Диссертация (1154338), страница 30
Текст из файла (страница 30)
Установлен препарат, обладающийнаибольшей фармакологической эффективностью – верапамил, которыйиподвергся углубленному исследованию in vivo на разных видах животных.В результате изучения клеточно-матриксных механизмов, реализующихсявпроцессечрезмерногообразованиясоединительнойспайкообразовании, установлено увеличение активноститканиприфибробластов сусилением митотической активности и экспрессии транскрипционного фактораNF-κB, темпов синтеза компонентов межклеточного матрикса коллагена игликозаминогликанов, а также ростом пролиферативной активности макрофагови избыточным синтезомими провоспалительных цитокиновTNF- и IL-1.Доказано наличие связи между активностью фибробластов, макрофагов ивыраженностью спайкообразования.Приисследованиидозозависимогоэффектарегуляцииактивностифибробластов БМКК верапамилом, дилтиаземом, нифедипином обнаруженоподавление пролиферации и коллагенсинтетической функции фибробластов,снижение гиперактивности ядерного фактора транскрипции NF-κВ, приводящегокингибированиюпроцессовапоптоза,торможениемакрофагальнойтрансформации и темпов синтеза макрофагами провоспалительных цитокиновпод действием верапамила или дилтеазема.
У нифедипина данный эффектвыявлен не был. Наиболее выраженный модулирующий эффект наблюдался уверапамила в концентрации 0,0001 мл-1. Проведение исследований по экспрессиитранскрипционныхфакторовфибробластов крысичеловекаподтвердиловпервичнойкультуреперитонеальныхв перевиваемой культуре дермальных фибробластовнаибольшуюфармакологическуюэффективностьверапамила.При исследовании верапамила в качестве противоспаечного средства invivo на разных видах животных была определена максимальная переносимая дозадля внутрибрюшинного введения, не вызывавшая значимых и достоверных197изменений кардио- и гемодинамики, которая составила 0,1 мг/кг массы тела.
Нацелостноморганизмекрысикроликовподтвержденовыявленноевэкспериментах in vitro нормализующее действие верапамила на чрезмернуюактивностьфибробластовгиалуроновойкислоты,имакрофагов,темпыцитокинов,насинтезаоксипролина,интенсивностьпроцессовантипролиферативнаяактивностьспайкообразования.Выраженнаяантианаболическаяиклассического недигидропиридинового БМКК верапамила, однотипность влиянияпрепарата на молекулярные механизмы активации перитонеальных и дермальныхфибробластов позволили использовать именно его в качестве средства регуляциифункции фибробластов при формировании патологических рубцов кожи ипослужило основанием для разработки трансдермальной лекарственной формы,содержащей верапамил – антирубцового крема (патент 2290919 РФ).
Наосновании результатов технологических и биофармацевтических исследованийбыл осуществлен выбор наиболее оптимальной концентрации верапамила ипредпочтительной основы крема, проведена оценкаантирубцового крема вкачестве средства предупреждения избыточного фиброгенеза.При экспериментальном изучении динамики изменений в патологическихрубцахкожикрысустановленаэффективностькрема,проявляющаясяформированием физиологического рубца, уменьшением площади рубцовойповерхности, изменением цвета рубца, исчезновением болевых ощущений.Доказан факт более раннего структурного созревания рубца кожибезгипертрофии.
Верапамил усиливал репаративные процессы, укорачивал все фазывоспаления,блокировалгипертрофиюи,врезультате,приводилкпреимущественному формированию физиологических рубцов.Можно констатировать, что проделанная работа позволила установитьфармакодинамические закономерности и особенности действия различных группБМКК по регуляции образования соединительной ткани при спайко- ирубцовообразовании и обосновать новые возможности использования БМККверапамиладля предотвращения образования спаек в брюшной полости и198формирования патологических кожных рубцов.
Создание новой лекарственнойформы, содержащей верапамил - антирубцового крема и подтверждение егоэффективности и безопасности явилось логичным завершением работы.199ВЫВОДЫ1.Разработанная модель перитонеального спайкообразования (патент 2260854РФ)являетсяадекватнойиуниверсальной,посколькуполученыфункциональные и морфологические эквиваленты спаечного процесса,воспроизводимость модели на разных видах животных с идентичностьюраспространенности,локализацииспаек,ихморфологическиххарактеристик.2.Моделирование гемоперитонеума вызывает повышение (в среднем 6кратное) пролиферации фибробластов и активности ядерного факторатранскрипции NF-κB, приводящей к блокаде процессов апоптоза, усилениетемпов синтеза компонентов межклеточного матрикса - коллагена игиалуроновойкислоты,увеличениефункциональнойактивностимакрофагов, синтеза провоспалительных цитокинов TNF- иВыявленакорреляционнаясвязьинтенсивностиIL-1.процессаспайкообразования и анаболизма соединительной ткани, уровней TNF-,IL-1.3.В культуре активированных при гемоперитонеуме клеток доказано наличиедозозависимого антипролиферативного и антианаболического эффектов уБМККверапамилаидилтиазема.Верапамилобладаетнаиболеевыраженным эффектом, снижая в среднем в 1,6 – 2,3 раза чрезмернуюмитотическую активность фибробластов и макрофагов, избыточнуюпродукцию оксипролинана и гиалуроновой кислоты, синтез TNF- и IL-1.200Эффекты дилтиазема даже в максимальной дозе менее значимы (в среднемна35,5%),чемуверапамила.Унифедипинаизученныйфармакологический эффект не выявлен.4.Активация разных типов фибробластов - перитонеальных фибробластовкрысы и дермальных фибробластов человека - приводит к равнозначному(4,5 – 4,8-кратному) росту активных форм транскрипционного ядерногофактора.
Верапамил и дилтиазем ингибируют NF-kB перитонеальных идермальных фибробластов, и этот эффект дозозависим. Нифедипин неоказывает влияния на экспрессию NF-kB.5.Верапамил в дозе 0,1 мг/кг массы тела при внутрибрюшинном введении необладает хроно-, ино- и ангиотропным действием. Дозы верапамила 0,2мг/кги0,4мг/кгмассытелаживотногооказываюткардио-игемодинамические эффекты.6.Внутрибрюшинное введение верапамила крысам и кроликам в дозе 0,1мг/кг массы тела оказывает выраженный ингибирующий эффект напроцессыспайкообразования:фибробластовимакрофагов,тормозитчрезмернуюуменьшаетсинтезактивностьоксипролинагиалуроновой кислоты, провоспалительных цитокинов TNF- иУстановленывзаимосвязимеждучисломперитонеальныхиIL-1.спаек,содержанием оксипролина и гиалуроновой кислоты в перитонеальнойжидкости крыс и кроликов, подвергшихся воздействию верапамила.7.Впервые сконструирована мягкая лекарственная форма для наружногоприменения - антирубцовый крем, содержащий в качестве базовогокомпонента верапамил (патент 2290919 РФ).
Оптимизация состава кремаобеспечивает стабильность при оптимальной биодоступности.8.Накожное применение верапамила в составе оригинального крема являетсябезболезненнымибезопасным,проявляетсяремоделированиемпатологического кожного рубца с усилением репаративных процессов иболее ранним структурным созреванием сосудисто-стромальных элементов201без гипертрофии, формированием физиологического рубца, уменьшениемплощади рубцовой поверхности, улучшением консистенции и изменениемцвета, размягчением и уплощением, исчезновением болевых ощущений.9.Доказано наличие у БМКК верапамила нового вида фармакологическойактивности – предотвращения роста избыточной соединительной ткани.
Намолекулярном,клеточном,организменномуровняхподтвержденауниверсальность фармакологической активности верапамила в отношенииперитонеальногокожных рубцов.спайкообразования и формирования патологических202СПИСОК СОКРАЩЕНИЙАД - артериальное давлениеАК – антагонисты кальцияБМКК - блокаторы медленных кальциевых каналовМИ – митотический индексМОК – минутный объем кровиМТМ – макрофагальная трансформация моноцитовОПСС - общее периферическое сосудистое сопротивлениеПОС – послеоперационные спайкиУО – ударный объем сердцаЧСС – частота сердечных сокращенийЕСМ – внеклеточный матриксER – эндоплазматический ретикулумIg - иммуноглобулиныIFN- интерферонIL- интерлейкиныTGF-β - фактор роста соединительной тканиTNF-α - фактор некроза опухоли-альфаPDGF - тромбоцитарный фактор ростаROS – оксидантная система203УКАЗАТЕЛЬ ЛИТЕРАТУРЫ1.Адамян, А.
В. Спаечный процесс в брюшной полости: историяизучения, классификация, патогенез (обзор литературы) / А. В. Адамян, А. В.Козаченко, Л. М. Кондратович // Проблемы репродукции. – 2013. – № 6. – С. 7-13.2.Айрапетова, И. В. Эффективность лечения антагонистами кальцияпожилых больных с ХОБЛ в сочетании с ИБС и АГ в условиях поликлиники /И.
В. Айрапетова, О. О. Кузнецов, Е. Д. Ли // Клин. геронтология. – 2012. – Т. 18,№ 1/2. – С. 27-31.3.Акарачкова, Н. Блокаторы кальциевых каналов в неврологическойпрактике / Н. Акарачкова // Врач. – 2009. – № 9. – С. 35-38.4.Активность антиоксидантных ферментов в ране при глубоких ожогах/ Е. В. Михальчик [и др.] // Бюл. эксперим. биологии и медицины.
– 2009. – Т. 147,№ 6. – С. 696-699.5.Алгоритм клинико-морфологического обследования эндометрия приподготовке к лечению бесплодия методами вспомогательных репродуктивныхтехнологий / М. В. Самойлов [и др.] // Рос. мед. журн. – 2009. – № 2. – С. 29-32.6.Александров,В.В.Основывосстановительноймедициныифизиотерапии : [учеб.
пособие] / В. В. Александров, А. И. Алгазин. – Москва :Гэотар-Медиа, 2013. – 132 с. – (Библиотека врача-специалиста. Физиотерапия,реабилитация).7.Алексеев А. А. Современные представления об этиологии ипатогенезе спаечного процесса в малом тазу у женщин репродуктивного возраста/ А. А. Алексеев, А. Н.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
