Диссертация (1151580), страница 6
Текст из файла (страница 6)
[182, 204].Пробиотические препараты крайне необходимы как в острый периодзаболевания, так и в период реконвалесценции в связи с их способностьюоказывать антагонистическое действие на возбудителей инфекции истимулироватьиммунорезистентность.Анализданныхлитературы,свидетельствует о том, что бифидобактерии, составляющие с другимианаэробными бактериями основную часть нормофлоры при созданиинеблагоприятных условий исчезают из кишечника в первую очередь.30Элиминация или значительное снижение их количества в желудочнокишечном канале ведут к глубоким, нарушениям процессов пищеварения ивсех видов обмена.
На фоне дефицита бифидофлоры наиболее активнопроявляются патогенные свойства стафилококков, протеев, грибов родаCandida и др [193, 209].В настоящее время пробиотики на практике широко применяют вскотоводстве, свиноводстве и промышленом птицеводстве, но вместе с тем,все чаще появляется информация о применении пробиотиков в звероводстве[48, 57, 143]. По современным данным пробиотические препараты на основебифидобактерий, оказывают благоприятное воздействие на сохранностьщенковпесца.пробиотиковвРядавторовкормленииоценивалинутрийирезультатыихвлияниеиспользованиянаактивностьпищеварительных ферментов, жизнеспособность молодняка и прирост массытела зверей [86, 93]. По сведениям отдельных авторов, пробиотикиоказывают положительное влияние на воспроизводительную способностьсамок пушных зверей, их плодовитость и увеличение выхода щенков [130].Во всех случаях использования пробиотической группы препаратов впушном звероводстве получен положительный результат, но вся информацияпоихприменениюнесистематизирована,ограниченаотдельнымипубликациями и не дает полного представления о локальных и системныхэффектах [206].Таким образом, подводя итог вышеизложенному, можно заключить,что вопросам применения препаратов, стимулирующих ростовые и обменныепроцессы у пушных зверей, посвящены многочисленные исследования.Однако,многиепроблемы,касающиесяморфофункциональногостатуса пищеварительной системы куньих и влияния алиментарного факторанакожныйпокровзверей,донастоящеговремениостаютсянеразрешенными.
В частности, на сегодняшний день практически нетдостоверных сведений о влиянии пробиотических препаратов на адаптивныеперестройки общего покрова, направленные на улучшение товарно-31технологических показателей получаемого сырья. Полностью отсутствуютсведения об анатомической организации кишечной трубки у соболя. Приизучении многочисленных литературных источников нам не удалосьобнаружить однозначных и достоверных сведений относительно анатомотопическихособенностейкишечногоканалаусоболя,практическиотсутствуют сведения, касающиеся микроморфологии стенки его кишечника.Вместе с тем эти данные являются базовыми в вопросах оценки структурнофункционального состояния кишечного канала в норме и в условияхвоздействия как эндо- так и экзогенных факторов.32ГЛАВА 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ2.1 Материал и методы исследованияРабота является фрагментом комплексных исследований кафедрыанатомии и гистологии животных им.
проф. А.Ф. Климова и кафедрымелкогоживотноводстваФГБОУВОМГАВМиБ—МВАимениК.И. Скрябина. Экспериментальные исследования выполнены на кафедреанатомии и гистологии животных им. проф. А.Ф. Климова и на базе ОАО«Племенной зверосовхоз Салтыковский». Научно-производственную частьэкспериментаобщепринятымосуществлялиметодомметодикам.Объектомподборагрупп-аналоговисследованиябылпоизбранпредставитель семейства Mustelidae - соболь породы «Салтыковская-1».Экспериментальные группы были сформированы из клинически здоровыхживотных с учетом происхождения, пола, возраста, живой массы иинтенсивности роста в подготовительный период.Животныенаходилисьводинаковыхусловияхсодержанияикормления. Три раза в неделю в течение 60 суток в утреннее время животныеII, III и IV групп получали корм, содержащий исследуемый пробиотик, в товремя как I (контрольная) группа получала основной рацион.Экспериментальных животных карантинировали в течение 14 суток,проводили общеклиническое исследование и осмотр кожного покрова.Содержание и кормление животных соответствовали зоотехническимнормам.
Завершение эксперимента соответствовало плановой хозяйственнойэвтаназии с целью получения шкурковой продукции (таблица 1).33Таблица 1. Схема проведения экспериментаДоза,ПериодыКоличество мг/кгГруппыПодготовительЗаключительныголовживойУчетныйныйймассы1(к)20ОР**ОРОР8ОР +5*10220ОРпрепаратОРКОЕ*100мг100мг2,5*ОР +810320ОРпрепаратОРКОЕ500мг500мгОР +420ОРпрепарат1000мг1000мгПродолжительность дней760*КОЕ -колониеобразующая единица (colony-forming unit –CFU)**ОР - основной рацион5*108КОЕОР45Материалом для исследования служили секционный материал, а такжеобразцы кожного покрова с латеро-каудальной поверхности бедра иэвисцерированный кишечный канал соболя породы «Салтыковская-1»,отобранные в течение 1 часа после убоя.
Всего исследовано 80 животных ввозрасте до 1 года (таблица 2).МакроморфометрияГистологическоеисследованиеМикроморфометрияЭлектроннаясканирующаямикроскопияСоболь породыСалтыковская-1АнатомическоепрепарированиеГруппаживотныхСемействаMustelidaeАнатомическоевскрытиеТаблица 2. Распределение материала по методам исследованияМетоды исследования8080804014040ИТОГОВсего46034Для решения поставленных задач нами был использован комплексныйметодический подход, включающий:1.
Анатомическоевскрытиесцельюизученияанатомо-топографических особенностей органного комплекса брюшной полости иоценки структурного состояния его органов;2. Макроморфометрию органов тонкого и толстого отделов кишечногоканала;3. Эвисцерациюоргановкишечногоканаласпоследующимпроведением макро- и микроморфометрических исследований;4. Гистологическое исследование по общепринятым методам;5. Микроморфометрию стенки органов кишечного канала и общего*(кожного) покрова по классическим методикам;6. Сканирующуюэлектроннуюмикроскопиюсиспользованиемрастрового электронного микроскопа JSM-15 (Japan);7. Статистическую обработку полученных данных по общепринятымметодикам.Все термины, используемые в тексте диссертации, приведены всоответствиесмеждународнойветеринарнойанатомическойноменклатурой [75].2.2 Морфологические методы исследованияПри изучении особенностей функциональной морфологии кишечногоканала соболя традиционного кормления и добавлении в основной рационпробиотическогопрепарата–анатомическомупрепарированиюбылподвергнут материал от 80 животных.
Эвисцерацию осуществляли через 1,5– 2 часа на базе ОАО «Племенной зверосовхоз Салтыковский» послепроведения планового хозяйственного убоя.*примечание – синоним кожный покров в соответствии с Международной ветеринарнойанатомической номенклатурой, 2003 г.35Патологоанатомическоевскрытиепроводилипутемвыполненияразреза по средней сагиттальной плоскости от мечевидного хряща грудиныдо входа в таз, для лучшей визуализации органокомплекса брюшной полостиосуществляли продольные разрезы правой и левой боковых поверхностейбрюшной стенки [136].Оценку состояния органов и их макроскопическую морфометриювыполняли как непосредственно в брюшной полости, так и после эвисцераци.Определяли общую длину кишечника, его тонкого и толстого отделов, атакже абсолютные и относительные линейные параметры каждого сегментакишечной трубки [1, 67].Микроскопическоеисследованиепроводилисиспользованиемсветовой микроскопии [64].Для осуществления гистологических исследований образцы органовэвисцерированного кишечного канала и обшего покрова фиксировали в 10%нейтральном формалине.
От каждого животного производили взятиеобразцов тонкого и толстого отдела кишечника. Для изучения лимфоиднойассоциированной ткани отбирали унифицированные отрезки стенки тонкогоотделакишечникаскрая,противоположногобрыжеечному.Длягистологических исследований кожного покрова отбирали нативные участкикожи с латеро-каудальной поверхности бедра размером 1×1 см. Материалфиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, фиксирующиесвойства обуславливают образовывание метиленовых мостиков междуполипептидными цепями ткани [9, 30, 76].После фиксации образцы промывали водопроводной водой (24 часа),обезвоживали в спиртах возрастающей крепости (от 50 до 100) и заливали впарафин-воск.Серийные парафиновые срезы толщиной 5-10 мкм изготавливали науниверсальномГермания).автоматизированноммикротоме«HM-360»(Mikron,36Изучение общей морфологической картины проводили при помощисветового микроскопа «Nikon» (Япония) после окраски гистологическихсрезов гематоксилином и эозином, по Ван-Гизону по общепринятымметодикам [109, 112].Микрофотосъемкуимикроскопическуюморфометриюсостатистической обработкой осуществляли с помощью микроскопа Nikon,совмещенногоссертифицированнойпрограммойанализамикроскопического изображения ImageScope [51].2.3 Сканирующая электронная микроскопияДля определения ориентации волокнистых структур и межволоконныхвзаимоотношений в общем покрове у экспериментальных животных, невыявляемойобычнымигистотопографическимиигистологическимиметодами, проводили сканирующую электронную микроскопию (СЭМ).Материал фиксировали в 2% глютар-альдегиде в течение 5-7 суток споследующим отмыванием в фосфатном буфере и дегидратацией в рядуспиртов возрастающей концентрации.