Диссертация (1139934), страница 8
Текст из файла (страница 8)
Контроль за состоянием лабораторных крысосуществлялось ежедневно в течение всего срока пребывания их в виварии.Выведение животных из опыта осуществлялось под наркозом путемпомещения в замкнутое пространство и масочным способом наркоза растворомХлороформа, периодически приоткрывая крышку камеры для того, чтобы смерть42наступила не от удушья, а от наркотического воздействия препарата.
Через 5-10минут наступала остановка сердечных сокращений. Констатация смертиподтверждалась при наличии: прекращения сердцебиения и дыхания, отсутствиярефлексов; снижения температуры тела ниже 25 °С. Утилизация биологическогоматериала и трупов животных производилась в соответствии с установленнымиправилами в виварии Первого МГМУ им. И.М.
Сеченова (СеченовскийУниверситет).Первыйэтапмоделированиявосстановлениефасциальногодефектапроводилось на пяти лабораторных крысах Вистар весом 250-270 г.Из-заневозможности возникновения тазового пролапса у крыс в виду особенностейанатомии, необходимо было смоделировать фасциальный дефект и определитьсамое уязвимое место для образования пролапса с целью установки в дальнейшемв данную зону сетчатого имплантата.Вначале проводилась отработка техники оперативного вмешательства напяти крысах – ознакомление с анатомией лабораторного животного имоделирование искусственного пролапса грыжевого мешка.Операция состояла из следующих последовательных действий:Перед операцией животныхфиксировались в лежачемположениитекстильными лентами за лапы на специальных хирургических столах (рисунок7).Рисунок 7 - Крыса под анестезией зафиксирована на операционном столике.43В местах планируемых разрезов удаляли шерсть выщипыванием (при этомслегка натягивали кожу, не щипая ее) или сбривали при помощи клиппера.Удаленную шерсть тщательно собирали с животного и с рабочих поверхностей взакрывающуюся емкость для отходов.Производилась широкая обработка раствором Хлоргексидина биглюконата0.05% и спиртовым раствором 40% операционного поля (рисунок 8).Рисунок 8 - Подготовка операционного поля: освобождение участка кожи напередней брюшной стенке от шерсти, обработка раствором Хлоргексидинабиглюконата 0.05% и спиртовым раствором 40%.Операция состояла из следующих последовательных действий:Производилось рассечение кожи и подкожной клетчатки по средней линииживота на протяжении вдоль средней линии длиной 4-5см по средней линииживота, при этом отступя книзу от мечевидного отростка на 2 см (рисунки 9, 10).44Рисунок 9 - Рассечение кожи и подкожной жировой клетчатки в продольномнаправлении вдоль средней линии живота, отступя от мечевидного отростка на 2см на протяжении 4-5 см.Рисунок 10 - Внешний вид произведенного разреза на передней брюшной стенке.Производили выделение наружных листков влагалища прямой мышцы живота(рисунки 11, 12).Рисунки 11, 12 - Выделение наружных листков влагалища прямой мышцыживота.
На правом рисунке - освобождена прямая мышца живота от наружныхлистков влагалища.С обеих сторон от белой линии живота отсекались прямые мышцы животана протяжении 3 см и отделялся задний листок. Затем полностью удаляется белаялиния живота, частично резецируются медиальные края прямых мышц живота иформировался дефект размером 0,5 см в ширину и 2-2,5 см в длину (рисунок 13).45Рисунок 13 - Частично резецируемые медиальные края прямых мышц живота,сформированный дефект размером 0,5 см в ширину и 2-2,5 см в длину.На зону несостоятельности прямых мышц живота устанавливается сетчатыйимплантат (рисунок 14) с фиксацией в 6 местах узлами нитью Полисорб 2-0(рисунок 15).Рисунок 14 -Установка сетчатого имплантата на сформированный дефектпрямых мышц живота.46Рисунок 15 - Фиксация сетчатого имплантата в 6 местах узлами нитью Полисорб2-0.Далее производилось непрерывное ушивание апоневроза (рисунок 16) икожи нитью Полисорб 2-0 (рисунок 17).Рисунок 16 - Непрерывное ушивание апоневроза нитью Полисорб 2-0.47Рисунок 17 - Наложение шва на кожу (нить Полисорб 2-0).В ходе второго этапа работы после отработки моделирования фасциальногодефектанеобходимымполипропиленовыеподапоневратическиеусловиемсетки.былопроверкаХирургическиекарманы.Длятканевойсеткивхирургическогоиспользовались контрольные полипропиленовыереакциинасформированныевмешательствахирургические сетки итканеинженерные конструкции, полученные путем адгезии аутологичных МСККМ (в течение 3-х недель) на полипропиленовых сетках.Операция производилась на 12 лабораторных крысах следующим образом:1) Производили отсепарирование клетчатки от белой линии живота и переднейстенки влагалища (апоневроза) прямых мышц в обе стороны от срединногоразреза на протяжении 1,5-2 см (рисунки 18, 19).48Рисунок 18 - Освобождение белая линия живота и передняя стенка влагалища(апоневроза) прямых мышц от клетчатки путем ее отсепаровки в стороны отсрединного разреза на расстояние 1,5-2 см.Рисунок 19 - Сформированные «карманы» над белой линией живота.2) В созданное таким образом пространство помещается хирургическая сеткаразмерами 10×10 мм, которая фиксируется к апоневрозу прямых мышц припомощи отдельных узловых викриловых швов (рисунок 20).Рисунок 20 - Установка хирургической сетки размером 10х10 мм и фиксация уапоневрозу прямой мышцы викриловой нитью в сформированный «карман».Таким образом, в двух подапоневротических «карманах» помещались двахирургических эндопротеза на одинаковом расстоянии от белой линии живота:слева – хирургическая сетка без нанесения МСК КМ крысы, справа –хирургическая сетка с нанесенными МСК КМ крысы (рисунок 21).49Рисунок 21 - Установлены две хирургические сетки на равном расстоянии отбелой линии живота: слева – хирургическая сетка без нанесения МСК КМ крысы,справа – хирургическая сетка с нанесенными МСК КМ крысы.3) В ране производился полный гемостаз.
Листки апоневроза не сшивались,производилось только зашивание кожи викриловой нитью непрерывным швом.При этом, у двух подопытных лабораторных животных была произведенаимитация неправильной установки имплантата, с последующей экструзией сеткипутем помещения ее преимущественно в жировую клетчатку, ушивается кожа сподкожной клетчаткой.
Не проводилось дренирования раны, послеоперационныйшов на передней брюшной стенке обрабатывался спиртовым раствором Йодонада(рисунки 22, 23).Рисунок 22 - Листки апоневроза не сшивались, произведено ушивание коживикриловой нитью непрерывным швом.50Рисунок 23 - Обработка шва на коже раствором Йодоната.4) После операции крысы содержатся в условиях вивария в просторных клетках ссетчатым дном на стандартном пищевом режиме. Полная эпитализацияпослеоперационного шва происходила к 10-15 суткам. В послеоперационномпериоде необходимо проводить динамическое наблюдение за состояниемпослеоперационных ран. Выведение животных из эксперимента производилосьчерез 2 месяца (6 крыс) и 4,5 месяца (6 крыс), образцы сеток отправлялись нагистологическое исследование.В ходе проведения второго этапа исследования у некоторых крысприсутствовали попытки самоудаления сетчатых имплантатов с переднейбрюшной стенки. Исходя из этого факта, была предпринята попытка отработкидальнейшего эксперимента путем имплантации тканеинженерных конструкций вмежлопаточную область.1) Оперативноеприменениемвмешательство«Zoletil100»проводилосьврасчетеподдозыобщимнаркозом2-3мг/100г(скрысывнутримышечным введением) в асептических условиях, крысу фиксировализа лапки с помощью четырех держалок.512) Производилось освобождение участка от шерсти и обработка оперируемойповерхности раствором Хлоргексидина биглюконата 0.05% и спиртовымраствором 40% (рисунок 24).Рисунок 24.
Освобождение участка от шерсти и обработка оперируемойповерхности раствором Хлоргексидина биглюконата 0.05% и спиртовымраствором 40%.3) Хирургический разрез производился перпендикулярно линии, соединяющейуши, отступив на 1 см и вдоль до нижнего края лопаток.
Длина разреза 3 см(рисунок 25).52Рисунок 25 - Произведен разрез кожи и подкожной жировой клетчатки на 1 смотступив от линии, соединяющей уши и до нижнего края лопаток. Длинаразреза 3 см.4) Производилось аккуратное отсепарирование слоя кожи с подкожнойжировой клетчаткой от собственной фасции трапециевидной мышцы(рисунок 26).Рисунок 26 - Произведено отсепарирование слоя кожи с подкожнойжировой клетчаткой от собственной фасции трапециевидной мышцы.5) Собственнаяфасциятрапециевидноймышцынадсекаласьвдольпозвоночника и отсепарировалась фасция от трапециевидной мышцы,которая представлена тремя самостоятельными частями (ключичнотрапециевидная,акромио-трапециевиднаямышцы) (рисунок 27).иостисто-трапециевидная53Рисунок 27 - Рассечение собственной фасции трапециевидной мышцывдоль позвоночника и отсепарировалась фасция от трапециевидной мышцы.6. В дальнейшем в образованные «карманы» глубиной до 1-1,5 смимплантировались тканеинженерные конструкции (размером 10×10 мм) наобласть лопаток (рисунок 28).
В качестве матриксов использовалисьиспользовались бионедеградируемые (полипропиленовая и титановаясетки) и биодеградируемые (викриловая сетка и биологический имплантатиз свиного дермального коллагена) матриксы, и композиционная сетка(состоящая из полиглактиновых и полипропиленовых волокон) (рисунки 29,30). Фиксация проводилась нитью Полисорб 2-0 двумя узловыми швами.Рисунок 28 - Сформированные «карманы» в межлопаточной области глубиной 11.5 см для имплантации ТИК.Рисунок 29 - Синяя стрелка указывает на композитную сетку, желтая стрелка викриловая сетка: оранжевая стрелка – титановая сетка. Сетки фиксированынитью Полисорб 2-0 двумя узловыми швами.54Рисунок 30 - Красная стрелка указывает на биологический имплантат, зеленаястрелка – полипропиленовая сетка. Сетки фиксированы нитью Полисорб 2-0двумя узловыми швами.7.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
