Диссертация (1151310), страница 11
Текст из файла (страница 11)
В предварительном исследовании измолодняка лисиц в возрасте 2 месяцев по принципу групп-аналоговформировали контрольную и 3 опытных группы. Животные контрольнойгруппы не получали янтарную кислоты. Щенкам 1, 2 и 3 опытных группвводили в рацион янтарную кислоту из расчета, соответственно, 10, 50 и 100мг/кг живой массы. Препарат вводили до момента убоя зверей в 7-месячномвозрасте ежедневно, делая через каждые 5 дней скармливания 2-дневныеперерывы.В дальнейшем (после предварительного опыта) мы использовалидругую схему исследований препарата пушных зверях. Из молоднякапушных зверей каждого вида в возрасте 2 месяцев (конец июня) по принципугрупп-аналогов формировали контрольную и опытные группы. Звериконтрольной группы не получали янтарную кислоту.
Животным 1, 2 и 3опытных групп в рацион добавляли янтарную кислоту из расчета,соответственно 5, 10 и 15 мг/кг живой массы. Препарат вводили в первые 10дней каждого месяца, делая через 5 дней скармливания 2-дневные перерывы.Всехживотныхвыращиваливстандартныхусловияхклеточногосодержания.Ежемесячно у щенков определяли живую массу на электронных весахE-scale с точностью до 10 г.
У зверей в возрасте 2, 3, 7, 12 месяцев браликровь для исследования. В 7-месячном возрасте по окончании периода55интенсивного роста и формирования зимнего волосяного покрова проводилиубой животных (ноябрь) для получения шкурки и оценки ее качества.Качество шкурок оценивали по ГОСТ 2790-88, ГОСТ 27769-88, ГОСТ 790778.Изучение влияния препарата на репродуктивную функцию пушныхзверей проводили на племенных самках красной лисицы, вуалевого исеребристого песца, стандартной темно-коричневой норки. Из племенныхсамок пушных зверей красной лисицы и вуалевого песца по принципу группаналогов сформировали 3 группы: контрольная и две опытных. Животныеконтрольной группы препарат не получали. Звери 1-й опытной группыполучали дополнительно к рациону янтарную кислоту из расчета 10 мг/кгмассы тела в течение месяца перед спариванием, за исключением выходныхдней (всего 20 раз); животные 2-й опытной группы – получали препарат втечение месяца перед спариванием и во вторую половину беременности, заисключением выходных дней (всего 40 раз).
Кроме того, на самках песцапровели дополнительный опыт, для которого сформировали опытную иконтрольную группы. Звери контрольной группы препарат не получали.Животные опытной группы получали янтарную кислоту в дозах 5 и 10 мг/кгмассы тела во вторую половину беременности за исключением выходныхдней (всего 20 раз).Из племенных самок стандартной темно-коричневой норки попринципу групп-аналогов сформировали 4 группы: контрольная и триопытных. Самки контрольной группы препарат не получали.
Норкам 1-ойопытной группы включали в рацион янтарную кислоту в дозе 5 мг/кг массытела ежедневно в течение месяца перед спариванием, 2-й опытной группы – втечение месяца перед щенением, 3-й опытной группы – в течение месяцаперед спариванием и щенением. У самок оценивали общее физиологическоесостояние и показатели репродуктивной функции. Щенков регистрировали в2-месячном возрасте во время отсадки от матерей.56Экономическую эффективность применения янтарной кислоты врационах молодняка и племенного поголовья пушных зверей определяли всоответствии с методическими рекомендациями (2007).Изучениебиохимическихпоказателейкровипослевведениябактериальных и вирусных агентов в организм пушных зверей проводили последующей схеме.
В качестве антигенов использовали: у норок - вирусалеутской болезни, у лисиц - вакцину против сальмонеллеза, у песцов вакцину против чумы плотоядных.Динамику биохимических показателей крови при заражении вирусомалеутской болезни изучали на молодняке норки. Для этого из молодняканорки стандартного темно-коричневого окраса в возрасте 7 месяцев попринципу групп-аналогов сформировали 3 группы: контрольная и двеопытных.
Звери контрольной группы были здоровыми – их не заражаливирусом и им не вводили янтарную кислоту. Животным 1-й и 2-й опытныхгрупп вводили внутрибрюшинно в дозе 2 см3 12-недельный культуральныйизолят «Сапфир» вируса алеутской болезни норок, полученный из ВГНКИ. Смомента заражения норкам 2-й группы дополнительно ежедневно вводилиper os (с питьевой водой) янтарную кислоту в дозе 5 мг/кг массы тела.
Втечение месяца после заражения еженедельно от 5 зверей из каждой группыбрали кровь для исследования. Заболевание норок алеутской болезньюподтверждали исследованием крови в реакции иммуноэлектроосмофореза РИЭОФ (Слугин В.С., 2004).Состояние организма лисицы и песца в поствакцинальный периодизучалиследующимобразом.Впредварительныхисследованияхиспользовали племенных самок красной лисицы, из которых за месяц до гона(декабрь)поконтрольнуюпринципуиинактивированнойгрупп-аналоговсформировалиопытную.Лисицобеихгруппвакцинойпротивсальмонеллеза,2группы:иммунизировалипастереллезаистрептококкоза внутримышечно в дозе 2,0 мл, однократно в соответствии синструкцией по применению. Вакцина содержала микробную взвесь57Salmonellatyhimurium,Salmonellacholeraesuis,Pasteurellamultocidaсероваров А, В, Д, Streptococcus серогрупп C, R (изготовлена ФГУП«Армавирскаябиофабрика»06.2007года,серия14,контроль14),Дополнительно лисицам опытной группы за 4 дня до и 4 дня послеиммунизации вводили в рацион янтарную кислоту из расчета 10 мг/кг живоймассы.Из молодняка красной лисицы 2-месячного возраста по принципугрупп-аналогов сформировали 3 группы: контрольная и две опытных.
Всехлисиц иммунизировали инактивированной вакциной против сальмонеллеза,содержащуюмикробнуювзвесьSalmonellatyhimuriumиSalmonellacholeraesuis (изготовлена ФГУП «Армавирская биофабрика» 08.2007 года,серия 9, контроль 9) внутримышечно в дозе 1,0 мл двукратно с интервалом10 дней в соответствии с инструкцией по применению. Животнымконтрольной группы, кроме вакцины, ничего дополнительно не вводили. Врацион зверей 1-й опытной группы добавляли янтарную кислоту в дозе 5мг/кг живой массы в течение 5 дней до иммунизации, 2-й опытной группы - втечение 5 дней до и 3 дней после вакцинации.Из молодняка песца 2-месячного возраста по принципу групп-аналоговсформировали три группы: контрольная и две опытных.
Всех зверейиммунизировали вакциной против чумы плотоядных Бионор-Д(ООО«Биоцентр» 06.2009 г., серия 36, контроль 55) внутримышечно в дозе 1,0 млоднократно в соответствии с инструкцией по применению. Песцамконтрольной группы, кроме вакцины, ничего дополнительно не вводили. Врацион 1-й группы добавляли янтарную кислоту в дозе 5 мг/кг массы тела втечение 5 дней до иммунизации, 2-й группы – 5 дней до и 3 дней послевакцинации.
Для изучения формирования иммунитета в поствакцинальныйпериод брали кровь из плантарной вены у 5 лисиц и 5 песцов из каждойгруппы один раз неделю в течение месяца.Для оценки влияния янтарной кислоты на организм пушных зверейпрепарат скармливали зверям в одно и то же время утром per os вместе с58кормом. Для этого навеску препарата растворяли в воде, подогретой до 50 оС,до 1% концентрации.
Полученный раствор вводили в корм и тщательноперемешивали.У зверей каждого возрастного периода утром натощак брали кровь излатеральной подкожной вены голени (лисица и песец) или хвостовой вены(норка) для исследований на биохимические показатели, в том числе макро-имикроэлементы. Пробы крови отбирали у 5 самцов и 5 самок из каждойгруппы, животных определяли методом случайной выборки.В сыворотке крови определяли следующие показатели: общий белок,глюкозу,активностьаланинаминотрансферазы(AЛT),аспартатаминотрансферазы (AСT), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), щелочнойфосфатазы (ЩФ) определяли на полуавтоматическом биохимическоманализаторе «Biochеm SA» (США)с использованием наборов реактивовфирмы «High Technology» (США).
Белковые фракции сыворотки кровиопределяли нефелометрическим методом (Берестов В.А., 2005), общиеиммуноглобулины - методом высаливания сульфатом натрия (Keckwick R.A.,1940),бактериальнуюактивностьсывороткикрови(БАСК)-пообщепринятой методике (Кузьмина Т.А., Смирнова О.В., 1966), лизоцимнуюактивность сыворотки крови (ЛАСК) – по методу В.Г.
Дорофейчука (1968),опсоно-фагоцитраную реакцию – по А.С. Лабинской (1978), лейкограмму –по И.П. Кондрахину (2004), церулоплазмин – по В.Б. Гаврилову и др. (1987),SH-группы белков – по методу В.Ф. Фоломеева (1981), малоновыйдиальдегид (МДА) – в соответствие с рекомендациями В.С. Камышникова(2000),титрантителксальмонеллезнымантигенам–вреакцииагглютинации (Лабинская А.С., 1978), титр антител к вирусу чумыплотоядных – иммуноферментным анализом (Равилов Р.Х., 2011).Одновременно со взятием проб крови у зверей брали пробы кормов(n=5 в каждый срок исследования), а также пробы волоса путемвыщипывания их с кончика хвоста (n=5 у каждого вида зверей в каждый срокисследования).59В рационах, в цельной крови и волосяном покрове определялисодержание макроэлементов (P, Ca, K, Na, Mg), жизненно (Fe; Co; Mn, Cu,Cr, Zn Se, I) и условно необходимых элементов (В, Si, Ni, V, Li), токсичныхэлементов (Sn, Sr, Al, Pb, Cd, Hg, As) с помощью атомной эмиссионной имасс-спектрометрии на приборах Optima-2000 DM и ELAN-9000 (PerkinElmer, USA).После убоя животных для гистологических исследований были взятыкусочки печени и почек от 20 лисиц (по 5 зверей из каждой группы), которыефиксировали в 5% нейтральном формалине.
Парафиновые срезы почкиокрашивали гематоксилином Майера и эозином (Меркулов Г.А., 1969).Микроскопиюгистологическихпрепаратовпроводилиспомощью«Цифровой моторизованной системы анализа, подготовки отчетов иорганизации виртуальных препаратов в микроскопии VISION Bio AnalyzePro» (США).Цифровые данные, полученные в исследованиях, статистическиобрабатывали с вычислением общепринятых констант при помощи программ«Microsoft Exell», «Clarity Chrom 305».603. Результаты собственных исследований3.1.
Физиолого-биохимический статус разных половозрастных групппушных зверейУ пушных зверей разных видов на разных этапах постнатальногоразвитияисследовалифизиолого-биохимическийстатусорганизма,изменения в котором приводят к изменению продуктивных качеств упушных зверей. Физиолого-биохимический статус оценивали по изменениямбиохимических показателей крови и волосяного покрова в процессепостнатального онтогенеза и при введении в организм зверей бактериальныхи вирусных агентов, по динамике роста молодняка пушных зверей, попоказателям продуктивности – размеру шкурки и качеству волосяногопокрова, воспроизводительной способности пушных зверей.3.1.1.
Половозрастные изменения биохимического профиля кровипушных зверей разных видовЛисица. В крови молодняка лисицы 7-месячного возраста в сравнениис2-месячнымвосновномзафиксированы(Приложения, табл. 1, 2). У самцов с возрастомследующиеизмененияпроизошло повышениеуровня общего белка в сыворотке крови на 37,3 % (P<0,001).
Произошлоуменьшение фракции альбуминов, α-глобулинов - на 10 %, β-глобулинов - на59,2 % (P<0,001). За счет уменьшения вышеназванных белковых фракцийпроизошло увеличение γ-глобулинов - более чем в 2 раза (P<0,001). Обменбелков сопряжен с активностью трансфераз, катализирующих превращенияазотистых веществ в организме. В 7-месячном возрасте в сравнении с 2месячным происходит повышение активности ферментов: АСТ – на 77 %(P<0,01), АЛТ – на 19 %. С окончанием периода интенсивного роста самцов в7-месячном возрасте по сравнению с 2-месячным связано значительноеснижение уровня ЩФ на 57,5 % (P<0,001). С возрастом наблюдается61повышение содержания глюкозы в крови на 21 % (P<0,05).
С возрастнымповышениемуровняγ-глобулиновкоррелировалоувеличение общихиммуноглобулинов на 53% (P<0,05). Также произошел рост БАСК на 48,4 %.Повышение уровня одних факторов неспецифической резистентности(глобулинов и БАСК) сопровождалось уменьшением других, в частности,уровень ЛАСК снизился на 24,9 % (P<0,01).У молодняка самок лисицы в 7-месячном возрасте в сравнении с 2месячным возрастом увеличилось количество общего белка на 32,5 %(P<0,001). Уровень альбуминов снизился на 10,3 % (P<0,001), как иколичество β-глобулинов - на 53,7 % (P<0,001), а содержание α-глобулинов иγ-глобулинов увеличилось на 15,6 % (P<0,05) и на 99,5%(P<0,001),соответственно.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
