Диссертация (1141401), страница 23
Текст из файла (страница 23)
Анализируемый раствор готовили по методике, описанной вразделе 2.3.4. Определение размера липосом проводили на прибореSubmicron Particaele Sizer NICOMP-380. Размер везикул для наработанныхсерий ЛЛФ-лио борхлорина не превышал 200 нм.рН. Определение проводили потенциометрически согласно ГФ XIII Т.1 [28].Предварительно к содержимому флакона добавляли 10 мл воды дляинъекций и перемешивали в течение 10 мин до образования однороднойдисперсии. Для всех наработанных серий ЛЛФ-лио борхлорина значение рНнаходилось в диапазоне 5,8-7,2.Потеря в массе при высушивании.
Во всех исследованных образцах потеряв массе при высушивании не превышала значения 0,3%.Спецификация на «Борхлорин липосомальный, лиофилизат дляприготовления дисперсии для инъекций 1,0 мг» представлена в Приложении1.5.2. Изучение стабильности ЛЛФ-лио борхлорина при храненииИзнаработанныхтрисерииЛФ«Борхлоринлипосомальный,лиофилизат для приготовления дисперсии для инъекций 1,0 мг» (151012,200313, 240413) были заложены на хранение для установления срокагодности.
Препарат хранили в морозильной камере при температуре -18ºС,поскольку такая температура установлена для хранения липидов.Оценку качества препарата в первый год хранения проводили черезкаждые 3 месяца, на втором и третьем году хранения – через каждые 6месяцев.Результаты изучения стабильности ЛФ «Борхлорин липосомальный,лиофилизатдляприготовленияпредставлены в Таблице 29.дисперсиидляинъекций1,0мг»158Таблица 29Анализ ЛЛФ-лио борхлорина в процессе храненияПараметркачестваПределы попроекту НДОписаниеСухая пористаямасса зеленогоцветаРегидратируемостьПридобавлении ксодержимомуфлакона 3,7 млводыдляинъекцийиперемешивании в течение 10миндолжнаобразовыватьсядисперсиязеленого цвета.Содержаниеборхлорина вофлаконе, мг0,85-1,15Потеря в массепривысушивании,%Не более 3,0Среднийдиаметрвезикул, нмНе более 210Срокхранения,мес.0369121824303603691218243036036912182430360369121824303603691218243036Серия ЛЛФ-лио борхлорина151012Сухая пористаямасса зеленогоцветаПри добавлениик содержимомуфлакона 3,7 млводыдляинъекцийиперемешиваниив течение 10 минобразовываласьдисперсиязеленого цвета.1,041,051,011,021,041,031,031,091,02Практическиотсутствует187187168174174175176165170200313240413Сухая пористая масса зеленогоцвета--При добавлении к содержимомуфлакона 3,7 мл воды дляинъекций и перемешивании втечение 10 мин образовываласьдисперсия зеленого цвета.--1,021,021,021,001,001,001,041,00-1,041,071,051,021,061,061,041,02-Практически отсутствует172171177165170175159170-171191171175176170171170-159Продолжение таблицы 29ПараметркачестваСрокхранения,мес.03691218243036Пределы попроекту НДрН5,8-7,2Серия ЛЛФ-лио борхлорина1510122003132404137,16,46,66,76,76,56,76,86,46,26,65,96,06,06,46,86,4-6,36,76,76,36,46,76,56,5-Из таблицы 29 видно, что при анализе качества серий ЛЛФ-лиоборхлорина в процессе хранения не наблюдались значимые изменения впоказателях качества, заложенных в проекте НД.
На основании проведенныхисследованийустановленсрокгодности для препарата«Борхлоринлипосомальный, лиофилизат для приготовления дисперсии для инъекций 1,0мг» 2 года. Изучение стабильности и срока годности препарата серий 151012,200313, 240413 продолжаются.ЗАКЛЮЧЕНИЕДля стандартизации ЛЛФ-лио борхлорина выбраны показатели, покоторым следует контролировать качество препарата после получения и впроцессехранения.регидратируемость,Кданнымподлинность,показателямотносятся:количественноеописание,определение,однородность дозирования, средняя масса содержимого флакона, размервезикул, рН, потеря в массе при высушивании. Разработан проект НД на ЛФ«Борхлорин липосомальный, лиофилизат для приготовления дисперсии дляинъекций 1,0 мг».Изучение стабильности по выбранным параметрам качества трех серийЛЛФ-лио борхлорина при хранении позволило установить срок годностипрепарата не менее 2 лет.160ОБЩЕЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕПриоритетнойцельюстратегииразвитияфармацевтическойпромышленности на период до 2020 г.
является разработка и производствоинновационных лекарственных средств, создание максимально эффективныхлекарственных препаратов, обладающих минимумом побочных реакций.Одним из многообещающих направлений повышения эффективностилекарственной терапии является применение нанотехнологий, в частности –создание систем доставки на основе наноносителей.Напротяжениидвухпоследнихдесятилетийвмировойфармацевтической практике интенсивно разрабатываются и исследуютсяпрепараты на основе липосом. Липосомальные препараты обладают рядомнесомненных преимуществ – защищают здоровые клетки от токсическогодействиялекарственныхвеществ,способныпроявлятьнацеленнуюспецифичность за счет селективного проникновения из крови в ткани,защищаютлекарственныефармакокинетикувеществалекарственныхотдеградации;препаратов,изменяютповышаяихфармакологическую эффективность; позволяют создавать водорастворимыелекарственные формы для гидрофобных субстанций, увеличивая тем самымих биодоступность.Борхлоринявляетсяперспективнымотечественнымфотосенсибилизатором для ФДТ опухолей, однако его введение в организмзатруднено, в связи с наличием у него гидрофобных свойств.
Поэтому цельюпроведенногостерическиисследованиястабилизированнойявлялосьсозданиелипосомальнойлиофилизированнойлекарственнойформыборхлорина, позволяющей вводить препарат внутривенно.На первоначальном этапе работы разрабатывали состав и технологиюполученияЛЛФ-лиоборхлорина.Врезультатетехнологическихисследований из 19 наработанных моделей ЛЛФ выбран оптимальный состав161смолярнымисоотношениямикомпонентовборхлорин/ФХ1:200иФХ/холестерин/ПЭГ-ДГФА 1:0,33:0,004 (борхлорин/ФХ/холестерин/ПЭГДГФА=1,0:200,0:67,0:0,8). В качестве растворителя для регидратациилипидной пленки выбрана вода для инъекций, которая позволяет получитьЛЛФ борхлорина надлежащего качества. В результате сравнительногоанализа способов получения ОСЛ борхлорина установлено, что наиболееоптимальным методом является 5-кратная экструзия под давлением сиспользованием нейлонового фильтра с диаметром пор 0,22 мкм, котораяобеспечивает получение стабильной в процессе хранения липосомальнойдисперсии с приемлемым размером везикул и высоким уровнем включенияборхлорина в липосомы.
Для увеличения срока хранения предложенатехнология сублимационной сушки ЛЛФ борхлорина. Для лиофилизациилипосом с борхлорином выбран режим с быстрым снижением температурына стадии замораживания. С целью обеспечения сохранения качествалипосомальной дисперсии в процессе лиофилизации подобран эффективныйкриопротектор – сахароза в молярном соотношении ФХ/сахароза 1:5, котораяобеспечивает стабильность структуры липосом в процессе лиофилизации ссохранением размера везикул и уровня включения борхлорина.На следующем этапе исследования разрабатывали методики химикофармацевтического анализа для контроля качества ЛФ борхлорина. ДлякачественногопредложенаанализакомпонентовхроматографическаяЛЛФметодикаииЛЛФ-лиовыбраныборхлоринатрисистемырастворителей: бутанол/ледяная уксусная кислота/вода (6:3:2) – дляобнаруженияборхлорина(Rf=0,50)ихолестерина(Rf=0,67),хлороформ/этанол/ледяная уксусная кислота/ацетон/вода (6:2:2:1:1) – дляобнаружения ФХ (Rf=0,48) и ацетон/ледяная уксусная кислота/вода (15:3:2) –для идентификации сахарозы (Rf=0,55).Для количественного определения борхлорина в разработанной ЛФразработана и валидирована методика спектрофотометрического анализа.162При изучении абсорбционных характеристик борхлорина выявлено, чтоспектрпоглощениялипосомальногоборхлоринаидентиченспектрупоглощения субстанции борхлорина по положению максимумов и формекривой.
Установлено, что вспомогательные вещества, входящие в состав ЛФ,и спирт 95%, используемый в качестве раствора сравнения, практически непоглощают излучение в области максимумов поглощения борхлорина. Вкачестве рабочей длины волны для анализа борхлорина в ЛЛФ и ЛЛФ-лиовыбрана полоса поглощения средней интенсивности с максимумом 662 нм.Поглощение спиртового раствора борхлорина подчиняется закону БугераЛамберта-Бера: линейная зависимость значения оптической плотности отконцентрации борхлорина показана в интервале концентраций от 2 до 20мкг/мл. Относительная ошибка спектрофотометрического определенияконцентрации борхлорина в липосомальной дисперсии до и послелиофилизации составила менее 2%.
При помощи валидационной оценкиустановлено,чторазработаннаяметодикаколичественногоанализаборхлорина является специфичной, линейной, правильной, прецизионной иробастной.Для стандартизации разработанной ЛФ «Борхлорин липосомальный,лиофилизат для приготовления дисперсии для инъекций 1,0 мг» выбраныпоказатели, по которым следует контролировать качество препарата послеполучения и в процессе хранения. Изучение стабильности по выбраннымпараметрам качества экспериментальных серий ЛЛФ-лио борхлорина прихранении позволило установить срок годности препарата не менее 2 лет.163ОБЩИЕ ВЫВОДЫ1. По результатам исследований предложен оптимальный состав стерическистабилизированной липосомальной лекарственной формы борхлорина длявнутривенноговведениясборхлорин/ФХ1:200имолярнымисоотношениямикомпонентовФХ/холестерин/ПЭГ-ДГФА1:0,33:0,004(борхлорин/ФХ/холестерин/ПЭГ-ДГФА=1,0:200,0:67,0:0,8).2.
Разработанатехнологияполученияустойчивойприхранениилиофилизированной липосомальной лекарственной формы борхлорина длявнутривенного введения. Для достижения максимальной стабилизациилипосом с борхлорином в процессе лиофилизации подобран эффективныйкриопротектор – сахароза, вводимая в липосомальную дисперсию вмолярном соотношении ФХ/сахароза 1:5.3. РазработанаметодикакачественногоТСХ-анализакомпонентовлекарственной формы борхлорина с использованием хроматографическихпластинок «Sorbfil». Для идентификации борхлорина и холестеринапредложена система бутанол/ледяная уксусная кислота/вода (6:3:2), ФХ –система хлороформ/этанол/ледяная уксусная кислота/ацетон/вода (6:2:2:1:1),сахарозы – система ацетон/ледяная уксусная кислота/вода (15:3:2).4. Разработанаивалидированаметодикаколичественногоспектрофотометрического анализа борхлорина в составе лекарственнойформы при длине волны (662±2) нм с использованием стандартного образца.5.
Выбраны химико-фармацевтические показатели качества для стандартизациипрепарата «Борхлорин липосомальный, лиофилизат для приготовлениядисперсии для инъекций 1,0 мг». По результатам изучения стабильностилиофилизированной липосомальной лекарственной формы борхлоринаопределен срок хранения препарата – 2 года.6. Составлен проект НД на препарат «Борхлорин липосомальный, лиофилизатдля приготовления дисперсии для инъекций 1,0 мг».164СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫАлексеев Ю.В., Захаров С.Д., Иванов А.В.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
