Sun Y., Eva P., Hisiger S.,Owellen R. J., Sethi V. S., Villa C. H. et al.) исследователей, развивающих различные подходы кполучению и стандартизации новых систем адресной доставки ЛС с большим количеством системных побочных эффектов. Методология исследования заключалась в разработке эффективного,5экономичного и экспрессного метода для исследования ТИА препаратов в биоматериале, определении экономически выгодного способа увеличения эффективности инкапсуляции исследуемыхЛС в клеточные носители, демонстрации возможности использования эритроцитарных форм в качестве системы доставки ТИА (VCR и VLB), а также рекомендаций по условиям хранения и срокам годности полученных новых клеточных форм известных противоопухолевых препаратов.
Привыполнении работы были использованы методы сравнительного, документированного анализа;комплекс физико-химических методов, технологических испытаний; математические методы анализа и обработки результатов.Достоверность научных положений и выводов. Все полученные результаты и выводы,сделанные из них, основаны на достаточном количестве экспериментальных исследований. В работе использовалось сертифицированное оборудование, на которое выданы действующие свидетельства о поверке. Разработанные методики оценивали. В исследовании использован достаточный объем литературных источников отечественных и иностранных авторов.Апробация работы. Основные результаты исследования доложены на конференциях: 6-аямеждународная научно-методическая конференция «Фармобразование - 2016» (Воронеж, 2016), 7ая международная научно-методическая конференция «Фармобразование - 2018» (Воронеж, 2018),VIII Всероссийская с международным участием конференция «Физико-химические процессы вконденсированных средах и на межфазных границах — ФАГРАН-2018» (Воронеж, 2018).
Апробация состоялась на совместном заседании кафедр фармацевтической химии и фармацевтическойтехнологии, фармакологии и клинической фармакологии; управления и экономики фармации ифармакогнозии ФГБОУ ВО «Воронежский государственный университет» (12.09.2018 г.).Личный вклад автора. Лично автором осуществлен выбор научного направления, выполнена основная часть экспериментальных исследований. Во всех работах, опубликованных с соавторами, автору принадлежат постановка цели и задач, обоснование выбора оптимальных путей ихрешения, планирование и реализация эксперимента, анализ полученных результатов, формулировка общих выводов; участие в докладах и публикациях, внедрение результатов исследования.Внедрение результатов исследования.
Полученные экспериментальные результаты внедрены в учебный процесс при чтении лекций на курсах повышения квалификации фармацевтических работников по актуальным темам стандартизации и оценки качества противоопухолевых алкалоидов группы индола, а также современному состоянию проблемы применения систем адресной доставки лекарственных средств в медицине и фармации ФГБОУ ВО «ВГУ» (акт внедрения№1500-216 от 21.06.2018 г); при проведении лабораторных занятий по качественному и количественному определению бисиндольных противоопухолевых алкалоидов VCR и VLB методомспектрофотометрии в УФ-области в субстанциях и лекарственных формах со студентами кафедрыфармацевтической химии и фармацевтической технологии ФГБОУ ВО «ВГУ» по дисциплине6«Фармацевтическая химия» (акт внедрения № 1501-124 от 18.05.2018 г); при проведении лабораторных занятий по выделению бисиндольных противоопухолевых алкалоидов VCR и VLB методом гель-фильтрации из биологического материала (крови, плазмы крови, форменных элементовкрови) (акт внедрения № 1002-07 от 02.07.2018 г).Соответствие диссертации паспорту научной специальности.
Научные положения диссертации соответствуют формуле специальности 14.04.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия. Результаты проведенного исследования соответствуют области исследования специальности,конкретно пунктам 2 и 3 паспорта специальности 14.04.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия.Связь исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационнаяработа выполнена в соответствии с планами научно-исследовательских работ ФГБОУ ВО «ВГУ»Минобрнауки РФ по научной проблеме «Исследование закономерностей аналоговых превращений аминогликанов в процессе создания новых противотуберкулезных, противоопухолевых иранозаживляющих средств» (номер государственной регистрации 01201263909).
Тема включена вплан научных исследований фармацевтического факультета ФГБОУ ВО «ВГУ» (протоколы заседаний Ученого совета факультета за период с 2012 по 2018 гг).Публикации. По материалам диссертации опубликовано 15 печатных работ, в том числе 8статей, из которых 7 в журналах, входящих в список ВАК, 4 статьи в журналах, входящих в списокScopus, 3 из которых в англоязычных журналах.Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 239 страницах машинописного текста, содержит 47 рисунков, 60 таблиц и состоит из введения, обзора литературы, описанияматериалов и методов исследования, 4 глав собственных исследований, общих выводов, библиографического указателя, включающего 270 источников, в т.ч.
252 на иностранном языке, и приложений.СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫОбъекты и методы исследования. Объектами исследований являлись винкристина сульфат и винбластина сульфат: «Винбластина-LANS®» («ЛЭНС-ФАРМ», Россия) и «ВинкристинТева» («Teva Pharmaceutical Industries Ltd.» - Израиль), «VERO-винкристин» («ЛЭНС-фарм», Россия), «Винкристин-Рихтер» («Gedeon Richter Ltd.», Венгрия), которые были приобретены на внутреннем рынке в городе Воронеже и отвечают всем требованиям действующей нормативной документации в России.Для выделения плазмы использовали донорскую кровь человека или кровь животных (беспородных крыс). В экспериментах с животными кровь получали из хвостовой вены под эфирнымили хлороформным наркозом. От одной крысы брали 2,0 мл крови в гепарированную пробирку7(1,0 мл крови – 150 мкл гепарина 5000 ЕД).
Донорскую кровь получали из аналитической лаборатории клинической больницы. Сразу после получения пробы хранили в холодильнике при +4 0Сдо момента использования. Эритроциты выделяли из периферической крови человека или крыс пометоду Boyum (1968), основанному на седиментации в одноступенчатом градиенте плотности фиколл-урографина. Для получения эритроцитарной клеточной формы VCR и VLB использовали модифицированный метод гипоосмотического лизиса.
Для выделения изучаемых ТИА препаратов избиологических материалов был применен метод гель-фильтрации на полимерных гелях декстрана(Сефадекс) G -10, G-25, G-100 («Pharmacia Fine Chemicals», Швеция). Для изучения взаимодействия ТИА препаратов VCR и VLB с компонентами плазмы и форменными элементами крови использовали разработанную методику, основанную на регистрации спектров поглощения в УФ-области VCR и VLB и измерении оптической плотности в максимуме поглощения при λ(макс) 295 нмдля VCR и λ(макс) 268 нм для VLB в воде очищенной. Спектры поглощения исследуемых объектовв УФ – и видимой областях получали с помощью прибора Hitachi U-1900 (Япония).
Спектральныйдиапазон – от 190 до 750 нм. Исследование спектров в ИК-области осуществляли на ИК-спектрофотометре «Avatar 360 FT- IR E.S.P.» в области волновых чисел 4000-500 см-1. Подготовку к снятию ИК-спектров проводили методом получения таблетки 100 мг калия бромида и 1,0 мг исследуемого препарата.Приготовление стандартных растворов. Для приготовления стандартного раствора VCRсульфата (раствора А) применяли «Винкристин-Рихтер» 1,0 мг лиофилизат для внутривенноговведения, который содержит в составе: 100% активное вещество VCR сульфата 1,0 мг (в пересчетена безводное вещество) и вспомогательное вещество - лактоза.
Cодержимое 5 флаконов (точнаянавеска) аккуратно перемещали в мерную колбу объёмом 50 мл и разводили водой очищенной дометки, получали раствор А с концентрацией 100 мкг/мл. Для приготовления стандартного раствораVLB сульфата (раствора А) применили «Винбластин-ЛЭНС» 5 мг лиофилизат для приготовленияраствора для внутривенного введения. В составе 1 флакона содержится: 5,0 мг активного веществаVLB сульфат (в пересчете на безводное вещество).
5,0 мг лиофилизата VLB (точная навеска) аккуратно перемещали в мерную колбу объёмом 50 мл и разводили водой очищенной до метки, получали раствор А с концентрацией 100 мкг/мл. Стандартные растворы хранили в темной склянкев холодильнике при +4 0С до времени употребления (не более 10 суток). В работе использовалиреактивы и растворители марки х.ч. и ч.д.а. (ЗАО «Вектон», СПб, Россия), отвечающие требованиям соответствующей НД.Определение эффективности включения ТИА (VCR, VLB) в эритроциты проводили на основе расчета теоретического процента максимального инкапсулирования по известной формуле.Для оценки поверхностной архитектоники клеток использовали метод оптической микроскопии и сканирующей электронной микроскопии. Загруженные эритроциты наблюдались под8масляной иммерсионной линзой с помощью оптического микроскопа. С помощью программы«Toupviwe» вычисляли диаметр эритроцитов (n=100), загруженных ТИА препаратами и контрольных эритроцитов в изотоническом буфере.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
