Автореферат (1154739), страница 6
Текст из файла (страница 6)
При расположении электродов в зоне имплантированныхколлагеновых мембран мы получали информацию о состоянии микроциркуляции междуэлектродами локально в интересующей нас области. Анализ состояния кровоснабженияновообразованной стенки мочевого пузыря, определяемого по значениям пика С1 вспектрограмме колебаний импеданса, выявил, что через 7 дней после имплантацииколлагеновой мембраны, как содержащей, так и не содержащей среду культивированиястволовых клеток, значения пика С1 находятся на минимальном уровне, колеблясь от 0,8 до 6мОм. Через 30 дней после операции отмечали значительное увеличение значений пика С1 вобеихсерияхопытов,чтосвидетельствовалоопрогрессивнойреваскуляризацииновообразованной стенки мочевого пузыря. При этом степень возрастание пика С1 была24достоверно выше в группе животных, которым имплантировали коллагеновую мембрану,содержащую среду культивирования стволовых клеток, по сравнению с опытами, в которыхиспользовали стандартную мембрану (Рисунок 10).35302520151050Норма7 дней30 дней30 дней +КСРисунок 10 — Средние значения пика С1 (мОм), характеризующего состояние кровоснабжениестенки мочевого пузыря в зоне имплантации коллагеновых мембран.
* - различия достовернымежду группами мембран без КС и с КСВажнымпоказателемфункциональногосостоянияорганаявляетсясохранениевзаимосвязи между интенсивностью кровоснабжения и выраженностью функциональнойнагрузки, что отражает степень восстановления регуляторных взаимосвязей между этимипараметрами. Измерение динамики значений пика С1 при наполнении мочевого пузыря до егомаксимальнойемкостипоказало,чтовобеихсерияхпроисходитинтенсификациякровообращения в стенке органа, как и в нормальном мочевом пузыре (Кирпатовский В.И.
исоавт., 2014). Однако все значения в группе опытов с использованием коллагеновой мембранысо средой культивирования стволовых клеток оказались достоверно выше, чем в опытах смембраной без культуральной среды (Рисунок 11). При этом значения внутрипузырногодавления в обеих группах существенно не различались (5,3±1,1 и 4,9±1,4 см водн. ст. в началеисследования и 32,4±2,2 и 37,1±2,4 см водн.
ст. при максимальном наполнении мочевогопузыря, соответственно).Через 10 минут в условиях максимального наполнения интрамуральный кровотокнесколько снижался. При этом в первом случае он по-прежнему оставался выше исходныхзначений, тогда как во втором случае он уменьшался в большей степени.Эти данные свидетельствуют, что при цистопластике с использованием коллагеновоймембраны, содержащей среду культивирования стволовых клеток, происходит не только болееполноценнаяваскуляризацияновообразованнойстенки,ноивбольшейстепени2550454035302520151050ПустойМакс.
наполнениеМембран без КС10 мин.наполненияМембраны с КСРисунок 11 — Динамика пика С1 (мОм)в процессе проведения инфузионной цистометриивосстанавливается регуляция интраорганного кровотока в зависимости от функциональнойнагрузки на орган.При исследовании функции реконструированного мочевого пузыря мы оценивалипараметры, характеризующие функцию накопления.При исследовании изменения максимальной функциональной емкости мочевого пузырясразу после резекции и через 1 месяц выявили, что в серии опытов с резекцией мочевого пузырябез цистопластики сразу после резекции его максимальная емкость уменьшалась с 38±1 мл до23±1 мл (p<0,001).
Через 1 месяц после резекции она существенно не изменилась, составив25±1 мл. В опытах с замещением дефекта стенки мочевого пузыря после его резекции сиспользованием стандартной коллагеновой мембраны через 1 месяц после операциимаксимальная емкость мочевого пузыря составила 26±1 мл, а при использовании коллагеновоймембраны, содержащей кондиционированную культуральную среду стволовых клеток, онадостоверно возросла — до 35±2 мл (p<0,01), приблизившись к нормальным значениям(Рисунок 12).Другим важным показателем функционального состояния мочевого пузыря являетсяспособность его стенки сохранять низкий тонус при постепенном наполнении мочой безрезкого роста внутрипузырного давления (показатель «объем/давление», характеризующийкомплаентность мочевого пузыря). Проведенное исследование показало, что в серии опытов,где дефект мочевого пузыря замещали коллагеновой мембраной, содержащей средукультивирования стволовых клеток, комплаентность реконструированного мочевого пузыря неотличалась от нормы.
В серии опытов с использованием коллагеновой мембраны безкультуральной среды, а также при резекции без цистопластики отмечали резкое повышение26внутрипузырного давления даже при небольшом объеме введенной жидкости. (Рисунок 13).45*4035302520151050НормаРезекцияРезекция+мембрана Резекция+мембранас КСРисунок 12 — Сравнение изменения максимальной емкости мочевого пузыря (мл)через 1 месяц после его резекции без и с заместительной цистопластикойразличными коллагеновыми мембранами.* — различия достоверны по сравнению с резекцией мочевого пузыря без цистопластики70см. вод. ст.6050Мембрана с КС40Мебрана без КС30Резекция20Норма1000510152025млРисунок 13 — Зависимость «объем/давление» при инфузионной цистометриив разных сериях опытовТаким образом, в этих опытах комплаентность реконструированного мочевого пузыряоказалась значительно сниженной, что может быть связано с тем, что часть стенки органазамещалась функционально неактивной соединительной тканью, обладающей относительновысокой жесткостью, тогда как при использовании для цистопластики мембраны со средойкультивирования стволовых клеток в новообразованной стенке регенерировали функциональноактивные гладкомышечные клетки.
Наихудшие результаты, полученные в опытах с резекцией27мочевого пузыря без цистопластики, могут быть связаны с уменьшением его функциональнойемкости и рубцеванием стенки в зоне ушивания дефекта.Проанализироваврезультатыэкспериментальныхисследований,мыпосчиталивозможным провести клиническую апробацию использования препаратов коллагена I типа длязаместительной пластики мочевых путей.
У больной с протяженным ятрогенным дефектомстенки мочеточника на границе верхней и средней трети, развившимся при контактнойлитотрипсии, и паранефральной гематомой заменили поврежденный участок трубчатымколлагеновым имплантатом. В течение 8 месяцев имплантат обеспечивал адекватный транспортмочи, но позднее начали развиваться обструктивные осложнения. Причина их точнонеизвестна.
Предположительно формирование стриктуры мочеточника могло быть следствиемсклерозирования периуретральных тканей как последствие периренальной гематомы. Косвеннооб этом свидетельствует позднее начало обструктивной симптоматики. Если бы стриктурасформировалась вследствие сморщивания коллагенового имплантата, то симптомы нарушенияоттока мочи от почки появились бы значительно раньше. Его замещение тканями организма, понашим данным, происходит в течение 1 месяца, и к этому сроку он должен был давнорассосаться.Поскольку в данном наблюдении был использован коллагеновый протез, несодержащий продуктов секреции стволовых клеток, то, согласно нашим данным, он долженбыл заместиться преимущественно соединительной тканью, но длительность адекватногодренирования почки в течение 8 месяцев свидетельствует, что это не ухудшило транспортмочи.Впоследствии все манипуляции были направлены на восстановление оттока мочи.
Послеустановки спирали «Мемокат» проходимость мочеточника была восстановлена и адекватныйдренаж мочи обеспечивался в течение 1,5 лет, после чего вновь появились симптомыобструкции. Обследование показало, что его причиной было избыточное разрастание слизистойоболочки и ее протрузия через спираль, что является нередким осложнением этого видаэндопротезирования. То есть, последующее рецидивирование нарушения оттока мочи уже небыло связано с коллагеновым имплантатом, а являлось следствием реакции тканей мочеточникана имплантированный эндопротез.Проведенный анализ этого случая позволил заключить, что, хотя у этой больнойотдаленный послеоперационный период требовал периодических медицинских вмешательств,тем не менее, он подтвердил принципиальную возможность использования коллагеновогоматериала для пластики мочевых путей.
Однако, безусловно, необходимы специальныеисследования для отработки показаний и противопоказаний для данного вида леченияурологических больных.28ЗАКЛЮЧЕНИЕПроведенныеэкспериментальныеисследованияиклиническоенаблюдениесвидетельствуют о целесообразности и перспективности изучения возможностей использованияпрепаратов из коллагена I типа для заместительной пластики мочевых путей. Намипродемонстрировано, что включение в состав коллагеновых препаратов компонентов,стимулирующих регенерацию тканевых структур (в наших опытах – кондиционированная средакультивирования МСК жировой ткани человека), существенно ускоряет регенерациюновообразованной стенки мочевых путей, ускоряет и улучшает ее васкуляризацию,стимулирует регенерацию гладкомышечных элементов, что способствует более полноценномувосстановлению функции реконструированного органа.Полученные результаты позволяют сделать следующие выводы:1.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
