Диссертация (1150109), страница 13
Текст из файла (страница 13)
Расчет содержания антрахинонов в анализируемом растительномсырье осуществляли в пересчете на ализарин. Для проверки правильностиметодики проводили их параллельное определение методом SIA (Рисунок 41), атакже спектрофотометрическим методом в соответствии с фармакопейной статьей[133, 134].88Рисунок 41. Схема SIA для определения общего содержания антрахинонов в ЛРС.Для достижения эффективного извлечения антрахинонов из ЛРС в условияхSIA были также оптимизированы такие параметры, как состав экстрагента и егообъем, время и температура извлечения.
Оптимальными условиями являютсяизвлечение аналитов из проб ЛРС в течение 10 мин при температуре 75 оС в УЗполе. Концентрация и объем раствора Triton X–100 в диапазоне от 0,5 до 3 % и от 1до 3 мл, соответственно, были исследованы, и значенияравные 1 % и 2 млэкспериментально были выбраны в качестве оптимальных.В ходе работы использовали смесь ЛРС с хлоридом калия для повышенияпрецизионности навески. Для исследования возможного влияния хлорида калия наопределение антахинонов была проведена серия экспериментов с растираниемрастительного материала с солью и без с дальнейшим автоматизированнымопределением. На основании полученных данных (Рисунок 42) было установлено,что растирание пробы с хлоридом калия обеспечивает большую прецизионность иснижает величину СКО до 2,9 %.89Рисунок 42.
Аналитические сигналы при SI-определении антрахинонов в корекрушины (n=8).В соответствии с SIA методикой на первом этапе в каждую экстракционнуюемкость (ЭЕ) (5 – 9), содержащую 0,01 г смеси ЛРС с хлоридом калия (1:10)последовательно подавали по 2 мл 1% раствора Triton X-100 из резервуара спомощью шприцевого насоса (Рисунок 41). Затем в каждой ЭЕ происходилоинтенсивное извлечение аналитов в мицеллярную фазу при УЗ воздействии (325Вт, 35 к Гц) при температуре 75 оС в течение 10 мин.
После этого последовательнов каждую ЭЕ направляли по 0,1 мл ацетатного буферного раствора (pH=4,5) (5) спомощьюшприцевогонасоса исегмент воздуха(2) дляинтенсивногоперемешивания извлечений. Затем экстракты подвергались дополнительному УЗвоздействию в течение 1 мин для дегазации. После этого полученные экстрактыподавались последовательно в удерживающую спираль и направлялись в Zобразную проточную кювету для спектрофотометрического детектирования (10)при длине волны 435 нм. На заключительном этапе измеряли фоновый сигнал призаполнении проточной кюветы детектора (10) 1 % раствором Triton X-100,содержащим ацетатный буферный раствор (pH=4,5).
На Рисунке 43 изображеныконцентрационные пики, полученные в схеме SIA и градуировочная зависимостьаналитического сигнала от концентрации ализарина с уравнением A = 15,83 × C +0,019, где А – оптическая плотность, С – концентрация ализарина, выраженная вг/л.90Рисунок 43. Концентрационные пики SIA и градуировочная зависимость.Результаты, полученные методами ЦИА, SIA и референтным фармакопейнымметодом, были сравнены с помощью F- и t-тестов и представлены в таблице 14.Полученные F-значения ≤ 6,39 указывают на незначительное различие ввеличинах стандартных отклонений, а полученные t-значения ≤ 2,31 указывают нато, что нет статистически значимого различия между результатами, полученнымипри помощи данных методик.Таблица 14.
Результаты определения общего содержания антрахинонов в ЛРС(n=5, P=0,95).Общее содержание антрахинонов*, %ПробаЦИАSIAФармакопейнаястатья5,5 ± 0,15,5 ± 0,28,3 ± 0,12,8 ± 0,1ЦИА – SIAЦИА − Фарм.СтатьяFtзначе значениениеFзначениеtзначение5,5 ± 0,32,081,032,822,208,2 ± 0,18,3 ± 0,31,011,703,150,222,7 ± 0,12,8 ± 0,21,321,402,300,80Корни икорневищамареныКора крушиныТаблетки«Мареныкрасильнойэкстракт»*в пересчете на ализарин91Выводы1.Разработана общая аэрогидравлическая схема циклического инжекционногоанализа лекарственного растительного сырья с ультразвуковым вскрытием проб.2.Показанавозможностьминимизациикинетическихограниченийприобразовании комплексов флавоноидов с ионами алюминия (III) в средахцетилпиридиния хлорида.3.Установлены условия извлечения флавоноидов, аскорбиновой кислоты иантрахинонов из лекарственного растительного сырья в раствор под действием УЗдля их экспрессного спектрофотометрического определения.4.Разработанаиинжекционногоаттестована(Приложениеспектрофотометрическоголекарственном растительномсырье4)методикаопределенияфлавоноидовизмерений(методикациклического№в01.06.155,свидетельство об аттестации № 01.5.03.178/01.00043/2014).
Предел обнаруженияфлавоноидов в пересчете на рутин составляет 0,1 %. Производительность анализа −8 проб/час.5.Разработанаметодикациклическогоинжекционногоспектрофотометрического определения аскорбиновой кислоты в лекарственномрастительном сырье и продуктах питания. Предел обнаружения аскорбиновойкислоты составляет 0,003 %. Производительность анализа − 17 проб/час.6.Разработанаинжекционногоиаттестована(Приложениеспектрофотометрического5)методикаопределенияобщегоциклическогосодержанияантрахинонов в лекарственном растительном сырье (методика измерений №01.06.152, свидетельство об аттестации № 01.5.03.177/01.00043/2014).
Пределобнаружения антрахинонов в пересчете на ализарин составляет 0,2 %.Производительность анализа − 9 проб/час.7.Разработанные методики ЦИА апробированы на реальных пробах (различномлекарственномрезультатоврастительномподтвержденасырьеиметодамикапиллярного электрофореза и SIA.продуктахпитания).циклическойПравильностьвольтамперометрии,92Принятые условные сокращения и обозначенияЛРС – лекарственное растительное сырьеЛП – лекарственный препаратБАВ – биологически активное веществоЦИА – циклический инжекционный анализУЗ – ультразвукАК – аскорбиновая кислотаПИА – проточно-инжекционный анализSIA – последовательный инжекционный анализCIA – перекрестный инжекционный анализFBА – проточно-порционный анализSIC – последовательная инжекционная хроматографияBIA – проточно-инжекционный анализ с возобновляемыми колонкамиРЕ – реакционная емкостьВЭЖХ – высокоэффективная жидкостная хроматографияГХ – газовая хроматографияКЭ – капиллярный электрофорезВУП – вспомогательное устройство пробоподготовкиПТФЭ – политетрафторэтиленВЧ – высокие частотыСВЧ – сверхвысокие частотыЦПХ – цетилпиридиния хлорид2,6-ДФИФ – 2,6-дихлорфенолиндофенолДАК – дегидроаскорбиновая кислотаККМ – критическая концентрация мицеллообразованияМОИ – мицеллярно-опосредованное извлечениеЭЕ – экстракционная емкость93Список литературы1.
Куркин, В.А. Место и роль современной фармакогнозии как науки и учебнойдисциплины в фармацевтическом образовании / В.А. Куркин // Фундаментальныеисследования. – 2013. – № 4. – C. 676–679.2. Melchert, W.R. Green chemistry and the evolution of flow analysis. A review / W.R.Melchert, B.F. Reis, F.R.P. Rocha // Analytica Chimica Acta. – 2012. – № 714. – P. 8–19.3. Galuszka, A. Analytical Eco-Scale for assessing the greenness of analytical procedures/ A. Galuszka, P. Konieczka, Z.M. Migaszewski, J. Namiesnik // Trends in AnalyticalChemistry. – 2012. – № 37. – P. 61–72.4. Galuszka, A.
The 12 principles of green analytical chemistry and the significancemnemonic of green analytical practices / A. Galuszka, Z. Migaszewski, J. Namiesnik //Trends in Analytical chemistry. – 2013. – № 50. – P. 78–84.5. Tiyapongpattana, W. Sequential extraction of phosphorus in soil and sediment using acontinuous-flow system / W. Tiyapongpattana, P. Pongsakul, J. Shiowatana, D.Nacapricha // Talanta. – 2004. – № 62.
– P.765–771.6. Legnerova, Z. Sensitive fluorimetric method based on sequential injection analysistechnique used for dissolution studies and quality control of prazosin hydrochloride intablets / Z. Legnerova, J. Huclova, R. Thun, P. Solich // Journal of Pharmaceutical andBiomedical Analysis. – 2004. – № 34. – P. 115–121.7. Falkova, M.T. Stepwise injection spectrophotometric determination of flavonoids inmedicinal plants / M.T. Falkova, M.O. Pushina, A.V.
Bulatov, G.M. Alekseeva, L.N.Moskvin // Analytical Letters. – 2014. – № 47. – P. 970–982.8. Bulatov, A.V. The stepwise injection analysis as a new opportunity for automation ofchemical analysis of liquid, gaseous and solid-phase samples / A.V. Bulatov, A.L.Moskvin, L.N. Moskvin, A.V. Mozhuhin // Journal of Flow Injection Analysis. – 2010. –№ 27. – P. 13–19.9. Bulatov, A.V. Stepwise injection spectrophotometric determination of cysteine inbiologically active supplements and fodders / A.V. Bulatov, A.V. Petrova, A.B.94Vishnikin, A.L. Moskvin, L.N. Moskvin // Microchemical Journal. – 2013. – № 110. – P.369–373.10.
Bulatov, A.V. Stepwise injection spectrophotometric determination of epinephrine /A.V. Bulatov, A.V. Petrova, A.B. Vishnikin, A.L. Moskvin, L.N. Moskvin // Talanta. –2012. – № 96. – P. 62–67.11. Ruzicka, J. Flow injection analysis / J. Ruzicka, E. H. Hansen // AnalyticalChemistry.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
