Диссертация (1144791), страница 15
Текст из файла (страница 15)
et al., 1996).Учитываявысокуюраспространенностьтромботическойитромбоэмболической этиологии ишемического инсульта, ряд экспериментальныхмоделей ишемии головного мозга предусматривает введение в артериальноерусло мозга заранее сформированных эмболов либо индукцию локальноготромбоза артерий мозга за счет внешнего воздействия.Модель эмболического инсульта была предложена M.
Kudo и соавт. (1982)и D. Kaneko и соавт. (1985). Для создания эмболических моделей ишемии мозга вразное время применялись сгустки ауто - или гетерологичной крови,полиэтиленовые микросферы с диаметром 50 мкм, поливинилсилоксан, вязкоесиликоновое масло, латексные микросферы и керамические макросферы, которыевводились в ОСА или в СМА. Отличительной особенностью эмболическихмоделей ишемии головного мозга является мультифокальность поражения. Так,микроскопические очаги повреждения мозга при введении тромбоэмболов в СМАнаблюдались, кроме бассейна СМА, в бассейне передней и задней мозговойартерии (25%) и даже в противоположном полушарии (8%) (Kudo M.
et al., 1982).Эти модели с известной долей приближения воспроизводят клиническиеситуации, возникающие при множественной эмболии артерий головного мозгамелкимитромбоэмболами,отрывающимисяотстворокмитральногоиаортального клапана, в особенности при инфекционном эндокардите, при сепсисеидиссеминированномвнутрисосудистомсвертываниикрови.Моделимножественной тромбоэмболии дают возможность изучить эффективностьантикоагулянтов и антитромбоцитарных препаратов при ишемическом инсульте.К недостатку данных моделей относится низкая воспроизводимость локализациии объема повреждения головного мозга.Еще одна методика создания фокальной ишемии головного мозга основанана принципе фотодинамического воздействия. При этом введенный в кровоток73фотосенсибилизатор при локальном воздействии света определенной длиныволны переходит из основного состояния в возбужденное, что сопровождаетсямассивным образованием синглетного кислорода и свободных радикалов,происходящимвследствиевзаимодействияактивированногофотосенсибилизатора с кислородом.
Локальное повышение концентрациисвободных радикалов приводит к повреждению эндотелия и формированиютромба. Модель фототромбоза была впервые предложена Watson B. D. с соавт. в1985 г. (Watson B.D. et al., 1985). Большой интерес представляет модификацияметодики фототромбоза, которая позволяет создавать инфаркт головного мозга сизвестнымобъемомзоныпенумбры.Дляэтогопослевведенияфотосенсибилизатора осуществляется воздействие на череп крысы пучком лазера,имеющим форму кольца с внутренним диаметром 5 мм и шириной ободка 0,5 мм(Wester P. et al., 1995).
При этом в состоянии ишемии фактически оказываетсяобъем ткани, находящийся внутри кольца. Несомненное преимущество данногоподхода состоит в фиксированном объеме зоны ишемии, тогда как все прочиемодели фокальной ишемии не позволяют столь точно стандартизировать размерзоны риска, что связано с индивидуальными особенностями кровоснабженияголовного мозга.ШирокоиспользуемыйметодпроксимальнойокклюзииСМА,позволяющий моделировать обратимое ишемическое повреждение, заключаетсяво введении монофиламентного волокна во внутреннюю сонную артерию (ВСА)с последующим продвижением по места отхождения СМА (Koizumi J.
et al.,1986). Позднее методика была усовершенствована (Longa E.Z. et al., 1989; BelayevV.L. et al., 1997). При таком варианте окклюзии коэффициент вариации размеровпораженного участка головного мозга составляет примерно 8% (Belayev V.L. etal., 1997). Главное преимущество этой модели заключается в том, что естьвозможность проводить обратимую ишемию, т.е. изучать ишемическое иреперфузионное повреждение головного мозга. Недостатком этой моделиявляется то, что реперфузия мозга не является полноценной, т. к. в просвете ВСАнаходится монофиламентная нить и она частично окклюзирует просвет сосуда74(Belayev V.L.
et al., 1997). Кроме того, повторные движения волокна в просветеартерии могут приводить к повреждению эндотелия и повышенному рискутромбообразования (Nishigaya K. et al., 1991).Таким образом, основные модели фокальной ишемии головного мозгавключают транскраниальную окклюзию СМА, эмболию артериального руслаголовного мозга, фототромбоз СМА или ОСА и эндоваскулярную окклюзиюСМА с помощью монофиламентной нити.1.7.2 Модели глобальной ишемии головного мозгаМоделиглобальнойишемииголовногомозгаугрызуновмогутвоспроизводить полную и неполную глобальную ишемию. В первом случаепроисходит абсолютное прекращение поступления крови ко всем отделам мозга.Полная глобальная ишемия головного мозга возникает при декапитации,наложении турникета на шею животного, а также при моделировании остановкисердца или клинической смерти с последующей реанимацией.
Особойразновидностью полной глобальной ишемии является билатеральная окклюзияОСА у монгольских песчанок. При неполной глобальной ишемии возможносохранение определенного уровня мозгового кровотока за счет естественныхколлатералей. Кроме того, неполная глобальная ишемия может сопровождатьсянеравномерным снижением кровотока в различных анатомических отделахголовного мозга. Модели неполной глобальной ишемии включают 2-сосудистуюишемию (билатеральная окклюзия ОСА) с гипотонией, 3-сосудистую ишемию(билатеральная окклюзия ОСА и окклюзия базилярной артерии), 4-сосудистуюишемию (билатеральная окклюзия ОСА и позвоночных артерий), также модельинтракраниальной гипертензии с односторонней окклюзией ОСА.Общей особенностью всех моделей глобальной ишемии головного мозгаявляется диффузный характер повреждения с преимущественной гибельюнейронов в высокочувствительных к ишемии отделах мозга, а именно:75пирамидных нейронов полей CA1 и СА3 гиппокампа, мелких нейронов стриатумаи базальных ганглиев, а также нейронов слоев II, III и V неокортекса.Сегодня наиболее широко используются две модели неполной глобальнойишемии головного мозга у крыс – это 2-сосудистая модель с гипотонией и 4сосудистая модель.
При выполнении 2-сосудистой модели осуществляютбилатеральную обратимую окклюзию ОСА с одновременным уменьшениемартериального давления (АД) до 50 мм рт. ст. путем управляемого кровопусканияили введения гипотензивных препаратов (Smith M.L. et al., 1984). Получениевоспроизводимых результатов с использованием данной модели во многомзависит от точности, с которой осуществляется поддержание артериальнойгипотонии на заданном уровне, поскольку даже небольшие отклонения этогопараметра могут существенно повлиять на исход эксперимента (Ginsberg M.D.,Busto R., 1989). Данная модель имеет существенный недостаток – системнаягипотензия приводит к генерализованным метаболическим нарушениям вжизненно важных органах (Hata R.
et al., 1994). Следует отметить, чтобилатеральная перманентная окклюзия ОСА также может использоваться длямоделирования хронической гипоперфузии головного мозга (Farkas E. et al.,2007). Последовательность фаз хронической церебральной гипоперфузии,индуцированной постоянной окклюзией ОСА, представлена на рисунке 1.5. Фазыопределяются теоретически от степени мозговой перфузии, метаболическогостатусаиотэлектрофизиологичекихизменениймозга.Существеннымнедостатком модели является высокая смертность животных в острую фазуишемии (Farkas E. et al., 2007).В 1979 г.
была предложена 4-сосудистая модель глобальной ишемииголовного мозга у крыс, формируемая за счет окклюзии обеих ОСА и обеихпозвоночных артерий (Pulsinelli W.A., Brierley J.B., 1979). Формированиеглобальной ишемии при 4-сосудистой модели проводилось в два этапа: в первыйдень проводилась постоянная окклюзия обеих вертебральных артерий путем ихэлектрокоагуляции через for. аlare первого шейного позвонка. На следующийдень или через день проводилась окклюзия двух ОСА. Критерием наличия76глобальной ишемии мозга служила потеря установочного рефлекса в течение 1530 секунд после окклюзии двух ОСА. При применении данной модели удавалосьполучить ишемическое повреждение в центральных районах мозга.
Наиболееуязвимыми к ишемическому повреждению при данной модели были поля СА1 иСА3, СА4, зубчатая извилина, парамедианные зоны гиппокампа, слои III, V и VIзаднего неокортекса и полосатое тело.↓ Постоянная билатеральная окклюзия ОСАМозговойкровоток →2-3 дняОстраяфаза:ишемия8 недель – 3 месяцаХроническая фаза:олигемияФазавосстановления:нормальныйкровотокРис. 1.5. Фазы хронической церебральной гипоперфузии, индуцированные постояннойбилатеральной окклюзией общих сонных артерий (ОСА) у крыс (Farkas E. et al., 2007).Экспериментальная 4-сосудистая модель ишемии головного мозга имеетряд существенных недостатков, а именно: 1) электрокоагуляция позвоночныхартерий через for. alare первого шейного позвонка требует выполнения глубокогои травматичного хирургического доступа, сопряженного со значительнымповреждением мышечной ткани; 2) при коагуляции позвоночных артерийвозможна их неполная окклюзия; 3) у большинства животных после коагуляциипозвоночных артерий наблюдается массивное кровотечение; 4) диаметр for.
alareпервого шейного позвонка имеет большую вариабельность и часто оказываетсяменее 1 мм, что не позволяет полноценно провести электрокоагуляцию; 5)моделирование ишемии проводится в течение двух дней (Furlow T.W., 1982;Kameyama K. et al., 1985; Todd N.V. et al., 1986). Кроме того, потеряустановочного рефлекса, являющаяся критерием наличия глобальной ишемиипри выполнении данной модели, была отмечена только у 77% животных. Этосвязано с большой вариабельностью коллатерального кровообращения головногомозга у крыс инбредных линий (Pulsinelli W.A., Buchan A.M., 1988). В 1988 годуK.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
