Диссертация (1150109), страница 12
Текст из файла (страница 12)
Для этого 0,1 г смеси ЛРС схлоридом калия (1:10) помещали в картриджи с ПТФЭ фильтрами (1, 2, 3)(Рисунок 40). Далее через краны-переключатели (5, 7) с помощью реверсивногонасоса (6) в картриджи (1, 2, 3) подавали по 2 мл соответствующего экстрагента (7,d) и проводили процесс извлечения антрахинонов в УЗ-ванне (4) при температуре75 оС. Время извлечения антрахинонов из ЛРС составляло 15 мин. После этогочерез краны-переключатели (5 и 7) с помощью реверсивного насоса (6) в РЕ (8)подавали 0,25 мл экстракта пробы (5, a) из первого картриджа (1), 0,75 млэкстрагента (7, d), 1 мл ацетатного буферного раствора (pH=4,5) (5, f) и потоквоздуха (5, d) в течение 10 с со скоростью 5 мл/мин, обеспечивающий интенсивноеперемешивание растворов в РЕ (8).
Раствор аналитической формы из РЕ (8) припереключении кранов-переключателей (5, 7) и реверса насоса (6) перекачивали вкювету спектрофотометрического детектора (9), измеряли оптическую плотностьраствора при оптимальной длине волны и раствор сбрасывали.В ходе экспериментов было установлено, что наиболее полное извлечениеантрахинонов наблюдается при использовании в качестве экстрагента раствораTriton X-100 с концентрацией выше ККМ (ККМTriton(Рисунок 33)..-4X-100=2,8 10М=0,03 %)81Рисунок 33. Спектры поглощения 2 мМ раствора ализарина в 2 % растворе TritonX-100; экстрактов, полученных при извлечении антрахинонов из ЛРС в различныеэкстрагенты (объем экстрагента – 2,0 мл, время извлечения – 15 мин, масса пробы– 0,1 г, температура – 75 оС).Два различных способа извлечения антрахинонов из ЛРС были изучены вдиапазоне температур от 25 °C до 75 °C (Рисунок 34): извлечение без и своздействием УЗ (130 Вт, 35 кГц).
Время извлечения было зафиксировано – 15мин. В ходе экспериментов было установлено, что в обоих случаях максимуманалитического сигнала наблюдается при температуре выше 65 °C, при этомпроцесс извлечения аналитов в УЗ-поле является более эффективным.Рисунок 34. Влияние температуры наРисунок 35. Влияние времени УЗ-эффективность извлечения антрахиноноввоздействияиз–извлечения антрахинонов из ЛРСперемешивание воздухом (масса коры(масса корней и корневищ мареныкрушины – 0,1 г, время извлечения – 15– 0,1 г, объем экстрагента – 2,0 мл,мин, объем экстрагента – 2,0 мл).температура – 75 оС).ЛРС:А–вУЗ-поле;Бнаэффективность82Для определения оптимального времени извлечения антрахинонов из ЛРСпроводилась серия экспериментов при варьировании времени перемешиванияпробы в УЗ-ванне при 75 оС в пределах от 3 до 20 мин.
На основании полученныхданных (Рисунок 35), оптимальным временем извлечения является 15 мин.Концентрация и объем раствора Triton X–100 в диапазоне от 0,01 до 4 % (Рисунок36) и от 0,5 до 2,5 мл (Рисунок 37) соответственно были исследованы, и значенияравные 2 % и 1,5 мл были выбраны в качестве оптимальных.РисунокTriton36.ВлияниеконцентрацииX-100наэффективностьРисунок37.экстрагентаВлияниенаобъемаэффективностьизвлечения антрахинонов из ЛРС (массаизвлечения антрахинонов из ЛРСкорней и корневищ марены – 0,1 г, время(масса корней и корневищ мареныизвлечения – 15 мин, объем экстрагента –– 0,1 г, время извлечения – 15 мин,2,0 мл, температура – 75 оС).температура – 75 оС).При изучении влияния массы навески был зафиксирован объем экстрагента –2 мл и время извлечения в УЗ-ванне (130 Вт, 35 кГц) – 15 мин при температуре 75оС.
На основании полученных результатов (Рисунок 38), масса всех исследованныхпроб равная 0,1 г была выбрана для дальнейших экспериментов.83Рисунок 38. Влияние массы пробы на эффективность извлечения антрахинонов изЛРС: А – кора крушины, Б – корни и корневища марены (объем экстрагента – 2 мл,время извлечения – 15 мин, температура – 75 оС).Найденные условия извлечения антрахинонов из корней и кореневищ маренытакже являются оптимальными для коры крушины и для таблеток «Мареныкрасильной экстракт». Этот факт был доказан экспериментально.Зависимость величины аналитического сигнала от рН раствора была изученана модельных 2 мМ растворах ализарина в 2 % растворе Triton X-100 всоответствии с методикой, описанной в пункте 6.2. На основании приведенной нарисунке 39 зависимости, оптимальным значением является рН=4,5.Рисунок 39.
Зависимость оптической плотности раствора ализарина от рН(С(ализарин) – 2 мМ, С(Triton X-100) – 2 %, скорость потока воздуха – 5 мл/мин).846.2. Методика ЦИ-определения общего содержания антрахинонов в ЛРСНа основаниипроведенныхэкспериментов, описанныхвыше, быларазработана методика циклического инжекционного спектрофотометрическогоопределения антрахинонов в ЛРС.Рисунок 40. Схема ЦИА для определения общего содержания антрахинонов вЛРС: 1,2,3 – картриджи с ПТФЭ фильтрами; 4 – УЗ-ванна; 5, 7 – многоходовыекраны-переключатели; 6 – перистальтический реверcивный насос; 8 –реакционная емкость; 9 – проточная кювета, подключенная с помощьюоптоволоконных кабелей к источнику света и спектрометру.В окончательном варианте разработанной методики 0,1 г смеси ЛРС схлоридом калия (1:10) помещали в картриджи с ПТФЭ фильтрами (1, 2, 3)(Рисунок 40). Далее через краны-переключатели (5, 7) с помощью реверсивногонасоса (6) в картриджи (1, 2, 3) подавали по 1,5 мл 2 % раствора Triton X-100 (7, d).Проводили процесс извлечения антрахинонов в УЗ-ванне (4) при температуре 75оС.
Время извлечения антрахинонов из ЛРС составляло 15 мин. После этого черезкраны-переключатели (5 и 7) с помощью реверсивного насоса (6) в РЕ (8) подавали0,25 мл экстракта пробы (5, a) из первого картриджа (1), 0,75 мл 2 % раствораTriton X-100 (7, d), 1 мл ацетатного буферного раствора (pH = 4,5) (5, f) и потоквоздуха (5, d) в течение 10 с со скоростью 5 мл/мин, обеспечивающий интенсивноеперемешивание растворов в РЕ (8).85На следующем этапе раствор аналитической формы из РЕ (8) припереключении кранов-переключателей (5, 7) и реверса насоса (6) перекачивали вкювету спектрофотометрического детектора (9), измеряли оптическую плотностьраствора (λ = 435 нм) (Аn) и раствор сбрасывали.Затем коммуникации системы промывали 2 % раствором Triton X-100 (7, d) ипроводили аналогичные действия с извлечениями, полученными во втором итретьем картриджах (2, 3).На заключительном этапе измеряли фоновый сигнал (А0) при заполнениикюветы детектора (9) 1 мл 2 % раствора Triton X-100 (7, d), 1 мл ацетатногобуферногораствора(pH=4,5)(5,f).Значениеаналитическогосигналасоответствовало разнице между значениями Аn и А0.Для задания порядка необходимых операций и количества реагентовсоставлен алгорим операций, представленный в Приложении 3, позволяющийустанавливать состояния управляемых элементов прибора в каждый моментвремени.
Аналитические характеристики разработанной методики представлены втаблице 12. Разработанная методика в отличие от ранее предложенных проточныханалогов обеспечила полную автоматизацию анализа, включая стадию извлеченияантрахинонов из ЛРС и ЛП в раствор. Предложенная ЦИ-методика определенияобщегосодержанияиспользованияантрахиноноворганическихпозволяетрастворителейустранитьдляизвлечениянеобходимостьаналитовиминимизировать расход реагентов.Методика позволяет проводить определение антрахинонов в ЛРС спроизводительностью 9 проб в час.Таблица12.Аналитическиехарактеристикициклическойинжекционнойспектрофотометрической методики определения антрахинонов в ЛРС и ЛП.ПараметрОптимальноезначениеКонцентрация Triton X-100 (%)2pH (ацетатный буферный раствор)4,5Температура извлечения (оC)65 – 7586Объем экстрагента (мл)1,5Масса пробы (г)0,1Время извлечения (мин)15Диапазон определяемых концентраций0,65 – 23(%)Предел обнаружения (%)0,2Коэффициент корреляции0,999Sr, % (n = 5)5Производительность (проб/час)96.3.
Мешающее влияние примесных компонентовПри оценке мешающего влияния на результаты определения общегосодержания антрахинонов на модельных растворах изучались соединения,потенциально присутствующие в ЛРС. Растворы, содержащие 2 мМ растворализарина в 2 % растворе Triton X-100 и различные количества примесныхкомпонентов,подвергалисьавтоматизированнойанализувсоответствиисразработаннойметодикой. Допустимое значение было принято приотклонении аналитического сигнала не более чем на ± 5 %. По отношению ккаждому примесному компоненту рассчитывали фактор селективности поуравнению F=Ci/CА, где Ci – концентрация примесного компонента; CА−концентрация аналита.
Полученные результаты приведены в таблице 13. Не былонайдено мешающего влияния в присутствии избытка мальтозы, винной, янтарной,фталевой, малоновой, аскорбиновой и щавелевой кислот, сахарозы и глицина.Найденные соотношения [мешающее соединение]/[антрахиноны] в реальныхпробах гораздо меньше [132], таким образом можно утверждать, что разработаннаяметодика применима для определения общего содержания антрахинонов в ЛРС.87Таблица 13.
Факторы селективности для различных примесных компонентов приопределении антрахинонов.Примесный компонентФактор селективностиМальтоза20Фталевая кислота150Аскорбиновая кислота150Сахароза1000Глицин1000Малоновая кислота1000Винная кислота2000Янтарная кислота2000Щавелевая кислота20006.4. Испытание методики на реальных объектах анализаРазработанная методика была использована для определения антрахинонов вразличном ЛРС.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
