Диссертация (1141404), страница 33
Текст из файла (страница 33)
Растворительупаривают досуха на вакуумном ротационном испарителе при 60 °С, полученныйсухой остаток растворяют в 15 мл водного 5% раствора хлороводороднойкислоты. К полученному раствору добавляют 15 мл диэтилового эфира,встряхивают в течение 10 мин на лабораторном шейкере, верхний эфирный слойотбрасывают, экстракцию повторяют трижды. Водную фазу подщелачивают,223добавляя 10% раствора аммиака до рН 9, затем проводят трехкратную экстракциюпо 20 мл хлороформа. Хлороформные экстракты объединяют, добавляют 10 гбезводного сульфата натрия, перемешивают и фильтруют через складчатыйбумажныйфильтр.Органическийрастворительудаляютнавакуумномротационном испарителе при 60 °С.
Полученный экстракт растворяют в 10 млподвижной фазы (испытуемый раствор). 1 мл испытуемого раствора помещают ввиалы для хроматографирования.Условия хроматографированияКолонка- 150×4,6 мм, сорбент поверхностнопористый непривитый силикагель (С18), 2,7мкм (HILIC)Предколонка- 5×4,6 мм, сорбент поверхностнопористый непривитый силикагель (С18), 2,7мкм (HILIC)ПФСмесь ацетонитрила с ацетата аммонияраствором 20 Ммоль/л в воде (9:1)Способ элюирования- изократическийСкорость потока- 0,8 мл/минТемпература- 35± 2°СколонкиДетектор- спектрофотометрический или диоднаяматрицаДлина волны- 290 нмОбъем пробы- 20 мклВремя записи данных- 20 минХроматографируют калибровочный раствор СО галантамина и ликорина сконцентрацией 10 мкг/мл, получая не менее 3 хроматограмм.
Результатысчитаются достоверными, если выполняются требования теста «Проверкапригодности хроматографической системы».224Хроматографируют последовательно калибровочные растворы и строяткалибровочныйграфикзависимостиплощадиСОгалантаминаотегоконцентрации. Затем хроматографируют испытуемый раствор, получая не менее 3хроматограмм.Расчет содержания суммы амариллисовых алкалоидов проводят методомвнешнего стандарта. Обсчету подлежат пик галантамина, а также пики с УФспектрами, характерными для амариллисовых алкалоидов (максимумыпоглощения при 235 и 290 нм).Содержание суммы амариллисовых алкалоидов в пересчете на галантамин иабсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:·=·· 10· (100 −)где S − сумма площадей пиков галантамина и других амариллисовыхалкалоидов на хроматограмме испытуемого раствора;So − площадь пика на хроматограмме раствора СО галантамина;– концентрация стандартного раствора, мкг/млm – масса навески сырья, мкг;W – влажность сырья, %.Содержание суммы амариллисовых алкалоидов в пересчете на галантамин иабсолютно сухое сырье в процентах (X), используя калибровочный график,вычисляют по формуле:· 10=,· (100 − )где: С – содержание суммы амариллисовых алкалоидов в 1 мл испытуемогораствора, найденное по калибровочному графику, мкг;m – масса навески сырья, мкг;W – влажность сырья, %.Упаковка,маркировкаитранспортирование.Осуществляетсястребованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственногорастительного сырья».Упаковка.
В ящики с отверстиями в боковых стенках и крышках по 0,5 кгнетто.Транспортирование. Свежесобранное сырье следует отправлять дляпереработки немедленно после сбора любым видом транспорта.225Хранение. Хранение ЛРС осуществляется с требованиями ОФС «Хранениелекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».Сырье подлежит переработке в течение 24 часов с момента сбора.Сырье для получения настойки гомеопатической матричной.Зав. кафедры фармакогнозииИнститута фармации и трансляционной медициныФГБОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченовадокт.
фарм. наук, член-корр. РАНИ.А. Самылина«___» __________201__г.Аспиранткафедры фармакогнозииИнститута фармации и трансляционной медициныФГБОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. СеченоваД.О. Боков«___» __________201__г.226Приложение 4. Проект ФС «Galanthus woronowii, Galanthus - Настойкагомеопатическая матричная»МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ__________________________________________________________________Galanthus woronowii, GalanthusФС Настойка гомеопатическая матричнаяВводится впервые__________________________________________________________________Настоящая фармакопейная статья распространяется на Galanthus woronowii,Galanthus настойку гомеопатическую матричную, получаемую из свежих целыхрастений (planta tota), собранных ранней весной в период цветения подснежникаВороноваGalanthusworonowiiLosinsk.семействоамариллисовые–Amaryllidaceae, и применяемую для производства/изготовления гомеопатическихлекарственных препаратов.Для получения настойки необходимо:Подснежника Воронова целых растений свежих(при содержании влаги не менее 75 %)- 100 гСпирта этилового (этанола) 73 % (по массе) или80 % (по объему)- достаточное количестводля получения настойкиПримечаниеПолучение настойки гомеопатической матричной осуществляют по способу 3aОФС «Настойки гомеопатические матричные».227ОписаниеПрозрачнаяжидкостьтемногозеленовато-жёлтогоцветасрезкимнеприятным запахом.ПОДЛИННОСТЬОпределение основных групп биологически активных веществ1.
Тонкослойная хроматография (амариллисовые алкалоиды)Приготовление растворовПриготовление раствора СО галантамина. Около 10,0 мг (точная навеска)СО галантамина основания помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл ирастворяют в 8 мл 96 % спирта этилового при перемешивании. Доводят объёмраствора тем же спиртом до метки и перемешивают. Срок хранения раствора 1мес.Приготовление раствора СО ликорина. Около 10,0 мг (точная навеска) СОликорина основания помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл ирастворяют в 8 мл 96 % спирта этилового при перемешивании. Доводят объёмраствора тем же спиртом до метки и перемешивают. Срок хранения раствора 1мес.Приготовление модифицированного реактива Драгендорфа.
Раствор I. 0,85г висмута нитрата основного растворяют в 40 мл воды и 10 мл уксусной кислоты,взбалтывают в течение 15 мин. Раствор II. 8 г калия йодида растворяют в 20 млводы. Растворы I и II смешивают (основной раствор). Непосредственно передприменением 10 мл основного раствора смешивают с 10 мл 1 % водного растворааскорбиновой кислоты и 10 мл 95 % этанола.Приготовление уксусной кислоты 20 %. 20,4 г уксусной кислотыразбавляют водой до 100 мл.На стартовую линию аналитической хроматографической пластинки сослоем силикагеля на алюминиевой основе размером 10×15 см наносят раздельнополосами 50 мкл испытуемой настойки и 5 мкл СО галантамина и ликорина.Пластинкуснанесеннымипробамисушатнавоздухе,помещаютвхроматографическую камеру, предварительно насыщенную в течение 1 часасмесью: диэтиловый эфир – метанол – диэтиламин (90:5:5) и хроматографируютвосходящим способом в указанной системе растворителей.
Когда фронтрастворителей пройдет около 80 – 90 % длины пластинки от линии старта,пластинку вынимают, высушивают на воздухе до удаления следов растворителей.228Затем пластинку обрабатывают модифицированным реактивом Драгендорфа инагревают в сушильном шкафу при температуре 100-105 °С в течение 5 мин.На хроматограмме раствора СО ликорина должна обнаруживаться зонаадсорбции оранжевого цвета; на хроматограмме раствора СО галантамина – зонаадсорбции оранжевого цвета.Нахроматограммеиспытуемогорастворадолжныобнаруживатьсяследующие зоны: зона оранжевого цвета на уровне зоны СО ликорина; зонаоранжевого цвета на уровне зоны СО галантамина; допускается обнаружениедополнительных зон.2.
Тонкослойная хроматография (флавоноиды)Приготовление растворовРаствор стандартного образца (СО) кверцетина. Около 0,005 г СОкверцетина (кверцетина дигидрата) растворяют в 10 мл 96 % спирта этиловогопри перемешивании до полного растворения. Срок годности раствора не более 3мес при хранении в прохладном, защищенном от света месте.Раствор стандартного образца (СО) изорамнетина.
Около 0,005 г СОизорамнетина растворяют в 10 мл 96 % спирта этилового при перемешивании дополного растворения. Срок годности раствора не более 3 мес при хранении впрохладном, защищенном от света месте.Алюминия хлорида раствор 5 %. 5,0 г алюминия хлорида безводного или 9,0г алюминия хлорида 6-водного растворяют в 80 мл спирта этилового 70%,фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора темже спиртом до метки. Срок годности раствора 3 мес.5 мл настойки упаривают на водяной бане, остаток высушивают всушильном шкафу при 110 °С в течение 10 минут, затем добавляют 10 мл 15%серной кислоты, перемешивают до растворения осадка.
Полученный растворпомещают в коническую колбу, объемом 100 мл, присоединяют к обратномухолодильнику, нагревают на кипящей водяной бане в течение 2 часов. Послеохлаждения до комнатной температуры полученное извлечение фильтруют черезбумажный фильтр. Осадок, оставшийся на фильтре, промывают водойочищенной, высушивают в сушильном шкафу при 110 °С в течение 10 минут ирастворяют в 5 мл горячего 96% этанола (испытуемый раствор).229На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоемсиликагеля с флуоресцентным индикатором на алюминиевой подложке размером10 × 15 см наносят 20 мкл испытуемого раствора, рядом наносят 10 мкл растворастандартного образца СО кверцетина и СО изорамнетина. Пластинку снанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительнонасыщенную в течение 1 ч смесью растворителей н-бутанол – уксусная кислоталедяная – вода (4:1:2), и хроматографируют восходящим способом.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
