Диссертация (1154497), страница 17
Текст из файла (страница 17)
Вотсутствии патологии ПОЛ необходимо для нормального протекания многихфизиологических процессов. Однако главным условием является поддержаниеактивности ПОЛ на стационарном уровне, чему способствует АОС, так как вином порядке чрезмерное образование продуктов ПОЛ начинает оказыватьтоксическое действие на организм [Журавлѐв А.И., 1983; Петрович Ю.А., 2002].При физиологическом срыве системы АОЗ (в условиях патологическогопроцесса) процессы СРО лавинообразно разветвляются в тканях. Нарушениеокислительно-антиокислительного баланса вызывает повреждения, выявляемыена уровне мембран, затем ткани (органа) и целого организма [Барабой В.А., 1976;Клебанов Г.И., 1999; Сергеева Т.В., 2003].98Общеизвестно,чтонаиболееперспективнымсредствомдлялечениядисбиотических состояний организма являются препараты с выраженнымпробиотическим эффектом, действие которых, в первую очередь, направлено навосстановление состава микробиоты [Ермоленко Е.И., 2009].
В свою очередь, длявосстановленияАОЗорганизмавклиническойпрактикеиспользуютантиоксидантные препараты [Смирнова И.Н., 2006].Стоит отметить, что механизм коррекции происходящих расстройств при ДБ досих пор является недостаточно изученным. В последнее время интерес со стороныисследователей к этой проблеме таких, как О.В. Бухарин, Е.В. Иванова, Н.Б.Перунова, Ю.В.
Захарова, Ю.З. Габидуллин, Я.С. Циммерман и ряда другихисследователей неуклонно возрастает [Бухарин О.В., 2005; Бухарин О.В., 2009Иванова Е.В., 2009; Иванова Е.В., 2010; Захарова Ю.В., 2010; Перунова Н.Б.,2011; Габидуллин Ю.З., 2013; Циммерман Я.С., 2013; Габидуллин Ю.З., 2014].Учитывая вышеизложенное, цель нашего исследования заключалась вопределении значимых корреляционных взаимосвязей в составе мукозноймикробиоты ТК, в том числе в зависимости от показателей прооксидантноантиоскидантногобалансаколоноцитовживотныхвусловияхэкспериментального антибиотик-ассоциированного ДБ и его коррекции.В организме контрольной группы животных из 13 определяемых намиосновных представителей микробиоценоза ТК: E.coli (lac «+»); E.coli (lac «-»);Enterobacter spp.; Salmonella spp.; Citrobacter spp.; Enterococcus spp.; Streptococcusspp.; Staphylococcus spp. (коагулазоотрицательных); Staphylococcus aureus; Proteusspp.; Candida spp.; Lactobacillus spp.; Bifidobacterium spp.
было выявлено 11представителей (отсутствовали Staphylococcus aureus и Proteus spp.). При такомсоставе пристеночной микробиоты ТК мышей содержание основных продуктовПОЛ в плазме крови и в колоноцитах определялось в концентрации: AGP –0,86±0,07 и 0,35±0,04; MDA – 2,41±0,18 и 2,32±0,19, соответственно. Активностьосновных ферментов АОЗ составила: KAT – 11,87±1,11 в плазме крови и13,88±0,85 в колоноцитах; SOD – 14,47±0,74 в плазме крови и 15,85±1,03 вколоноцитах.99В ТК контрольной группы мышей при проведении КА были выявленыстатистическизначимыевзаимосвязипрямойнаправленностимеждуследующими группами микроорганизмов: Citrobacter spp. – грибы рода Candida;Staphylococcus spp. (коагулазоотрицательные) – Enterococcus spp.; Staphylococcusspp.
(коагулазоотрицательные) – E.coli (lac «-»); Enterococcus spp. – E.coli (lac«-»). Независимая взаимосвязь по результатам КЛА была образована междуCitrobacter spp. и грибами рода Candida. Взаимосвязи в остальных выявленныхгруппах были обусловлены наличием более сложной сопряженности междумикроорганизмами, а именно, количественное содержание Staphylococcus spp.(коагулазоотрицательных) напрямую зависела от количества Enterococcus spp., нопри этом данная связь была обусловлена численностью E.coli (lac «-»), приотсутствии которой выявленная сопряженность могла бы утратить своюзначимость.
Также было установлено, что в исходном состоянии организмамышейвколоноцитахконцентрацияMDAнапрямуюзависелаотколичественного содержания Citrobacter spp. и грибов рода Candida, при этомболее выраженная взаимосвязь установилась между MDA и Citrobacter spp.Создание экспериментального антибиотик-ассоциированного ДБ привело кизменению состава представителей как облигатной, так и транзиторноймикробиоты ТК животных. При исследовании микробиоты были выявленыStaphylococcus aureus (lgКОЕ=(5,87±1,48)) и Proteus spp.
(lgКОЕ=(3,12±0,45)), ноне определялись Citrobacter spp. и Enterococcus spp. При этом значительноснизилось количество E.coli (lac «+») (в 2,1 раза), Lactobacillus spp. (в 1,8 раза) иBifidobacterium spp. (в 1,7 раза). На фоне применения антибиотика широкогоспектра действия произошло увеличение численности Streptococcus spp. (в 3,1раза), Staphylococcus spp. (коагулазоотрицательных) (в 2,3 раза), грибов родаCandida (в 2,3 раза) и Enterobacter spp. (в 1,7 раза).В отсутствии патологического процесса система АФК самоорганизована за счетмеханизмов контроля – уровня активности антиоксидантных ферментов тканей исуммарного уровня антиоксидантной активности крови.
При ДБ наряду сизменениямивсоставекишечноймикробиотыпроисходитувеличение100содержания продуктов ПОЛ и снижение ферментативной активности звеньев АОЗколоноцитов, так как при негативном воздействии ксенобиотиков на организмпроисходит генерация АФК [Кулинский В.И., 1999; Донцов В.И., 2006; ГапонМ.Н., 2007].
В связи с этим целесообразным явилось изучение прооксидантноантиоксидантного баланса организма животных при экспериментальном ДБ. Порезультатамисследованияустановлено,чтовведениегентамицинаспособствовало увеличению концентрации продуктов ПОЛ в плазме крови: AGP– в 1,4 раза, MDA – в 1,7 раза и в колоноцитах: AGP – в 2,3 раза, MDA – в 2,0 разаза счет снижения активности ферментов АОЗ как в плазме крови, так и вколоноцитах: KAT – на 22,7% и на 23,4%; SOD – на 18,7% и на 48,6%,соответственно. Необходимо учесть, что при применении антибиотика широкогоспектра действия более выраженные изменения биохимических показателей былиотмечены в эпителиоидных клетках ТК, что может быть непосредственно связанос изменением состава микробиоты ТК при развитии ДБ в организме мышей,находящейсявсимбиозесколоноцитами.Приэтомнапряженностьантирадикальной защиты способствует интенсификации процессов ПОЛ иявляется реакцией организма на развитие антибиотик-ассоциированного ДБ.ВсостоянииэкспериментальногоДБпроизошлаперегруппировкаустановленных в контрольной группе животных статистически значимыхвзаимосвязей: Lactobacillus spp.
– Staphylococcus aureus; Staphylococcus spp.(коагулазоотрицательные)Streptococcusspp.;–StreptococcusStaphylococcusaureusspp.;–StaphylococcusProteusspp.,aureus–которыехарактеризовались прямой направленностью. Однако при ДБ отсутствовалинезависимые группы сопряжения, был образован сложный кластер, структуракоторого была сформирована следующим образом: количественное содержаниеStaphylococcus aureus было обусловлено содержанием Lactobacillus spp.,Streptococcus spp. – Staphylococcus spp. (коагулазоотрицательными), при этом, обегруппы были взаимосвязаны между собой и сопряжены с численностью Proteusspp.
В свою очередь, концентрация продукта ПОЛ MDA была связана счисленностью E.coli (lac «+»). Можно предположить, что в данном случае101изолированные из микробиоты ТК Lactobacillus spp. имели различия в видовомсоставе в сравнении с контролем, за счет чего произошли изменения уровняперсистенции,антагонистическойактивностиибиоплѐнкообразованиялактобактерий, аналогично результатам, полученным в исследованиях ИвановойЕ.В. [Иванова Е.В., 2009; Иванова Е.В., 2010] при изучении бифидобиоты приразличном состоянии микробиоценоза кишечника.
Изменениям, произошедшимприэкспериментальномантибиотик-ассоциированномДБ,способствовалоразвитие ассоциаций негативной для макроорганизма микробиоты (Staphylococcusaureus, Staphylococcus spp. (коагулазоотрицательные), Streptococcus spp. и Proteusspp.),какследствие,произошлоформированиеновыхмежмикробныхвзаимоотношений, которые, по всей видимости, способствовали подавлениюфакторовантагонизмаположительнойдлямакроорганизмадоминантноймикробиоты (Bifidobacterium spp., Lactobacillus spp., E.coli (lac «+»)).Стоитотметить,чтоанаэробныемикроорганизмымогутактивновоздействовать на среду, создавая подходящий окислительно-восстановительныйпотенциал среды: некоторые засеянные культуры анаэробных микроорганизмов,прежде чем начать размножаться, снижают потенциал среды с величины 20-25 до1-5, тем самым, ограждая себя восстановительным барьером, другие –аэротолерантные (обладают ферментами SOD и псевдокаталазой) – в процессежизнедеятельности продуцируют перекись водорода, повышая потенциал среды[Пяткин К.Д., 1971; Eschenbach A., 1989].Существует мнение, что наиболее эффективным и безопасным путемкоррекции микроэкологических нарушений в ТК является восстановление егособственной микробиоты, сформированной в процессе онтогенеза [ЧичеринИ.Ю., 2013].
Поэтому для восстановления качественного состава микробиоценозаТК были выбраны пробиотик бактистатин и синбиотик нормобакт. Исследованиемукозной микробиоты показало, что результат использования препаратов сдоказанным пробиотическим эффектом оказался более значимым при коррекцииэкспериментальногоантибиотик-ассоциированногоДБбактистатином(восстановлено 12 из 13 видов представителей микробиоты), что подтверждено102результатами ДА. При этом, так же, как и в контрольной группе животных средипредставителей микробиоты ТК не определялись Staphylococcus aureus и Proteusspp.Значенияопределяемыхбиохимическихпоказателейколоноцитовнеподверглись существенным изменениям, за исключением MDA – концентрацияснизилась в 1,3 раза при приеме бактистатина и в 1,5 раза при использованиинормобакта.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
