Ю.А. Овчинников - Биоорганическая химия (1128694), страница 37
Текст из файла (страница 37)
Первоначально нвибольпме распространение плучнл метод производства лейкпцнта(жо о интерф рона на пскове доноре ой крови (К. К нтед, финляндия, )977). При этом леикоцнты полвергаются иикубации с каким-либо вирусом (например. вирус Сениай мли ярус болезни Ньюкасла), е «ачестве компонента ку ьтуралыюй среды используется сыворотка кроен челом. а н м быка (иногда «эюин молока).
Последующая и«нотка с помощью «ромэтографнческих приемов дает дгмтато но концемгрирое нный п)мпарат ннтерферона. Радикальны решенмем вопросе оказалось использование ме годов генки ческай инженерии. В частности, гены ннтерферона удалась экспрессироаать в различных «легкак, а то числе банте риальных, дрожжа ы згй). Лимфокины н монокнны.
В процессе развнги» звщятнои реакции организм» актнвированные лнмфошгты секретируют набор бел- Б апагь ес ю рань бепкав Интерферон Мембранныи рецептор Кпетонныи геном ,б -Опнгоаденилат. Протеин. синтетаза ннназа АТР РРРА~2 П~РГА~2 ЯРАт,г2 ПН~ А Рт р ДГ 2 Атр Антивацнп РНКазы 1, Ингибнрование деградации иРНК н синтеза бедна рнбооомной РНК р .ын,ы ы„н рф Бели»п.п д Р . )29. Л ко», регулнрующнк пролиферэцию и днфференцирпвку кштак иммунгюй системы; дл» теки» белков часто нсполщуется термин ик р. евкк г.
Открытый в 1979 г. в лаборатории Р. Галла (ГША) интерлейкнн 2 )Ш2, ранее называвшийся клеточным рпспзвым фактором) вызываетпрплифервцнговктивироааниык Т лнмфоцито и тани ает центральгюе ьгешо в к»стыде нитерлейкигюа )или лимфокинов); ои продуцируется зрелыми Т-лммфоцнтами )Т-келлерами) в р.- зулвгат» нк стимуляции эитигеивмн. В инливидуально осто» рле 2 чело кв удалось получить нв ссгюке ислам зевания метал» кроматпграфни «ьмокого две»сии» на обрвщенной фащ и прнменени» мпноклональнык вюмтсл.
Он предстввлнет собзй сравнительно небольшой пщрофобныи белок, с оде раками й 133 амин окисл отиык остатка )рис. 129! . Амннпкнслотна» последощтельнпсть ннтерлейкиив 2 челощка апред ги по структуре сооткетствуюшего гена )Т Таингучн. 19ВЗ) и »атем подтвермцена анализом самого белка. К одному из аминокггсхотны» остатков <Тйг-3) ннтнржйкн а 2 рн оедн на у дна» цепь (эа счет 0-глнкознднон связи), а состав которой акодят остатки И-ацетнлнейрв ивовой (сналошш) кислоты (ИенН»с), гелвктозы (П«1) и 1Ч-апет»»гала«го»амина (Па)МАс). Характерно, что сидячие углеводов не влияет на онологическое действие интерлейкинв 2: рекомбинвигмый П. 2 имеет ту лге удельную вглнаность, что И при)юдный.
Попытки выделить небольшои пептид, оделируюгций активный центр молекулы, не уаенчалнсь успехом. Использование метод» и ра го моиз уга нева и но ло альпы а тнтел к определенны учзст в молекулы !С2 показало, пю актнвныи центр форм»русте» амнгюкнслотнымн остатками, нвкодящнг ноя на 1»- и С-концах молекулы, облил синих в пространственной структуре меж«увы зз счет дисульфндной связи. По характеру биологического дейщ.аия ннтерлси нн 2 напоминает Шрмоны: он пролуцнруется клетками в весьма малик колиествах, ак веи в коицентрацняк порядка несколыих пнкомолей (на 1 мл), действует а клетку-мишень через соответста)юшин рецептор иа ее поверкнпсти (К вЂ”: 3 — 5х10 пМ).
*Период полул изин* интерлейкнна 2 а роаотоке из еряегся минутами. Ингерленкнн 2, по у аеммй а тояше р» я в промышлен ном масштабе иа оснаае методов генетической инменерин (СССР, США), нсдользуегс» при лечении вирусных заболеваний, иммунодефицита», некоторых форм рака. Иитермйкин 1 (П. 1, или лнмфошгтактнвирующнн фактор), вперю«е апис»нный И. Д кери н В. Ввксмано (США), продуцируется акт впрованнымн акрофагами, а так»с полнморфнояпернымн лейкоцитами, зпителиальны н «леткамн комн и другими клетками. Он инициирует пролифервцию фнбробластов, синтез простаглан) янов; основной гке мишенью»ел»ются акти»про»аниме Т-келлеры, «огорые в присутствии П.
1 секретируюг П„2 Интерлейкмны 1 человека представляют собом белки, сосшящие нз 159 (П. !ч) и 153 (П. 1)) аминокислшнык оствткон В «оде биосинтеш они получаются нз аысокпмолекулярных белков-предшестп:юшков <271 и 269 змннокислотных остатков соответственно).
В отличие от интергейкннов 2 и 1, открытый Д. Иле с ссювторвми (США) ннтерлейкин 3 (из мыши, РС3) действует не на зрелые кле кн иммуннои системы. а нв клетки-предшественники: ои вызывает рост колонии стаоловых «леток и предшественников В-клеток. Источника иитерленкниа 3 явлюотс» акти»ирен«нные Т-келперы. По «арвктеру своей активности 11.3 при»адле)кнг к факторам. стимулирующим рост «олоний различим« клеток (СЗР)! он денствует в «онцентрацнях 10 '' — Ю ''ВС Иитерлейкии 3 »власте» гликопротенном, в состав «второго вкодят 134 а ннокислогнык осгат«а.
К группе белков, продуцнруемых акти пращ«ными клетками н муннпй системы и родственных ннтервейкннам, следует отгисти лнлфтокшн н Ф к ор некроза онуколей. Лнмфогоксни (1.Т) был впервые оппели в конце 60-к и ш в «ак продукт актнвнрошннык ли фоцнтов, обладающий цнтостатической активностью. Деист»не лнмфотокснне на опу оке е и заметно у ил аается в присутствии у ннтерфероим Ли фотоксин человеке является глнкопротеином ! 171 «минокнслотный остаток); у ле одна» пень связана Ь -гликозипной связью с Азп-62 (рис.
130) . Фактор некроза о)ту«олей (ТИР). ТИР вызывает ливис гыкоторн» типов опуколевмх «леток. Пн вырабатывается актиенрошнными макрофага и. Ст!юенме ТИР человека, п!ю»вляющего заметную гомологню с лимфотоксинвмн, у "гановлено н» основе ана- Лиза нуклеотидной последовательности соответстеуьхяеш гена. Лецтидгмя цепь его состоит из !57 а ннокнслотнмх остатков и синтезируется в виде нредшествениика !233 остатка!. Оба цито.
токсических факторе Реагируют с одним н тем гке Рецептором пОверхности пухоле ои клетки. Ье«и е д ж Пг ~гс ггг пг «ге чк ц .с ш иг и си гк г и, гп ж Ы ж ос и ж «» сп н 'мн желе '„" ее;с'.Ь'»! йс»спето о «голец'Ш юг» се »смен» гпогж':г'шьип йгцтц»пс и г'ьв имг»охсккхсгьпгшг нг «цпсг и!нсосчкждзжж'игш:тжхишш як гнозис сб~м ам м илш 3 ш хгжжжпгес»зълг гипсы ч с мчдеьп гг,и и и " .
г»*тг" Ыюо т' збьн С г,ч з с ег ! »,е и ~ежжго и гзги!в:зьиг«а ычм аг~гсгисге и мисс» и ицсм:Ыггжг цж мж,хеегг,",»ге»и.пег жшткгци » ььззг г х гмт»' Ь йгг. а»л цги." ц Лнмфочпксни и фактор некроза опухолей рзссматриваются как шсьма перспективные протнзорзконые препараты н в асго»- о!ее «рсмя произ одятся и испытываются бнотекнологическнми фирмами н цен рамн в ряде стран мир».
Белки систем свертывания крови и фибринолиза Короны немотно, что при порезе нли раме~ми м»кодяюая нз рвам кровь быстро »»густе»гет, свертывается, предпкраняя такмм образом оршннзм от потери кроме. Механизм свертывании крови а нвстояшсе время достаточно «ороцю изучен, главную роль в его реализацим ицмют многочисленные белки. В !Ябу . английский хирург д. Листер !!827 !9!2> обратил ~имение иа интересный факт - на бойне крива долгое врем» остается лидкой в иссеченных венах бычьих туш, нп бмстре свертывзстс», если ее перенести и стеклянный сосуц. Отсюаа бмл сделан вмаод, что свсртывани» кроен вызывается на«олями ноя в ней факторами, «оторыс актиеируются нв ст «панно» позер г ости, В то ме «рс я ею»но установлено, нос» ртынание моин» иннцннрожть ооаре:кцением сосу»о» илн добавлением в ровь каких то Бноло чесиь« рол бел оэ ю г ш) З м р ы г 6аг посторонних вещщт», например экстрактов неко орых гюней. На это оси ванн пр нят реал чать оиугреинии (собстеенныи) н «нег«ний луги саертыаэнив р «и.
Прн обычном свертывании ро«н внутренний н внешний пути дейст унл аз»имое«атанио. Э. Дэа установил перигчную с рунтуру ряда факторе схертмваннн «рози и енес знечитель ый клад а расшифровку молекулярних мехеннзмпи процесс» сэерты»ам я «рози. С бн токой т чки эрен я озер ыаание «рози н обрвзоеание сгустка представляют собой кас ад ферментэт»нык реакции„ осу)цестэляемых группой спецнальнык белков (бел о ы» факторов) В цепи поспело»люль«их превращений каждый обрэзоааншийсн фактор «ызыэает актнщцню следующего по прнициоу профср ент фер ент, так что небольшие «олнчестш того или нноп) фактора н«начальник этапах процесса зызмзиют лавинообразное усиление н» ппследующ х стадиях н, кзк резул тат, бьитрую отхетную реэицню иа тра у.
Внутренний н внешний пути саертыеания разлнчаютс» лишь ачельн ми стад имн, а затем они сли»эются» единый, оби)ии луг сеергмеоиил (рнс. 131) (Р. Ыакферлэн, 1Сбу-.!666). Внутренний путь саертмааиия «рози реализуется пр аасорбцни фер н а калликреина и месоком у рн ининогема на поврежденной поэеркносз эндотелня сноудон или н ю й- ибо ор дюй п шрхи ги (стек, ера н н др.). При запуске еиугреннгл луги фв«тор ХП (нз»естнмй также под паза»пнем фа«торп Хвгемана! расщепляется «аллнкремном. Этз расще ление псущес «ласте» двум» путями . с пбразоаан ем фак- д !и щар ай.гщи Р" тора Х!Вп т, е. «ктнанр эа нпго факт рз ХИ, или с образование фрагмен а, имеющего молекулярную массу 28 ООО. «г прый, а свою очере«ь, акти«мрует пре ращегме прекалли ранна в «илликреин.
Агпмаир манный фактор Х Иа в есте с кзллнкренном н кинино (последнии пбразуется из иысокомолекулярного кнн югегм прн дейстеии калликренна) прекращает лат'и фактор Х! (препшестаенни плаз еннпго ромбопластнна) е а«тинную фор у Х!а (плазменный тро бопластнн), последний активирует фа тор !Х (Крнстщм-фантор). КОнст ас-фа тор пилу мл сапе название по ени Озарена Кристмас« —. альчика с нарушениями э системе сэертыаанн» «роки; нз епг кроки первые был аыделен этот козий белпк.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
