Диссертация (1154515), страница 4
Текст из файла (страница 4)
Адгезия ипроникновение в цитоплазму клеток стенки мочевого пузыря уропатогеновактивирует серию воспалительных и апоптотических реакций в эпителии (Barberet al., 2013). Как правило, после заражения, UPEC формируют внутриклеточныебактериальные сообщества (Bahalo et al., 2013). В результате бактериальныесообщества увеличиваются в размерах, занимают весь поверхностный слой клетокэпителия мочевого пузыря и формируют биопленки (Blango, Mulvey, 2010). Напоздних стадиях формирования биопленки уропатогенов способны отделяться отуротелиальных клеток в просвет мочевого пузыря, вызывая бактериурии,распространение возбудителя в организме и способствуя проникновению другихбактерий (Schlager et al., 2009).211.4. Клинические проявления инфекций мочевыводящих путейКоличество разновидностей инфекций мочевыводящих путей огромное,причем каждый синдром имеет свою уникальную эпидемиологию, естественнуюдинамику и клиничиеские проявления.
Некоторые инфекции проявляются либоисключительно в нижних мочевых путях, либо исключительно в верхних мочевыхпутях (Hertting, 2011).Острый уретральный синдром.Данный синдром возникает у женщин с острыми симптомами инфекцийнижних мочевых путей при наличии или отсутствии видимой бактериурии иливульвовагинальных инфекций (HPA, 2012).Неосложненные инфекции мочевых путей.Данные инфекции возникают обычно у здоровых пациентов, структура ифизиологическое состояние мочевых путей которых не содержит каких-либоотклонений и для которых не диагностировались какие-либо другие заболеваниядо выявления бактериальной инфекции (SIGN, 2012).Острый неосложненный цистит.Инфекция и/или воспалительный процесс, протекающий в мочевом пузыре;обычно диагностируется у молодых женщин. Для него характерны сильновыраженныесимптомы,которыеобычносопровождаютсяпризнакамивоспалительного процесса нижних мочевых путей, вызванных гонококковым илихламидийным уретритом (Rosen, Klumpp, 2014).Осложненные инфекции мочевых путей.Подданнымтерминомпонимаютсяинфекциимочевыхпутей,сопровождаемые нарушением функций или строения организма, что может статьпричиной более серьезной инфекции (Simon, Zieve, 2012).
В число осложненныхИМП включаются следующие патологии.1. Острый пиелонефрит.Воспалительный процесс, локализованный в почках и прилегающей к нимобласти, который характеризуется болями в области живота, болезненностью при22дотрагивании, тошнотой, рвотой и повышением температуры (Albala et al., 2011).По степени серьезности заболевание может варьировать от достаточно легкойформы до полного сепсиса. Последствия несвоевременного лечения данногозаболевания включают в себя сморщивание почек, развитие хронической болезнипочек и смерть (Manning et al., 2010).2. Хронический пиелонефрит.Второй по распространенности фактор, приводящий к конечной стадиипочечной недостаточности.
Считается результатом травмирующего воздействияИМП на почки младенцев и детей в виде пузырномочеточникового рефлюкса(ПМР) или обструкции мочевыводящих путей у взрослых (Ryan, Ray, 2004). Втяжелых случаях почки слегка увеличены в размерах, имеют прерывистыеконтуры и желтоватый оттенок; на их поверхности видны явные гнойники(Vasudevan, 2014).3. Перинефральный абсцесс.Осложнение ИМП, поражающее пациентов с анатомическими илифизиологическими нарушениями почек.
Абсцесс может быть локализован кактолько в околопочечной области, так и распространяться на прилегающие органы.При анализе мочи наблюдается пиурия (Raz, 2011).4. Простатит.Воспалительный процесс в предстательной железе, который можетпротекать в нескольких формах (Chamberlain, 2009).
Передача инфекцииосуществляется несколькими способами: продвижение инфекции вверх отмочеиспускательного отверстия по мочеиспускательному каналу в результатеполового акта, рефлюкс зараженной мочи в ткани предстательной железы черезсемяизвергательный канал и протоки предстательной железы, бактериальнаяинвазия из прямой кишки в результате прямого расширения (Epp et al., 2010).Острый бактериальный простатит.
Внезапное лихорадочное заболевание сярко выраженными симптомами, наиболее часто диагностируемое у мужчинвозраста половой активности (Gupta et al., 2011). К основным симптомамотносятся уменьшение либидо или импотенция, болезненная эякуляция и23обструкция выходного отверстия мочевого пузыря разной степени тяжести(Brooks et al., 2010).Хронический бактериальный простатит. Возвратные и рецидивирующиеИМП, вызванные микроорганизмами, обитающими в выделениях предстательнойжелезы, несмотря на антимикробную терапию. Встречается реже, чем простатитнебактериальной этиологии (NICE, 2015).5. Пионефроз.Подданнымтерминомподразумеваютбактериальноезаражениенепроходимого мочеточника, который заполняется гноем, что может потребоватьхирургического вмешательства (Danson et al., 2011).6.
Почечный абсцесс.Осложнениеострогопиелонефритас70%летальнымисходом,локализованное в коре почки. Также может быть вызвано наличием бактерийStaphylococcus aureus в крови (бактериемией). Может сопровождаться пиурией,однако анализ на посев мочи обычно отрицательный (King et al., 2012).7. Воспаление уретры.Воспалениемочеиспускательногоканала,сопровождаемоеи/илинесопровождаемое бактериальной инфекцией. У мужчин воспаление уретры обычновызвано возбудителями заболеваний, передаваемых половым путем и выражаетсяввыделенияхизмочеиспускательногоканалаи/илирасстройствемочеиспускания. В то же время, у женщин данное заболевание может проявлятьсякак острый уретральный синдром или уретроцистит (Baskin et al., 2013).24ГЛАВА 2.
ОБЪЕКТ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ2.1. Экспериментальные моделиОбъектом исследования явились эталонные и клинические штаммыграмотрицательных бактерий (табл. 2.1.1). Клинические штаммы условнопатогенных микроорганизмов были выделены из образцов мочи 325 пациентов спризнаками инфекций мочевыводящих путей, находящихся на амбулаторномлечении в Багдадском учебном госпитале. Идентификация выделенных штаммовбактерий осуществлялась с использованием мультитестсистемы API 20E(BioMérieux SA, Франция) для определения биохимических свойств бактерийсемейства Enterobacteriaceae.Таблица 2.1.1 - Объекты исследованияШтаммыEscherichia coli ATCC 25922Escherichia coliKlebsiella oxytocaKlebsiella pneumoniaeEnterobacter cloacaeEnterobacter aerogenesProteus vulgarisProteus mirabilisPseudomonas aeruginosaMorganella morganiiAcinetobacter baumanniiИтогоКоличество111120881510101233200Год выделения20142014201520152014201420152015201420152014 – 2015 гг.2.2.
Методы микробиологических и молекулярно-генетических исследованийОпределение спектра чувствительности исследуемых штаммов условнопатогенных бактерий к антимикробным препаратам проводили с использованиемдиско-диффузного метода (МУК 4.2.1890-04). Для этого взвесь суточнойкультуры исследуемого штамма бактерий, приготовленной по стандарту мутности0,5 по MсFarland, засевали «газоном» на поверхность агара Мюллера-Хинтона25(Oxoid Ltd., Великобритания), и помещали на поверхность посева диски,содержащие антибиотики и химиотерапевтические препараты, перечень которыхпредставлен в таблице 2.2.1.Таблица 2.2.1 - Перечень использованных антимикробных препаратов№123456789101112131415Антибиотик(Mast Diagnostics, Великобритания)АмикацинАмпициллинАмоксиклав (амоксициллинклавулановая кислота)ЦефотаксимЦефокситинЦефтазидимЦефтриаксонЦипрофлоксацинГентамицинИмипенемНалидиксовая кислотаНитрофурантионПиперациллинТобрамицинСульфаметоксазол-триметопримКодКонцентрация мкг/дискAKAMP3010AMC30CTXFXCAZCROCIPGMIPMNAFPIPTOBSXT30303030510≤ 19≤ 13≤ 14≤ 17≤ 12≤ 10Посевы культивировали при температуре 37°C в течение 24 ч, а затемизмеряли диаметр зоны подавления роста вокруг каждого из дисков иинтерпретировали полученные результаты, классифицируя выделенные штаммыпо уровню чувствительности.Для определения БЛРС использовали метод «двойных дисков» (МУК4.2.1890-04), который предполагает использование доступных коммерческихдисков с цефалоспоринами III поколения и с амоксициллином-клавуланатом.
Дляпостановки данного теста готовили взвесь исследуемых бактерий аналогичнодиско-диффузному методу и засевали ее «газоном» на поверхность агараМюллера-Хинтона. Посевы подсушивали в течение 15-20 мин, после чего наповерхность помещали диски с антимикробными препаратами: в центр – диск самоксициллином-клавулановой кислотой, а на расстоянии 20 и 30 мм междуцентрами дисков – диски, содержащие цефтазидим и цефотаксим. Результатсчитали положительным при наличии «вытянутой» зоны задержки роста в26сторону диска, содержащего клавулановую кислоту, что свидетельствует одополнительном подавлении роста микроорганизмов в том месте, кудадиффундировали и цефалоспорин III поколения, и клавуланат.
В качествеотрицательного контроля использовали эталонный штамм E. coli ATCC 25922,который лишен БЛРС.В исследованиях по обнаружению генов устойчивости к бета-лактамнымантибиотикам ctx-m, к аминогликозидам acc(3)-II и гена fimH использовалиполимеразную цепную реакцию (Garrec et al., 2011; Yazdi et al., 2012; Hamed et al.,2013; Jafari et al., 2013; Abass et al., 2014; Hojati et al., 2015; Saad et al., 2015; Ho etal., 2016). Исследование проводили в несколько этапов.1. Приготовление матрицы ДНК для ПЦР осуществляли путем выпаривания(Ruppé et al., 2009).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
