Ю.А. Овчинников - Биоорганическая химия (1128694), страница 78
Текст из файла (страница 78)
Так, лри расщеплении амилоое«тика ~лицерии и вритри образуютск в соотношении (. )5, что с виде т льствует о том. что адин ковш Ой мо «оса ври д (и с л ловате ьно, алло разаетвлсиие) лр ходи ся на вялые (5 эиеиьев полисахаридной цени. Классическая схема уставе мили строев«» пол«сахар«до», ««лючающая «ачествс осиовнык этапов Определение ы иосахариде~а О состаю, типов за ешения, ооследоаатслыюст» и аиомеряои «онбяиурации моносахаридиык Остат«ов, при«мнима тел~ «а к зюлисахаридам, которые количественна расщеилнютси в услоаияк кислотно о ~илрсщиза (ацетолиэа. мета«слита) до соответствующик мокеев«аридных едиииц. При а млизе ооли ахаридоэ неабыч~юоз стрэеиия, состоящих из сахаров, разрушающихся в услоаиак цеполимеризации, или из сэ аров, тликозилиые сввэ оторык ие иодлаютсв кислотному расщеплению, «лассическая с| ема становится иеэффекти вой иэ-эа яе Оэ.
модности Ореоло еть цаде Оер ый се этап, т. е. определить мане«а«арию~ми состав иалимера. у ее«од одершащ~ б ш:от. Орое Озвременна ймр-сиектраскапия ('н, ' с,ттеумериая( яаляетс м Шы иг струмеитом аизлню .труктуры полиса аридаа н используется падавляюшем бол шинстве исследаеаний Этот метод Оазеоляет Определять как сОстав, мести замешения и паследоютельнссть иогюсаялридны« остатков биапалимера. так и ем ~ра- транстееннос строение.
но г о т шо, зг тн, йе — н о юн и, гьон 3 н ннм «! н сн,он сн,он сн,он ооон соон ннл ьвм о о О м* о Н«Г ш — — нн ь. сн,он ,Он сн,.о к сн.ог н,ом нн*. с нн* О м, и сн.ом г Глнкопротемны Глнкапротеинамн назыюютсн мешанине биопол меры, в ката. рык малеку ю белка салергкит кОшлентна присоединенные алигасакарилные цепи. Длина ели гаса зариднмк цепей н ик числа в гли ко протонная еарьируют в иракик пределак. Молекула белка моше содержать Одну (интерлейки 2 челоеека) или несколько сотен (муцинм подчелюстнм» 1келез ми»стим« ! уелсводнмх цегей.
В свою очередь. в состав угяеводн й цепи ходит пт 2 до 20 моносаюцмдимх ты»зев. Харе«му»стихи некотармх прнршвшх гликопроминов представлснм в таблице 17. Гликопрстеннм ахоллт в состав всех аэпагюц ткашй и клеток организма человека и миног»их; они содермвтсв в секретарнмх »идкостхх и плазме крови. Функции глнкопротенно» рсзнмчаино разнообразим. Среди них вотрен«ноя бмрмсн ы. гормонм. бе ки иммунион снстсмм, ко понситм пяазмм «рози,муцинм. репепторм «лето нмх мембран и г. л. При ем»еленин гликопротсинов нэ прнролиьш иска ников используетс иаб р «ромз ографнческнх и электрофоретнчсских столов. характерник дв» хи ин белкон В процессе «мделени» необходимо учитмэать аозмо:кную мнкрогстсрогенноетз гликопрптеинв по углсеогаюму «омпонен.гу: ао многих случвв«часть гюлекул имеет олигосэкермднме цепи, иедостроеннме по терминальным сахарам (в первую очсрель по остаткам сналовмк «ислот), что ымстно сквзмеастсн на физико химических сеойсптах, в мог«ости нв заряде моленул.
Вйирокое примененме лля очистки ра теорнммх и с браним« глнкопротгншюн находит аффннная кро втографин нз нммобн.ю ., ш о~ »вален Л. егюю н н юролмшен пшеницм н бобов клсщениим, лектин чечевицы. Хр е э э«тяп ю в Та в и« !т. ° В б Р а Р* ' о б) У Наиболее расиростраиеиимм типом вязи а виве.ивах ~ликоиротеииа» является у- м оэвдиая связь. образуемая остатками й'-ацетивглюкоэа иив и р-амидиой группой аспара~миа ннг ну — сн соон ннг р-0-О1сйргс-хййп Сигивльиой иоследоввтельиостью для присседииеиия олигосахврида схумит триилет амииокислот Аэп. Х-йсгбТйгУ, где Х вЂ” любая а ми ивкисяотв, кроме орехи ив.
Ю-Гам козидиме ови гога каридиме де. пи обнару «аиы в таких гликопротеииах, «вк иммузюгяобуяиим, фстуия, аитигеим чмисмм совместимости и т. д, Рб-ряикоэияамид. нан «ялэь тноснтельно устои нва в мягких щслочнмх и кнслотнык уело нях, ио распгелляетса при более;ксстком гидролнзс (2 и. НС1, 100 'С, !0 . 12 мин нлн 02--2 и НаОН, !00 "С, 10 ч!. Среди Н-гликозидных цепей глн опр:темное разлнчзют цепи, обогншеннмс пстатна н маннозы. н цепи сломно о зила. К первым относится олигссахариды, н состав которых «ходят лишь остатки М-внегилпювозаминв» О-мвннозы.
Углеводнме пепи слозкного типе, помимо названных сахаре». солермат остатки О.галактозм. ).-фукозы н 1Ч-ацстнв нли Н-гликолнлнсйра иновой ислгм. Вазовои структурой все» Х-глнкозндных цепей является фрагмент (а). В олнпнвхерндах (б), абагвшеннмх сомиками маниозы. к нему присоединяются дополнительные остатки п-О-маннозы, а в глнкозипных цепях слогкного ткп» (в) — - Висахарнды 0-О-Оа1-(1 4)-р-О-О)смйс и терминальные сахара — сиаловые кислоты н фукоза. В зависимости от висла днсахаридных быков («антенн») цепи слозкмого типе назыэаютсн бнаитеннымн, триаитеиными н т.
д. Строен а )глввовое н у леэ доздермгнцг х бнопо ш еро 1 СЮ(1 -4) Р-ОХНА 1 . 4 Р-О,)-(1 -эрд-0)снлс-(1-2)-а.-ММ 'М й1 4)-Р-0(смд -Н У+ВММА -(!' ф-М /4 р-Оа1-[1 4)-р-а(ы(А -О 2)-и мвн (в) Р-Ва(-(1 -4)-Р-С! ЫА ~г ранит:(1 ф-р-В(анде!(1 4)-)ьисмлс.(! 4)-м н-Гюп 1 ('г) -амп-(1- 2)-и-м .(! 2)-а ме» 1 (б) и-м и ауп-м -О -ь) -м* -(1 ц)-нмяю - М и-М с-Мап )2 )2 Мм -М )з 2' -(1 '42(ьрй нг ~1-лр( Омыл -(1 а)-к, Вру' м т по внзи н ик ротеинак излкетси О-'лнкозндмт» сен ь егкау остатками Н ацетилгалактоэамигм н пацан и. юй группой сервиз или треонина.
Этот тип свкзи характерен ллн муцинов, группоиык в:ществ крови, глииофорина мембран зритуоцигов н т. л. О Гликотнлгмк свиэь монет быть рзг.- щеплеиа в мягких щелочных условиик (ОН н. НзОН, 37 'О). Ннэ ннт 1 нэСнсоон / носн снсоон 1 снз а-О-Ои!НАс-зззгутйг т а л ц тв. Ва но~их гл капротеинвк, «ак сы оро очных, так и е бран ных, одновременно присутствуют и Н. и О-гликозипные ге и Гораздо реже встречаются другие типы углевод-белиавмх связси. В каллвгснаю нэпримед обгмружетм св зь, образованная аствтнами В-Р-галл«тамм и гящюксилизина, в растнтельнык глнкапротеннах - остаткам» (..араб»новы и гндрокснпрплииа, а в глнхапратеинв» дрожжей — О-мин«азы и серн»а илн треаиина н т.
1« Прн анализе структура угле»один« цепей гликопротеинав еа»- нмм этапом ивл етс определение манссахаридного состава. Здесь используются абмчиыс вгоды структурного анализа углпюдав, а именно: кнслатиыи гнцролиз или метаналмэ с пщлещюшим хрО- мнтографи же«им рвэделеинем продуктов Па маносакаридиому составу, «ак правило, мо но судить и о типе углевод.учила ь галлен, в астнпсти нкпичне Н-ацетилгалв«тозамнна говорят а присутствии О-гликоэндных цепей.
Тип угле«од-беэ анан вязи д «густ та«тику получения инди видуальных али сахариднм» целе О-Гл козиднме цепи отщео лвютс» условиях ми «о О щелочного илролнзв в прмсутствин 1 М бор~ядр»ля натри» дл» прелатврангення деструкции олигосахаридв, при зта тор ' юс юш оно ахврид преврвшс п И гм Ы-л«дню «ариды удается получать лишь нагрещние (100 С, 5 ч) глн«а- протеина с безводным гнпразинам. В последние годы широкое при генение нашли энпоглнказидаты, прелые в ега энда-((-ю.ацетмлглюкозаминнлазы, гнэропизующие глнкознаную вязь в хитобнозильиом остатке.
сосгщисннам с аспаупги ом палипептндной цепи. Обнаружена н анги -(1-М-ацетил глюиазаминидазв. пгдрализующа» связь межлу терминальным Н ацетилглюкозвмииом и аспврагином Названные ф.'рмеиты способны расщеплигь гликазнлныс связи квк в глнкопептидах, твк н в интаитнмх лн«опротеи ах. что открывает еазмолгность иэуче. ни» бнологическои ра и угл аолных детерминант. Ферменты иэ разных истачни«ов отличаются по специфичности: возмолгиость гигцюлиза апре»«ластов строением значительной чисти ол госаха рида. в не толща структурой ма«оса«ар«диого звена, глнкозидная свизь при котором расщепл ется. В большинстве случаев Н гликазилныс цепи получают не в ниде олигасахарилов, а в анде гликопептндов. С этой целью проводится «счерпывающий протеолнз с использованием пронвзм. Двух-, рех.
кратная абраба «а гликопратеииа про»азой позволяет палуча ь гликопепш,гм. содержащие минималы пе число аминактилотных остат «од в предельном случае лишь олин аспарм ни, катаржи может бить отшеплен от алиг ахвригю с помощью другога ферме па— г икозиласпара ипаты. Определение стругтуры алигасахариднмк целен проводите» ствндвртнымн метопами, описанными ранее. П(м исследовании гликопротеинов;кииатносс происхогкдсни» задача облегчается тем, что в их сОстаае встреча« тся лишь семь монасахаридов: Н-ацетилглюхазвмин, Н-ацет л вла~ тозамин, нейрвминощя кислота.
манноза, гала«таза, фукаэа и г. юкаэ г. Долее гаго. в большинстве случаев структуры угл водных цепей определенною 'гнив. выделенных из разных лнкопратеинов, окаты»в«пса построенными из апинакоаых блоков. Общие черты обнару кнввютсн н в структуре О-гликазивных цеп П. Как правило, базовую часть нх составляет дисахарид й-О-Са(-(1 3)-О Оа1мдс, пр оединенныи а-связью к серину нли трсонину палнпептид» К базоюму олигщащрплу могут быть прн соединены остатки термигмяь мх сахара -- неираминовой кислоты н фуказы. С ргы .в углщюдю тг во»аз»и(згим 1 з б Опа» врО« й-анна -(1 .4) щ нл Н же при мдеты структуры О-.ликозилсв з» иых ол щсахаридпв из муцииав подчелюстимх !келез. Базовый фрагмеит мо!кет быть так!ке предста»пои дисахаридом А-О.Оай»Аа-(1 3).Оа)НАс, в «отаром остаток Н-ацетилглэжозамина служит птиц!»пой тачкой дли образаваиии сложиых цепей с термиивльиыми паслеваввтельиастями, зара териыми дл» !рупоов и! веществ кров».
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
