Диссертация (1151613), страница 19
Текст из файла (страница 19)
и др., 2012),в частности, фабрициевой сумки. Так, при применении пробиотическихпрепаратовмассаоргановиммуннойзащитывозрастаетзасчетфизиологической гиперплазии (Маликова А.Р., 2007). Также доказано, чтоуже в эмбриогенезе возможно нивелировать нарушения микроструктурыфабрициевойсумки.(метизопринола)Например,путемвведенияприменениеегоиммуномодуляторавнутрьяйцаспособствуетположительным изменениям в гистокартине этого органа (Tykalowski B.,2009).Литературные данные (Сурай П.Ф. и др., 2010; Турицына Е.Г., 2007)свидетельствуют, что влияние именно неспецифических факторов внешнейсреды (несовершенство процессов инкубации яиц, кормления и содержанияродительского стада) на формирование органов у цыплят в процессеэмбрионального развития достаточно высоко.
В ходе таких неблагоприятныхвоздействий нарушается процесс становления иммунокомпетентных органов,чтопроявляетсяснижениемнеспецифическойрезистентностиииммунологической реактивности.Также известно, что в развитии фабрициевой сумки у цыплят различаютнесколько стадий: стадия роста (до 2-недельного возраста), зрелости (до 5-8недель), ранней инволюции (до 9-15 недель), поздней инволюции (до 25-30недель), остаточная стадия (после 30 недель) до полного исчезновения(Вракин В.Ф.
и др., 1991). Учитывая то, что в опыте были использованыцыплята суточного возраста, можно утверждать о рано начавшихсяпроцессахатрофииакцидентальнойуменьшениееефабрициевойинволюциимассыглюкокортикостероидовивсумки,или,такоргана.Приэтомобъемаподвлиянием,различныхназываемой,происходитстрессовыхбыстроепреждеситуациях,всего,чтоподтверждено нашими исследованиями.
Так, масса фабрициевой сумки в124лучшей опытной группе составила 0,084±0,002 г, а в контроле 0,069±0,001 г(разница между опытом и контролем- 21,7 % (p<0,001)). Подобная тенденциячетко прослеживалась и в других экспериментах, что исключает случайностьпреимущества и подтверждает стимулирующий эффект применяемых БАВ.Следует отметить, что изучение исследователями морфологических,гистологическихибиохимическихпоказателейсостоянияоргана,осуществлялось преимущественно в позднем онтогенезе.
В этой связиособый интерес представляет комплексное изучение фабрициевой сумки враннем постэмбриогенезе, а именно, сразу после завершения вывода цыплят.Для того чтобы более полноценно исследовать функционированиеиммунной системы необходимо оценить не только гистологическоесостояниефабрициевойразработаннойнамисумкиприкомпозиции,ноиспользованиитакжевопределитьэмбриогенезесодержаниеиммуноглобулинов в крови цыплят, поскольку их значения позволятустановить наличие или отсутствие иммуномодулирующего эффекта. Поданным литературы, исследования иммуноглобулинов птиц позволилиполучить некоторые представления об активности иммунитета в ихорганизме.
Так, роль иммуноглобулина М (IgM) достаточно краткосрочна вплане иммунных ответов и характеризуется первичной реакцией организмана любой патоген. IgY у кур во многом сходен по строению с IgGмлекопитающих и по функциям, при этом оба определяются одним и тем жеиммунотурбидиметрическимметодом,чтопозволяетиспользоватьпоследний для оценки иммунитета птицы (Ratcliffe M.J.H., 1984). IgAявляется основной формой активности антител в секретах организма(Mansikka, 1992). Также известно, что среди всех видов птиц гуморальныйответ у кур самый сильный (Higgins, 1996). В свою очередь следует обратитьвнимание на исследования Parmentier et al.
(2004), указывающие на тот факт,что естественные антитела присутствуют даже у тех кур, которые не былииммунизированы. Ламмерс А. с коллегами сделали заключение, что онимогут играть важную роль, как в инициации, так и в регуляции125специфических гуморальных иммунных реакций у домашних птиц (LammersA. et al., 2004).
При этом период полураспада иммуноглобулинов у суточныхцыплят колеблется в пределах 3 суток (Patterson et al., 1962). Именнопоэтому, интересным является определение уровня естественных антител нафоне применяемых в эмбриогенезе естественных метаболитов для выявленияих возможного иммуномодулирующего эффекта в первые сутки послевывода цыплят до проведения вакцинации.Отдельно следует обратить внимание, что именно иммунная системаптиц является наиболее стресс уязвимой и первой принимает на себя «удар»отпоследствийизбыточнойгенерациисвободнорадикальныхчастиц(Фисинин В.И.
и др., 2013).Предложенная композиция метаболитов, обладающаяантиоксидантнымдействием,способнаэффективновыраженнымпрепятствоватьснижению, как избыточной генерации свободных радикалов, так иинтенсивностилипопероксидацииворганизмецыплят,сохраняяструктурную целостность внутренних органов, в том числе важнейшегосреди тех, которые обеспечивают иммунный ответ - фабрициевой сумки.Воздействие стресс-факторов на эмбрион, а затем в постэмбриональныйпериоднацыпленка,иммунодефицита,приводитвыражающегосякформированиюнеполноценностьювторичногоразвитияморфологической структуры иммунокомпетентных органов (БессарабовБ.Ф., 2009). При гистологическом исследовании фабрициевой сумки цыплятлучшей опытной группы, были выявлены признаки умеренно развитойфизиологической гиперплазии органа, при отсутствии процессов инволюции.Процессы гиперплазии выражались в увеличении размеров лимфоидныхфолликулов органа за счёт увеличения количества лимфоцитов присохранении формы и структурных элементов, составляющих фолликулы.Увеличение размеров фолликулов происходило, прежде всего, за счётувеличения коркового слоя, в то время как мозговой слой отличалсянебольшим размером и достаточно редкими процессами апоптоза среди126лимфоцитов.
В совокупности эти данные указывают на более полноценноеразвитие органа, характерное для цыплят в данный возрастной период.Вышеуказанные позитивные эффекты, очевидно, во многом обусловленыположительными изменениями в гистоструктуре фабрициевой сумки.Входеисследованийвпервыепараметрахструктурыгистологическихбылиполученыкостякаприданныеоиспользованиикомпозиции БАВ лучшей опытной и контрольной групп.Известно, что общая масса скелета птиц составляет 8-18% массы тела примерно столько же, сколько у млекопитающих, у которых кости толще, авоздушные полости в них отсутствуют (Наумов Н.П., 1979).
В связи сразвитием эмбриона вне тела матери, у самок птиц по сравнению смлекопитающимиимеютсянекоторыеморфологическиеособенности(Глаголев П.А., 1977). Одна из них заключается в том, что у кур, например, кначалу яйцекладки во многих костях скелета, особенно в костномозговомканале трубчатых костей, появляется substantia spongiosa nova, интенсивнорасходуемое на образование скорлупы яиц. Следовательно, от того насколько качественно будет происходить процесс формирования костякаособи, зависит будущая продуктивность и здоровье птицы. Помимо этого,успешное построение костной ткани имеет немаловажное значение дляпроцесса наклёва и интенсивности вывода молодняка.
Поэтому необходимоуже в эмбриональный период обеспечить условия для полноценногоформирования костяка.Однакодействиестрессов,которыеначинаютнегативновоздействовать на организм уже в эмбриональном периоде, препятствуетполноценному развитию всех тканей, систем органов, и, наконец, зародыша вцелом (M. Y. Shim et al., 2011).Следует также отметить, что фосфолипиды играют важную роль вминерализации. Они являются каркасом для построения мембран, а коламини серин могут включаться в состав структуры мембран матриксных127пузырьков, которые выделяют остеобласты, необходимые для биологическойминерализации (Улумбекова Э.Г., 1997).Остеобластыокружаютостеоиднеминерализованный-костныйматрикс, у кур смешанная структура кости (циркулярно-параллельныеструктуры и остеоны). Остеонов в костях кур меньше, они лежат более рыхлои беспорядочно, чем у млекопитающих (Вракин В.Ф., 1984).
По мередифференцировки и появления матриксных пузырьков остеоид начинаеткальцифицироваться.По данным Улумбековой Э.Г. (1997) кости эмбрионов цыплят неполностью минерализованы, однако в период вывода, цыпленку необходимоиметьхорошосформированныйопорно-двигательныйаппаратдля«активного» проклева. Для этого, а также для минерализации костной тканитребуется много энергии (в форме АТФ) (Улумбекова Э.Г., 1997). Этот фактпослужил ещё одной мотивацией к выбору указанного спектра метаболитовименно в таком сочетании, позволяющих не только эффективно снизитьчрезмерную генерацию свободных радикалов, а, следовательно, активизациюлипопероксидации,ноинедопуститьполомкумитохондриальнойдыхательной цепи, сохранив синтез энергии в процессе.Следует также отметить, что в литературе имеются сведения о том, чтоАФК(супероксидигидроксильныйрадикалы), пероксидизбыточно образующиеся при нарушениях, вызванныхстрессоровнаорганизмэмбриона,снижаютводорода,воздействиембиосинтезколлагенаостеобластами, активно разрушают существующий, а также стимулируютфункционирование остеокластов (Казимирко В.К., 2006).Нашими исследованиями установлено, что в лучшей опытной группеотмечена тенденция к увеличению диаметра гаверсовых каналов в 1,4 раза всравнении с контролем (благодаря наличию большего количества сосудов имезенхимальных клеток), что особенно необходимо цыпленку в данныйпериод онтогенеза.
Зафиксировано возрастание толщины субхондральнойпластинки в лучшей опытной группе в 1,3 раза, следовательно, комплекс128метаболитов оказывает положительное влияние на периферический отделэпифиза, что в свою очередь служит заделом для создания прочногофундамента для суставного хряща.Метаболизм кости характеризуется двумя процессами: образованием иразрушением; благодаря определению биохимических маркеров метаболизмакостной ткани возможно оценить скорость и состояние обменных процессовв ней. Биохимические маркеры резорбции кости представлены различнымифрагментами коллагена I типа и неколлагеновыми белками, попадающими вкровоток из зоны резорбции костного матрикса.