Автореферат (1139663), страница 5
Текст из файла (страница 5)
В дальнейшем в содружестве и кооперации со специалистамиГАОУ ВПО Московский физико-технический институт (МФТИ) быларазработанарабочаяпаразитологическойконструкторскаялабораториинабазедокументацияавтобусамобильнойПАЗ,серийновыпускающегося ОАО «Павловский автобус».В предлагаемом нами совместно с инженерным корпусом МФТИнаучно-конструкторскимлабораториярешениемоснащаетсямолекулярно-биологического,паразитологическогопроизводства.исчерпывающимпаразитологическаянаборомэнтомологическогооборудования,Указанныймобильнаянаборипреимущественнопризванобеспечитьсовременногосанитарноотечественноговозможностькомплексного выполнения оптимально необходимого набора экстренныхлабораторных и диагностических исследований, необходимых для принятияоперативных управленческих решений по купированию неблагоприятнойэпидемической ситуации на основе полученных достоверных данных обэтиологической причине вспышки и основных задействованных факторахпередачи возбудителя паразитарной болезни, приведшей к возникновениюэпидемической вспышки.27Рисунок 2− 3D модель мобильной паразитологической лабораторииВлабораториипредусмотренырабочиеместамикроскописта,молекулярного паразитолога и энтомолога (рисунок 1).
Также лабораториябудет оснащена компьютерным оборудованием с подключением к системеспутниковой навигации GPS/ГЛОНАСС что обеспечит оптимизацию сбора,хранения,обработки,доступа,отображенияираспространенияпространственно-координированных данных, которые будут использоватьсядля оперативной связи с федеральными и региональными центрамииндикацииикомпьютерногоидентификациианализаипатогенов,решенияпроведениянаучныхиобобщенногоприкладныхзадач,мониторинга, поддержания санитарно-эпидемиологического благополучия иоптимизации профилактики населения по социально значимым паразитозамв интересах обеспечения биологической безопасности нашей страны.ТРЕТЬЕ ПОЛОЖЕНИЕ. Методы молекулярной паразитологии,применённые для изучения ареалов комаров-переносчиков позволилидоказать завоз и укоренение на территории Российской Федерацииэкзотических видов комаров Aedes aegypti и Ae.
albopictus, способныхпередавать возбудителей вирусных лихорадок Денге, Чикунгунья и Зика28(Краснодарский край РФ). Указанными методами удалось доказатьналичие и отсутствие передачи малярии (Республика Таджикистан иКыргызская Республика), что послужило основой для признанияэлиминации малярии на этих территориях, лейшманиозов (РеспубликаУзбекистан) и дирофиляриоза (Кировская область РФ).Молекулярно-генетическиеисследованияобычноприменяютвклинической диагностике для выявления больных малярией в эндемичныхместностях; подтверждения результатов микроскопического исследованияпрепаратовкрови;определениярезистентностивозбудителейклекарственным препаратам.В системе государственного санитарно-эпидемиологического надзораэти методы применяют гораздо шире:1)при эпидемиологическом обследовании потенциальногоили активного очага малярии для установления происхождения случаяи его классификации (завозной или местный);2)припоискеисточниковинфекциисредигруппповышенного риска заражения (сезонные рабочие, коммерсанты,иностранные студенты и др.);3)дляоценкипротивомалярийныхэффективностимероприятий(сезоннойпроведенныхилимежсезоннойхимиопрофилактики);4)длямониторингавосприимчивостипереносчиковквозбудителям и чувствительности к применяемым инсектицидам;5)при подтверждении достоверности отсутствия больных илипаразитоносителейвоздоровленныхочагах(сертификацииэлиминации малярии на отдельной территории).Изучение пораженности населения малярией проводилось в 2006 г.в двух городах и трех сельских населенных пунктах РеспубликиКыргызстан.
В результате обследования 60 больных с клиническими29признаками малярии, диагноз был верифицирован в ПЦР у всех.Одновременное обследование 157 здоровых членов семей больныхмалярией ни в одном случаев не выявило присутствия фрагментов ДНКP.vivax в крови.Изучениевозбудителеймолекулярно-генетическойтрехдневноймаляриивструктурыразныхпопуляцийочагахРеспубликиКыргызстан показало, что все возбудители связаны с периодическипроисходящим завозом штаммов из соседних Республик Таджикистана иУзбекистана. На территории Республики Кыргызстан завозные штаммыциркулируют непродолжительное время, что в значительной степениопределяет отсутствие укоренения инфекции в очагах.ВпериоддостиженияэлиминациималяриивРеспубликеТаджикистан, когда число случаев и очагов значительно уменьшилось,появилась необходимость популяционных исследований для проверкидостоверности отсутствия источников инфекции в неактивных очагах,учитывая возможность восстановления и распространения малярии в южныхрайонах, пограничных с ИГА.Кроме того, была апробирована в полевых условиях реальногоэпидемиологического популяционного обследования разработанная нами вНИИМПиТМ им.
Е.И. Марциновского ПЦР-диагностика малярийнойинфекции, основанная на выделении ДНК из препарата крови толстая капляуже использованного при микроскопическом исследовании, т.е. ранееокрашенногопрепаратовпокровиРомановскому-Гимза.«толстаякапля»Возможностьприготовленногоиспользованиядлярутинныхмикроскопических исследований, для целей ПЦР-диагностики повышает ирасширяет роль и значение препаратов «толстая капля» в эпиднадзоре замалярией и позволяет использовать эти препараты для ретроспективногоконтрольного исследования в целях исключения гиподиагностики малярии вочагах с низкой пораженностью населения.30Как уже указывалось ПЦР-диагностика малярии имеет значительныепреимущества в сравнении с микроскопической диагностикой не только поспецифичности и чувствительности, но и по трудозатратам, особенно примассовых обследованиях.
Так, микроскопия 100 препаратов крови требуетдля окончательного заключения, в среднем 16,5 часов, что соответствуетработе трех микроскопистов в течение рабочего дня. Использование ПЦРпозволяет при наличии одного термоциклера, выполнить эту работу одномучеловеку за один рабочий день.С помощью ПЦР была проведена необходимая для РеспубликиТаджикистан проверка достоверности отсутствия местной передачитрехдневной малярии. Исследования были проведены в 2012-2014 гг.
натерритории четырех ранее эндемичных по малярии районов РеспубликиТаджикистан. КромеПЦР-диагностики одновременно использовалидиагностические экспресс-тесты, предоставленные ВОЗ и микроскопиюпрепаратов крови. Всего было обследовано свыше 2000 человек. ПЦРдиагностикой было охвачено – 750. Ни в одном исследовании не былообнаружено присутствие возбудителей малярии. Указанные исследованиястали достаточным основанием для подтверждения элиминации маляриина территории Таджикистана в соответствии с требованиями ВОЗ.Скрининг населения в очагах висцерального лейшманиоза вПапском районе Республики Узбекистан (2007-2009 гг) впервые показалналичие бессимптомных носителей Leishmania infantum среди детей –жителей очагов висцерального лейшманиоза в Узбекистане.
Ранее нетолько в Узбекистане, но и других эндемичных по висцеральномулейшманиозу странах СНГ не было известно о наличии бессимптомныхносителей L.infantum. В дополнение к обнаружению бессимптомныхносителейбылодоказано,чтовозбудительспособендлительноперсистировать в организме переболевших – от одного до десяти лет –даже после проведения полноценного курса специфической этиотропнойтерапии глюкантимом.31Новымпаразитарнымиважнымдляболезнямизадачэпидемиологическогонаправленийнашихнадзораисследованийзасталаразработка методологии определения уровня зараженности членистоногих –переносчиков возбудителями инфекционных и паразитарных болезней.
Этотподходпозволяетполучатьконкретныеобъективныеданныеинфицированности переносчиков патогенными агентами и рассчитыватьреальный риск заражения людей в результате трансмиссивной передачивозбудителя на обследуемых конкретных территориях.Применение популяционно-генетических исследований для изученияпереносчиков, заражённых возбудителями дирофиляриозов, было вызванонеобходимостью энтомологического мониторинга ситуации, определениярисказараженияиоценкиэффективностиприменявшихсямерпрофилактики. В отдельных населенных пунктах и регионах РоссийскойФедерации, потенциально опасных для распространения этих паразитозов.Дляисследованиядирофиляриозовкомаровиспользовалиназаражённостьполимеразнуювозбудителямицепнуюреакцию,позволяющую обнаружить до 1 микрофилярии в биопробах (50-100 взрослыхособей комаров). В последние годы появились варианты ПЦР, позволяющиеопределить наличие в организме комара инвазионной стадии личинокнекоторых филярий с помощью L-3 активного гена.
За период с 2006 по 2011год было собрано и исследовано 6891 самок комаров, собранных в разныхрайонах умеренно-климатической зоны России. Комары были объединены в726 проб и проанализированы методом ПЦР на зараженность D. repens и D.immitis.Наши исследования в НИИ медицинской паразитологии и тропическоймедицины им. Е.И. Марциновского проводились на протяжении последних10 лет. Целью указанных научных разработок стала оптимизация методикивыявленияналичияпатогенныхагентоввтелечленистоногих–переносчиков, ранее эти цели достигались за счет ненадежных методовмикроскопической визуализации патогенов в препаратах, приготовленных из32свежеполученных членистоногих, не подвергшихся процессу высыхания.Высохший материал для микроскопического исследования оказался непригоден.В наших исследованиях мы основывались на выделении фрагментовДНК, позволявших проводить достоверную индикацию и идентификациювозбудителей трансмиссивных паразитарных заболеваний в переносчике.Вкачествепервогообъектадлянашихисследованийбылииспользованы переносчики возбудителей дирофиляриозов.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
