Диссертация (1139676), страница 18
Текст из файла (страница 18)
В бульоне – равномерное помутнение. Условия культивирования:Растут на простых по составу питательных средах (МПА, МПБ) в течение 18-24часов.Оптимальнаятемпература культивированияот 35до37°С.Биохимические свойства: типичные.Enterococcus faecalis АТСС 19433 ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России.Условия культивирования: МПА с 0,2% глюкозы (рН 7,2-7,4), МПБ с 0,2%глюкозы (рН 7,2-7,4).длительностьтинкториальныеОптимальная температура культивирования 37 °С;инкубации18-24свойства:ч.Культурально-морфологическиеграмположительные,инеподвижные,неспорообразующие кокки; располагаются в виде диплококков, небольшимископлениями,одиночнымикоккамиикороткимицепочками.Прикультивировании на МПА с 0,2% глюкозы (рН 7,2-7,4) – колонии мелкие,круглые, выпуклые, с ровными краями; в МПБ с 0,2% глюкозы (рН 7,2-7,4) –растет равномерно, диффузное помутнение, осадка нет.
Биохимические свойства:типичные.Citrobacter freundii 101/57 ФГУН ГИСК им. Л. А. ТарасевичаМорфология клеток в мазках: грамотрицательные прямые палочкирасполагаются одиночно или парами; подвижные при 37 ºС. Особенности ростана питательных средах: на агаре Хоттингера – круглые, прозрачные, выпуклые, сровным краем; на бульоне Хоттингера – равномерное помутнение бульона;температурный оптимум для роста 37 ºС, оптимальная рН 7,2-7,3. Биохимическиесвойства: ферментирует глюкозу, арабинозу, ксилозу, мальтозу, рамнозу,95сахарозу,сорбитдокислотыигаза;неферментируетлактозу;оксидазоотрицательные; каталазоположительные.Pseudomonas aeruginosa 27853 АТСС ФГУН «ГИСК им.
Л. А. Тарасевича»Морфология клеток в мазках: одиночные палочки либо короткие цепочки схорошо выраженной грамотрицательной окраской. Особенности роста напитательных средах: при росте на плотной питательной среде: условия длявыращивания – МПА, МПБ; рН 7,2-7,-4, t=36±l°C, 18-20 часов. Колонии широкие,расплывчатые, прозрачные, с неровным краем. При росте на жидкой питательнойсреде: условия для выращивания – МПБ, рН 7,2-7,4, 18-20 часов.
Рост в видеравномерного помутнения, толстой пленки; среда может приобретать желтоватозеленую окраску. Биохимические свойства: типичные.Streptococcus pyogenes 1238 АТСС ФГУН «ГИСК им. Л. А. Тарасевича»Морфология клеток в мазках: кокки неправильной округлой формы,располагающиеся в виде цепочек или попарно, размеры 0,5-2,0 мкм. Особенностироста на питательных средах: при росте на плотной питательной среде: условиядля выращивания среда – сывороточный агар, t=36±l°C, 18-20 часов. Колониимелкие блестящие. Биохимические свойства: типичные.Staphylococcus aureus MRSA ATCC 43300 Becton Dickinson France S.A.AХарактеристика тестерного штамма «Microtrol»: грамположительные кокки;каталаза-положительный; оксидаза-отрицательный; рост на хромогенном агаре –положительный; ДНКаза-положительный; коагулаза Protein А – положительный;антибиотикочувствительность – метициллин: устойчивый.Streptococcus pyogenes ATCC 19615 Becton Dickinson France S.A.AХарактеристика тестерного штамма «Microtrol»: биохимический контрольAPI 20 STREP: удовлетворительный результат; грамположительные кокки;каталаза-отрицательный; оксидаза-отрицательный; группа по Ленсфильду –96группа А; ДНКаза-положительный; антибиотикочувствительность – бацитрацин:чувствительный.Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 Becton Dickinson France S.A.AХарактеристикатестерногоштамма«Microtrol»:грамположительныедиплококки; каталаза-отрицательный; оксидаза-отрицательный; устойчивость кжелчи–положительный;антибиотикочувствительность–оптохин:чувствительный.Salmonella typhimurium TA100 Коллекция микроорганизмов кафедрыгенетики ФГБОУ ВО «МГУ им.
М. В. Ломоносова»Генотип: hisG46, rfa, uvr-, pkm101, bio-, ревертирование к прототрофностипроисходит путем замены пар оснований.Escherichia coli PQ 37 НИОХ СО РАН, НовосибирскГенотип: F- thr leu his-4 pyrD thi galE galК lacΔU169 srl300::Th10 rpoB rpsLuvrA rfa trp::Mис+ sfi A::Mud(Aр, lac)cts.Таблица 2.1 – Характеристика клинических штаммов микроорганизмовШтамм микроорганизма1Stарhуlococcus sрр.:Материала исследования, из Количествокоторого выделен патогенштаммов23Слизь из зева, носа,S.aureusносоглотки, моча, фекалии,518S.epidermidisраневое отделяемое,168S.warneriсекционный материал43S.saprophyticus35S.haemolyticus81S.hominis2097123Streptococcus sрр.:Слизь из зева, носа,S.pyogenesносоглотки, мокрота, моча,123S.pneumoniaфекалии, секционный91S.salivariusматериал129S.uberis162S.mitis207S.agalactia71S.sanguinis115S.mutans83S.bovis100S.dys. ss equisimilis41S.con.
ss constellatus6Enterococcus sрр.:Слизь из зева, носа,E.faecalisносоглотки, мокрота, моча,182E.faeciumфекалии, секционный88материалEscherichia coliСлизь из зева, носа,Klebsiella sрр.:носоглотки, моча, раневоеK.pneumoniaе ss ozaenaeотделяемое, фекалии,28K.pneumoniaе ss pneumoniaесекционный материал98K.oxytoca26821Salmonella sрр.:S.enteritidis23S.typhimurium4Shigella sonnei3Enterobacter sрр.:E.cloaceae53E.aerogenes4698123E.gergoviae4E.amnigenes14Proteus sрр.:Слизь из зева, носа,P.vulgarisносоглотки, моча, раневое36P.mirabilisотделяемое, фекалии,28P.agglomeransсекционный материал8Serratia proteamaculans5Morganella morganii3Citrobacter sрр.:C.freundii49C.amalonaticus14Hafnia alvei2Acinetobacter sрр.:Фекалии, секционныйA.baumaniматериалA.lwoffi1216Pseudomonas sрр.:Слизь из зева, носа,P.aeruginosaносоглотки, моча, фекалии,94P.pitudaсекционный материал4P.alcaligenes2Sphingomonas paucimobilisСлизь из носа, носоглотки,(Pseudomonas paucimobilis)моча, фекалии, секционный9материалStenotrophomonas maltophiliaСлизь из носа, носоглотки,(Pseudomonas maltophilia)моча, фекалии, секционный11материалBacillus cereusФекалии, секционныйматериал32992.1.6.
Характеристика питательных сред, используемых в работеВ исследовании использовались следующие питательные среды:Среда № 1. Мясопептонный агар (МПА) ЗАО «НИЦФ»Составг/лПептон10,0Натрия хлорид5,0Вода мясная1000,0 млАгар-агар2,0-20,0Конечное значение рН (при 25 °С) 7,3±0,2Используется для выращивания неприхотливых микроорганизмов, дляприготовления специальных сред.Среда № 2.
Питательный агар (М001) HiMedia Laboratories Pvt.LimitedСоставг/лПептон5,0Натрия хлорид5,0Экстракт говяжий1,5Экстракт дрожжевой1,5Агар-агар15,0Дистиллированная вода1000,0 млКонечное значение рН (при 25 °С) 7,4±0,2Используется для выращивания неприхотливых микроорганизмов.100Среда № 3. Мясопептонный бульон (МПБ) ЗАО «НИЦФ»Составг/лПептон10,0Натрия хлорид5,0Вода мясная1000,0 млКонечное значение рН (при 25 °С) 7,3±0,2Используется для выращивания неприхотливых микроорганизмов, дляприготовления специальных сред.Среда № 4.
Среда Эндо (коммерческая) ФС 42-350498 ЗАО «НИЦФ»Составг/лПанкреатический гидролизат кильки11,5Экстракт кормовых дрожжей0,86Лактоза12, 9Фуксин основной0,22Сульфат натрия двузамещенный0,48Сульфит натрия0,83Хлорид натрия3,6Карбонат натрия0,01Агар-агар9,6Дистиллированная вода1000,0 млКонечное значение рН (при 25 °С) 7,3±0,2Микроорганизмы способные расщеплять лактозу (лактозопозитивные)образуют колонии ярко-розового или красно-малинового цвета, нередко сметаллическим блеском.
Лактозонегативные микробы дают рост в видебесцветных или слабо розовых колоний.101Среда № 5. Среда Эндо (М029R) HiMedia Laboratories Pvt.LimitedСоставг/лПептический перевар животной ткани10,0Лактоза10,0Калия гидрофосфат3,5Натрия сульфит2,5Фуксин основной0,5Агар-агар0,5Дистиллированная вода1000,0 млКонечное значение рН (при 25 °С) 7,5±0,2Сульфит натрия и основной фуксин обладают подавляющим эффектом награмположительные микроорганизмы. Лактоза разлагается микроорганизмами доальдегида и кислоты.
Альдегид в свою очередь освобождает фуксин из фуксинсульфитного комплекса, усиливая красное окрашивание колоний. У кишечныхпалочек эта реакция очень выражена и сопровождается кристаллизацией фуксина,что проявляется зеленоватым металлическим блеском (фуксиновый глянец)колоний.Среда № 6. Основа колумбийского кровяного агара (М144) HiMediaLaboratories Pvt.LimitedСоставг/лПептон (специальный)23,0Крахмал кукурузный1,0Натрия хлорид5,0Агар-агар10,0Дистиллированная вода1000,0 млКонечное значение рН (при 25 °С) 7,3±0,2Для приготовления кровяного агара асептично вносят стерильнуюдефибринированую кровь барана (до 5 % об.). Тщательно перемешать.102Присутствие специального пептона обеспечивает быстрый и обильный ростдаже прихотливых микроорганизмов. Кукурузный крахмал служит источникомэнергии и одновременно нейтрализует токсические метаболиты.
Баранья кровьпозволяет оценить способность микробов к гемолизу и обеспечивает их гемином(Х-фактором), который необходим для роста многих бактерий.Среда № 7. Сывороточный агар ЗАО «НИЦФ»В качестве основы используют 1,2-1,5% агар (рН 7,4), приготовленный набульоне из рыбного гидролизата, бульоне из перевара Хоттингера (аминный азотв бульоне 150-180 мг/мл) или на сухом питательном агаре специальногоназначения. К 80 мл расплавленного и остуженного до температуры 50 ºС агарадобавляют 20 мл инактивированной при температуре 56 ºС в течение 30 минутсыворотки.Среда № 8.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
