Главная » Просмотр файлов » А.Т. Мокроносова - Малый практикум по физиологии растений

А.Т. Мокроносова - Малый практикум по физиологии растений (1134226), страница 15

Файл №1134226 А.Т. Мокроносова - Малый практикум по физиологии растений (А.Т. Мокроносова - Малый практикум по физиологии растений) 15 страницаА.Т. Мокроносова - Малый практикум по физиологии растений (1134226) страница 152019-05-12СтудИзба
Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 15)

Реактмзы и оборудование; 06%-0 раствор этилового спирта нлн 30%-й раствор ацетона; МКСОю (СзСОю); кварцевый песок; фарфоровые ступки с пестиками; скальпель; ножницы; пинцет; стеклянные палочки; коба Бупзепз со стеклянным фильтром ъГю 3; мерные колбы объемом 26 мл; мерный цьлнндр объемом 26 мл; стеклянные воронки; конические пробирки; пипетки объемом 2 и б мл; фольга; весы торспонпые, спектрофоюометр.

Объект исследования: листья растений разных световых экотппоз; листья плп хвоя одного и того же растения, рзстущпс при разном световом рюгкпмо (листья внутри кроны, нз верхушке побегов и т. д.); листья разного зозРаста. Ход работы. Для решения задачи необходимо провести зкстракцию пигментов и определить на спектрофотометре их концентрацию. Навеску растительного материала (100 — 200 мг) размельчают ножницами, помещают в маленькую ступку, добавляют на копчике скальпеля немного МЯСОз, приливают 4 — -5 мл ацетона и тщательно растирают. Полученную вьпяж- ' С...

— концентрация каротиноидоз. 61 ку сливают по палочке на стеклянный фильтр, вставленный в колбу Бунзена. При помощи насоса жидкость отсасывают. После этого в ступку приливают еще немного ацетона, растирают, снова вливают на фильтр и отсасывают. Эту операцию повторя|от несколько раз, пока раствор, стекающий из фильтра, не будет абсолютно бесцветным.

Вытяжку переливаю| в мерную колбу, колбу Бунзена ополаскивают несколько раз небольшими порциями ацетона и доводят чистым ацетоном объем вытяжки в мерной колбе до метки. Работа ко.тнчественная, нельзя терять ни одной капли! Полученная ацетоновая вытяжка содержит сумму зеленых ь желтых пигментов. Концентрацию хлорофиллов а и Ь определяют на спектрофотометре. Для этого часть полученного экстракта наливают в кювету спектрофотометра. Вторую кювету, заполненную чистым растворителем (80о)о-й раствор ацетона), используют как контрольную.

Кюветы помещают в кюветную камеру спектро. фотометра и определяют оптическую плотность 72 вытяжки прн длинах волн, соответствующих максимумам поглощения хло. рофиллов а и Ь в 80з|о-и растворе ацетона, 663 и 646 нм. Для определения каротиноидов вытяжку промеряют при К=470 ни Концентрацию хлорофиллов а, Ь и каротиноидов рассчитывают по формулам; Сь = 12,2117заз 2 8 11г)зм; Сь = 20,137)зьз — 5,03Взаз,' 10007)пь -- 3,27С, — 100Сь Си, = 229 где С„Сь и С„р — концентрация хлорофиллов а, Ь и кароти ноидов, мг/л.

Затем вычисляют содержание пигментов Л в растительном материале, мг)г сырой массы: Л =)7С)!ОООР, где С вЂ” концентрация пигментов, мг/л; )7 — объем вытяжки, мл (25 мл); Р— навеска растительного материала, г (0,1— 0,2 г). Оформление работы. См. равд. 1, задача 1. РАБОТА 2. ИССЛЕДОВАПИЕ ФИЗИЧЕСКИХ И ХИМИЧЕСКИХ СВОИСТВ ХЛОРОФИЛЛА Цель работы. Исследовать ряд свойств хлорофилла. Реактивы и оборудование: те же, что в работе 1 данной задачи; бензин; 20с(ь-й спиртовой раствор щелочи; !Оь)ь-й раствор НС!; КОН: (СН|СОО) з2п нли (СН,СОО) зСп; регистрирующий спектрофотоиетр.

Объект исследовании: те же, что в работе 1 данной задачи, ОПЫТ 1. ФЛУОРЕСПЕНЦИЯ ХЛОРОФИЛЛА Флуоресценция — явление свечения веществ при поглощении ими света. Переход возбужденной молекулы пигмента в Основное исходное состояние сопровождается излучением поглощенной энергии в ~виде света флуоресценпии. Излучаемый свет имеет ббльшую длину волны, чем поглощаемый. Для хлорофилла характерна красная флуореецепция.

Ход работы. Получить вытяжку пигментов, как описано в работе 1 данной задачи. Вытяжку пигментов помещают на черном фоне у окна или освещают спне-фиолетовым светом в области коротковолнового максимума хлорофилла. Вишнево- красный цвет вытяжки в отраженном свете свидетельствует о способности хлорофилла флуореспировать, что является признзком фотохимической активности ве|цества. ОПЬП Е РЛЗДЕЛЕИИЬ ПИГМЕНТОВ ПО КРАУСУ й!етод основан на различной растворимости пигментов в спирте и бензине. Сродство пигментов к полярным (спирт, апетон) и неполярным (бензин) растворителям определяется степенью их полярности. Ксантофиллы, содержащие две или более полярных групп, хорошо растворимы в спирте, в то время как каротин отличается более высоким сродством к бензину.

Фитольный остаток,в молекуле хлорофилла представляет ее гидрофобную часть и обусловливает возможность взаимодействия молекулы пигмента с бензином Удаление фитола при Омылении хлорофилла увеличивает сродство пигмента к полярным растворителям. Ход работы. В пробирку наливают 2 — 3 мл спиртовой вытяжки пигментов, прибавляют примерно полуторный объем бензина и несколько капель воды для того, чтобы спирт не смешивался с бензином Пробирку закрывают и несколько раз сильно встряхивают, а затем ставят на 2 — 3 мин. Происходит разделение слоев: верхний зеленый слой (бензиновый) содержит оба зеленых пигмента и квротин, нижний желтый слой (спиртовой) — ксантофиллы.

Определяют спектр поглощения ксантофилла. Показателем чистоты отделения ксантофилла от зеленых пигментов является отсутствие поглощения в красной. Области спектра. Т!ПЫТ 3. ОМЫЛЕНИЕ ХЛОРОФИЛЛА И 01ЩЕЛЕНИЕ КЛРОТИИЛ Ход работы. В пробирку с 2 — 3 мл вытяжки пигментов прибавляют несколько капель 20о)о-го спиртового раствора щелочи. Наливают 1 — 1,5 мл бензина и две капли дистиллированной воды. Сильно встряхивают, а затем дают отстояться.

Нижний, сниртовой, слой содержит соль хлорофиллиновой кислоты (продукт омыления хлорофилла) и ксантофилл, верхний, бензиновый, слой — каротин. Определяют спектр поглощения каРатина. 62 63 Можно произвести омыление н после разделения слоев по краусу. Для этого в ту же пробирку прибавляют кусочек щелочи, встряхивают и наблюда1от перемещение хлорофилла из верхней фазы (бензин) в нижнюю !Спирт), Реакция хлорофилла со щелочью идет следующим образом: 1ООСН, л С, Нь,ОЬА1З вЂ” зч.о1 - СП.,ОН 4 С.„Н,,ОН С.,Н, ОЬ,М ° 'СООС „11., соон. ОПЫТ К ПОЛУЧЕНИЕ ФЕОФИТИНЗ И ВОССТЛНОНЛЕ1П!Г МЕТЛЛЛООРГЛНИЧЕСКОЙ СВЯЗИ Ход работы. В пробирку наливают 2 — 3 мл спиртовой вытяжки пигментов и добавляют 1 — 2 капли 10%-го раствора НС1.

При взбалтывании вытяжка становится бурой вследствие образования производного хлорофилла — фгофитипа 1в хлорофилле атом магния замещается водородом). Реакция идет по следующему уравнению: соосн / 3 l соосн; С1Н ОЧ МК И за + 2НС1 —. С„Н,„ОЬ,Н, "' сооснн „ соосз,н,„ К побуревшей вытяжке прибавляют несколько кристаллов уксуснокислого цинка или меди, осторожно нагревают на водяной бане и наблюдают появление зеленой окраски благодаря восстановлению металлоорганической связи.

Оформление задачи, См. равд. 1, задача 1. В каждом опыте опишите свои наблюдения и на их основании сделайте заключение о физических и химических свойствах хлорофилла. РАБОТА 3. СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СПЕКТРАЛЬНЫХ СВОИСТВ ПИГМЕНТОВ В РАСТВОРЕ И ТКАНЯХ ЛИСТА Пигменты фотосинтетического аппарата локализованы в мембранах и образуют пигментбелковые комплексы отвечающие за поглощение света и передачу его энергии в реакционные центры. Пигмент-белковые и пигмент-пигментные взаимодействия, происходящие в мембранах, обусловливают изменение спектральных свойств пигментов.

Зто ведет к образованию набора различных форм пигмента, обладающих одной и той же химической структурой, но отлича1ощихся спектрами поглощения !например, хлорофилл аззь амз, азз4 и др.). Такое разнообразие форм ведет к увеличению спектральной области поглощения фотосинтетического аппарата, т. е, более полному поглощению света, и обеспечивает возможность эффективного направленного переноса энергия света наиболее длннноволновым формам хлорофилла а реакционных центров.

Цель работы. Сравнить спектры поглощения пигментов в растворе и в листьях высших растений. Реактивы и оборудование: те же, что в работе 1 данной задачи; регистрирующий спектрофотоиетр Сф-14 или СФ-18. Объект исследования: листья растений различных экотипов; листья растений при различной степени формирования и деградации фотосинтетнческого аппарата (этиолиронанные и зеленеющие проростки кукурузы, осенние кистьн клена, каштана к др.). Ход работы. Работа состоит из нескольких этапов. 1. Приготовление ицетоновой и спиртовой вытялски пигментов из листьев.

Способ приготовления вытяжки пигментов описан в работе 1 данной задачи. В качестве экстрагирующего раствора используют 80з1е-й раствор ацетона и 96%-й раствор этилового спирта, 2 Регистрация спектров поглои4гпия а спектрофотометре, Порядок работы на регистрирующих спектрофотометрах описан в Приложении П. Спектры поглощения растворов пигментов и листьев записывают на одном бланке. Для снятия спектров поглощения вытяжки пигментов их раствор наливакзт в кювету, укрепляют в к1оветоцержателе н помещают в правую часть (по ходу луча) кюветного отделения спектрофотометра. В контрольную кювету наливают чистый растворитель. На барабане укрепляют бланк, строго следя за точностью совмещения линии 400 нм на бланке и на шкале прибора. Производят запись спектра. Для регистрации спектра поглощения живого листа его помещают в специальные круглые кюветы.

Характеристики

Тип файла
DJVU-файл
Размер
1,58 Mb
Тип материала
Высшее учебное заведение

Список файлов книги

Свежие статьи
Популярно сейчас
Как Вы думаете, сколько людей до Вас делали точно такое же задание? 99% студентов выполняют точно такие же задания, как и их предшественники год назад. Найдите нужный учебный материал на СтудИзбе!
Ответы на популярные вопросы
Да! Наши авторы собирают и выкладывают те работы, которые сдаются в Вашем учебном заведении ежегодно и уже проверены преподавателями.
Да! У нас любой человек может выложить любую учебную работу и зарабатывать на её продажах! Но каждый учебный материал публикуется только после тщательной проверки администрацией.
Вернём деньги! А если быть более точными, то автору даётся немного времени на исправление, а если не исправит или выйдет время, то вернём деньги в полном объёме!
Да! На равне с готовыми студенческими работами у нас продаются услуги. Цены на услуги видны сразу, то есть Вам нужно только указать параметры и сразу можно оплачивать.
Отзывы студентов
Ставлю 10/10
Все нравится, очень удобный сайт, помогает в учебе. Кроме этого, можно заработать самому, выставляя готовые учебные материалы на продажу здесь. Рейтинги и отзывы на преподавателей очень помогают сориентироваться в начале нового семестра. Спасибо за такую функцию. Ставлю максимальную оценку.
Лучшая платформа для успешной сдачи сессии
Познакомился со СтудИзбой благодаря своему другу, очень нравится интерфейс, количество доступных файлов, цена, в общем, все прекрасно. Даже сам продаю какие-то свои работы.
Студизба ван лав ❤
Очень офигенный сайт для студентов. Много полезных учебных материалов. Пользуюсь студизбой с октября 2021 года. Серьёзных нареканий нет. Хотелось бы, что бы ввели подписочную модель и сделали материалы дешевле 300 рублей в рамках подписки бесплатными.
Отличный сайт
Лично меня всё устраивает - и покупка, и продажа; и цены, и возможность предпросмотра куска файла, и обилие бесплатных файлов (в подборках по авторам, читай, ВУЗам и факультетам). Есть определённые баги, но всё решаемо, да и администраторы реагируют в течение суток.
Маленький отзыв о большом помощнике!
Студизба спасает в те моменты, когда сроки горят, а работ накопилось достаточно. Довольно удобный сайт с простой навигацией и огромным количеством материалов.
Студ. Изба как крупнейший сборник работ для студентов
Тут дофига бывает всего полезного. Печально, что бывают предметы по которым даже одного бесплатного решения нет, но это скорее вопрос к студентам. В остальном всё здорово.
Спасательный островок
Если уже не успеваешь разобраться или застрял на каком-то задание поможет тебе быстро и недорого решить твою проблему.
Всё и так отлично
Всё очень удобно. Особенно круто, что есть система бонусов и можно выводить остатки денег. Очень много качественных бесплатных файлов.
Отзыв о системе "Студизба"
Отличная платформа для распространения работ, востребованных студентами. Хорошо налаженная и качественная работа сайта, огромная база заданий и аудитория.
Отличный помощник
Отличный сайт с кучей полезных файлов, позволяющий найти много методичек / учебников / отзывов о вузах и преподователях.
Отлично помогает студентам в любой момент для решения трудных и незамедлительных задач
Хотелось бы больше конкретной информации о преподавателях. А так в принципе хороший сайт, всегда им пользуюсь и ни разу не было желания прекратить. Хороший сайт для помощи студентам, удобный и приятный интерфейс. Из недостатков можно выделить только отсутствия небольшого количества файлов.
Спасибо за шикарный сайт
Великолепный сайт на котором студент за не большие деньги может найти помощь с дз, проектами курсовыми, лабораторными, а также узнать отзывы на преподавателей и бесплатно скачать пособия.
Популярные преподаватели
Добавляйте материалы
и зарабатывайте!
Продажи идут автоматически
6384
Авторов
на СтудИзбе
307
Средний доход
с одного платного файла
Обучение Подробнее