Диссертация (1151568), страница 4
Текст из файла (страница 4)
Установлено, что введение аллогенных клеток не16вызывает пролиферативного ответа со стороны Т-лимфоцитов, существуютсведения, также, об их супрессорной способности [117].Заслуживает внимание мнение об отсутствии главного комплексагистосовместимости (ГКГ) 2-го класса у ММСК мышей, а также снижениеактивности Т-лимфоцитов [109]. У человека, применение гомологичныхММСКневызываетответнойреакцииТ-лимфоцитовдажепринерегулируемом ГКГ [129]. В исследованиях на павианах, показано, чтогомологичные ММСК способны подавлять активность лимфоцитов, вызываяпротивовоспалительный и регенераторный эффекты [90, 129, 67].ММСК относят к иммунопривилегированным клеткам и обсуждаютвозможность их использования в клеточно-регенеративной медицине [71].Клеточно-регенеративная терапия находит широкое использование вветеринарной медицине.
Это связано с тем, что рецепторы отвечающие захемотаксис, реагируют на сигналы в области повреждения, далее ММСКмигрируют в эти зоны, вызывая регенераторный процесс [77].Клеточно-регенеративную терапию используют активно при лечениилошадей с повреждениями сухожилия сгибателей пальца. Известно, чтоиспользование классических методов приводит к образованию на местетравмы рубцовой, неполноценной в функциональном отношении, ткани, вследствие чего, патологический процесс может рецидивировать [122]. ВдоступнойлитературемеханизмалечебногообсуждаетсяэффектадвеММСК.точкизренияСогласноотносительнопервой–клеткидифференцируются в тендиноциты и вызывают регенерацию за счетвыработки коллагена. Согласно второй – механизмом регенераторногопроцессаявляетсятрансплантированнымивыделениеклеткамилокальныхвобластьфакторовповрежденияроста,иихдифференцировки [43, 33].17При лечении животных с травмами соединительных тканей, например,сухожилий, применяют аутологичные ММСК, которые получают как изкостного мозга, так и из жировой ткани[115].Полученные авторами результаты, свидетельствуют о благоприятномпрогнозе после проведения лечения.
Так, по данным Пацини [106] выявленополное выздоровление у 9 лошадей из 10 с травмой сухожилия ПСП,которым производили лечение стволовыми клетками, без рецидивированиявоспалительного процесса. Brehm в 2008 году описал случай выздоровленияу 54 лошадей с применением ММСК, 80: из них вернулись к полноценнымдинамическим нагрузкам [37].В практике ветеринарной медицины неуклонно возрастает числоживотных с артропатологиями, симптомами которых является хромота. Изних одну треть составляют дегенеративные формы артритов [29].
Известно,что остеоартрозы могут иметь травматическое происхождение, а так жемогут быть обусловлены генетическими, возрастными и другими факторами[36].Установлено, что бета-трансформирующий фактор роста индуцируетхондрогенную дифференцировку ММСК, выработку 2 типа коллагена ипротеогликанов – факторов, обеспечивающих восстановление хрящевойткани [27, 33, 135].
Аутологичная синовиальная жидкость и гиалуроноваякислота вызывают хондрогенез и продукцию второго типа коллагена ММСКлошадей. Было установлено, что ММСК, полученные из мышечной ткани имодифицированные для продукции костного-морфогенетического белка-4,имплантированныевдефектгиалиновогохряща,способствоваливосстановлению структурно-функционального состояния хрящевой тканичерез 24 недели [92].Полученные из разных тканей млекопитающих ММСК способны кдифференцировке в остеобласты in vitro при культивировании в присутствииаскорбиновой кислоты, дексаметазона и глицерофосфата [88, 74, 79, 108].18ММСК-КМ при изучении остеорегенерации являются наиболее частоиспользуемыми на практике [69].Особенно перспективным является использование мультипотентныхмезенхимальных стволовых клеток в реконструктивно-восстановительнойхирургии при обработке ими коралловых имплантов [83, 114, 39, 89].Однако, вопросы о взаимодействии имплантированных стволовыхклеток с организмом, требуют дальнейшего изучения [33, 97, 72, 43, 66, 93,127, 30].Известно,чтомезенхимальныестволовыеклетки(МСК)-предшественники всех клеток соединительной ткани.
Они были выделены изкостного мозга и других тканей у позвоночных. Животные клеткиразмножаются в культуре и дифференцируются в различные виды тканей,как кость, хрящ, жир, мышцы, сухожилия, печень, почки, сердце, дажеклетки мозга. Достижения последних лет, касающиеся применения МСК врегенерации суставного мыщелка синовиального сустава – типичный примерих функциональности [28].Важноподчеркнуть,чтооднимизмеханизмовосуществлениятерапевтического эффекта ММСК, является их трофическое действие [40].Эти данные все шире и шире освещаются в доступной литературе.Трофическое воздействие стволовых клеток связано с секретируемыми имибиологическими активными веществами.
Так,в кондиционированнойММСК среде можно выделить ангиопоэтины (Ang-1, Ang-2 и др.), факторыростаэндотелиясосудов(VEGFA,VEGFB,VEGFCидр.),трансформирующие факторы роста β (TGFβ1, TGFβ3 и др.), матриксныеметалопротеазы (MMP2, MMP3, MMP11 и др.), факторы роста фибробластов(FGF1, FGF2 и др.), нейротрофические белки (NGF, BDNF, GDNF, NENF),специфические белки матрикса нервной ткани (основной белок миелина,периферический миелиновый белок и др.), адипокины, фактор ростагепатоцитов, гранулоцитарный и макрофагальный колониестимулирующий19факторы, интерлейкины (ИЛ6-8, 10-12, 15, 17D, 18 и др.), простагландин Е2(PGE2),факторнекрозаопухолей-α,белкивнеклеточногоматрикса(протеогликаны, коллагены, эластиновый матрикс, компоненты базальноймембраны и др.) и пр.[78, 109, 119].
Следовательно, главной функциейММСК в тканях является регуляция регенераторного процесса.При клеточной терапии ожогов при аппликационном нанесении ММСК,попадая в зону поражения (при системном введении за счет хоуминга поградиентустимулируютSDF-1),неоангиогенез,чтосопровождаетсяактивацией регенераторных процессов в тканях, модуляции воспаления ииммунного ответа [80]. При сочетанном культивировании ММСК сгемопоэтическими стволовыми клетками in vitro происходит подавлениероста T-клеток, являющихся важными звеньями в активации иммунногоответа, модулируя свойства антиген-представляющих клеток, а также NKклеток [82]. Секреция ИЛ10 и PGE2 оказывает подавляющее влияние намакрофаги,иT-клеткимоноциты,чтоприводиткзатуханиювоспалительного процесса в зоне поражения [76, 98, 118]. Не смотря намножество противоречивых сведений, изоженных в доступной литературеесть основание судить о возможной дифференцировке ММСК и слиянии их склетками других типов [83, 123, 124].Не смотря на достижения в области регенеративной терапии, многие ееаспекты требуют более углубленного изучения.
Прежде всего, требуетуточнениявопросмикроокружением,оаклеточномтакжеовзаимодействииколичествеММСКклеточногосихматериала,необходимого для обеспечения терапевтического эффекта [71].Анализдоступнойлитературысвидетельствует, чтоприменениемультипотентных мезенхимальных стромальных клеток в практическойветеринарной медицине – одно из перспективных направлений леченияживотных с патологиями различного генеза. [134]20В настоящее время в пластической и реконструктивной хирургииразрабатываютметодикииподходы,основанныенаприменениибиомедицинских технологий. Одним из таких направлений являетсяаутотрансплантацияжировойткани–липофилинг,собогащениемтрансплантата стромально-васкулярной клеточной фракцией. Посколькужировая ткань широко представлена в организме, не вызывает трудностей ееполучение.
Кроме того, согласно последним исследованиям, она являетсябогатым источником стволовых клеток - идеального материала для созданияновых тканей.Метод выделения клеток из жировой ткани впервые был описан вработах 1960-х годов Мартин Родбелл (Rodbell). Eму удалось отделитьзрелые адипоциты от более плотной клеточной массы, которую он назвалстромальной васкулярной фракцией (Stromal Vascular Fraction - SVF)(Rodbell, 1966).21Cтромально-васкулярная фракцияЖироваятканьсостоитпреимущественноизадипоцитов,ихпредшественников, эндотелиальных клеток, перицитов, фибробластов имежклеточного матрикса.
Адипоциты занимают более чем 90% объема тканиблагодаря своим крупным размерам, однако их количество составляет менее50%(Sugaetal.,2008).дифференцированнымимезенхимальныеНарядусоадипоцитами,клетки,внаходящиеся,зрелыми,терминальностромеприсутствуютпредположительно,впериваскулярной зоне [32].SVF представляет собой в основном стромальные и васкулярныеэндотелиальные клетки и перициты, она выделяется из жировой ткани путемферментативной обработки.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
