И.П. Ашмарин, А.А. Каменский, Г.С. Сухова - Руководство к практическим занятия по физиологии человека и животных (1128356), страница 45
Текст из файла (страница 45)
Затем в течение нескольких ча- Часть 11. Практические задачи по патофизиологии 230 сов после окклюзии общих сонных артерий возникают насильственные движения, или пропульсии: кружения и прыжки; вращательные, клонические и тонические судорожные припадки. Появляются парезы (уменьшение силы или амплитуды произвольных движений, обусловленное нарушением иннервации соответствующих мышц) и параличи (выпадение двигательной функции в результате патологических процессов в нервной системе) конечностей, затем наступают кома (животное дышит, но не реагирует на раздражения) и в конечном итоге смерть (МсОгак, 1977).
Состояние каждого животного после перевязки сонных артерий оценивают по балльной шкале каждые ЗО мин в течение нескольких часов. Примеры таких шкал для оценки неврологического дефицита у песчанок и крыс приводятся в табл. 1 и табл. 2. По этим шкалам балльной оценки можно мониторировать состояние животных в течение нескольких суток. В процессе эксперимента оценивают также летальность.
ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ Суммарный балл неврологического состояния по каждому промежутку времени усредняют для всех животных в группе, рассчитывают стандартную ошибку среднего и строят график динамики развития неврологического дефицита, отложив по оси ординат баллы, по оси абсцисс — время. Оценку летальности проводят по гистограммам, отражающим процент выживших и умерших животных. Рекомендуемая литература Задача 2.
Исследование денервационно-реиннервационного синдрома в скелетных мышцах мыши ВВЕДЕНИЕ Денервационно-реиннервационный синдром (ДРС) — это сложный комплекс перестроек, происходящих в нерве и иннервируемых тканях-мишенях, в частности в мышцах, после пере- резки аксонов (аксотомии). ДРС развивается в два этапа. Во-пер- 1. -Гусев Е.И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга. М., 2001. 2, Одинак М.М. Михайленко А.А., Иванов Ю.С., Семин Г.Ф. Сосудистые заболевания головного мозга. СПб., 1998.
3. Саркисова К.Ю., Опитц Б., Оеме П. Влияние фрагмента субстанции Р(3-4) на течение ишемии мозга у крыс с разным типом поведения//Бюлл. эксп. биол. и мед. 1996. Т. 121, Ио 4. С. 399 — 403. 4. Оояталн К-А. Ехрег1гпеп!а! пюде1з Гог йе 1пчейща6оп о!' Ьга!и юсйепиа// Сагйочавс. Кеь. 1998. Ч. 39. Р. 10б — 120. 5. Мсбгаиг С.Р. Ехрепп1епса! сегеЬга1 !пГагс6оп енес! о!'реп!оЬагЬ1га! ш п1опяо11ап 8егЬ1!ь//Агс11. Мевго1, 1977. Ч. 34. Р. 334 — 33б.
Тема У. Патофизиология нервной системы вых, — это денервациониые изменения клетки-мишени (мышцы), нейронов и их аксонов, развивающиеся после повреждения аксонов и нарушения целостности нервно-мышечных связей (Окс, 19б9; Шеперд, 1987), во-вторых, — компенсаторные процессы, включающие процесс регенерации поврежденного аксона, его прорастание к денервированной клетке-мишени и восстановление нервно-мышечных связей, т.е.
процесс реиинервации мышцы. Изменения в нейроне после аксотомии. В месте повреждения(перерезки или раздавливаия) нерва нарушается целостность структуры аксонов. Выше места повреждения аксоны дегенерирует лишь на небольшом отрезке, тогда как ниже места повреждения происходит полный распад аксонов по всей длине дистального отрезка нерва. Зтот процесс получил название уоллеровского перерождения, или уоллеровской дегенерации аксонов. Происходит разрушение осевых цилиндров, их фрагментация и распад миелина. Скорость дегенерации аксонов зависит: 1) от уровня перерезки аксонов: чем выше место повреждения нерва (ближе к телам клеток), тем медленнее развиваются дегенерация и последующая регенерация, а также реиннервация органа-мишени,' 2) от диаметра и степени миелинизации аксонов: наиболее толстые миелинизированные волокна перерождаются быстрее, чем более тонкие и безмякотные.
Одновременно с распадом аксонов и миелина начинается пролиферация шванновских клеток, которые митотически делятся и сливаются между собой, образуя полосу многоядерного синцития — "'бюгнеровскую ленту", которая располагается в эндоневральной трубке (на месте распавшегося нервного волокна). Зтот тяж образует путь, по которому в дальнейшем, как по рельсам, будут прорастать регенерирующие аксоны (внутри эндоневральной трубки) к своим тканям-мишеням.
Перерезка нерва вызывает характерные изменения и в соме мотонейронов: увеличение объема сомы, размера ядра нейрона, активация белковых синтезов, синтеза РНК. Вскоре начинается транспорт белков и других веществ на периферию аксона, к месту повреждения. Изменения в мышечных волокнах после аксотомии. При перерезке или раздавливании нерва рзвиваются постденервационные перестройки мышечных волокон, которые во многом выглядят как возврат к ювенильному состоянию мышечного волокна, характерному для мышечных волокон на ранних стадиях их онтогенетического развития.
На протяжении нескольких суток после перерезки нерва: 1) снижается на 10 — 15 мВ уровень мембранного потенциала; 2) появляются спонтанные деполяризационные волны (медленные колебания МП) и на их фоне — спонтанные залпы ПД и характерные постденервационные фибрилляции мышечных волокон (спустя Часть И. Практические задачи по патофизиологии 232 хроматолиз нейрон утинг са а аксон раци стание шва нновская клетка мышечн волокно денервация Рис. 1. Регенерация аксона 7 суток); 3) повышаются чувствительность мембраны мышечного волокна к медиатору ацетилхолину (АХ), что обусловлено синтезом и встраиванием в мембрану денервированного мышечного волокна холинорецепторов на всей поверхности мышечого волокна. Изменяются и сократительные свойства волокон: замедляется скорость сократительного ответа в ответ на прямое и непрямое раздражение, характер тетанических сокращений.
Регенерация аксонов (рис. 1) начинается с того, что в месте повреждения нерва мембрана аксона заживляется, и образуется так называемый конус роста: аксон распластывается и расширяется на своем конце, образуя многочисленные нитевидные выросты — филоподии. Конус роста непрерывно наращивает свою поверхность за счет встраивания новых мембранных фрагментов. Регенерирующий аксон продвигается от места повреждения на периферию, используя свое бывшее ложе, заполненное шванновскими клетками, что значительно убыстряет процесс прорастания. Конус роста аксона перемещается по поверхности шванновских клеток (бюгнеровских лент), пока не достигает клеток-мишеней (мышечных волокон), с которыми вступает в контакт, образуя новые синаитические контакты.
Тем самым завершается процесс реиннервации мышцы. Скорость прорастания периферических нервов у млекопитающих составляет в среднем около 1 мм в сутки; афферентные волокна прорастают быстрее, чем двигательные. В том случае, если реиннервация мышцы не происходит в течение нескольких меся- Тема У. Патофизиология нервной системы 233 цев, денервированная мышца атрофируется, вплоть до полного распада и замены соединительной тканью.
Нейрон, аксон которого не достиг своей ткани-мишени, также обречен на гибель. В экспериментальной физиологии при изучении денервационно-реиннервационного синдрома часто используют не перерезку нерва (аксотомию), а его раздавливание (пинцетом). Такая процедура приводит к полному разрушению аксонов в месте раздавливания нерва, однако сохраняются непрерывность и целостность оболочек нерва, включая периневрий и эндоневрий.
В этих условиях процесс дегенерации дистальных отрезков аксонов происходит по обычому сценарию, а процесс регенерации убыстряется, так как сохранившиеся оболочки нерва облегчают конусам роста выбор правильного пути врастания в периферический отрезок нерва и ускоряют реиннервацию мышцы. Как правило, применяют раздавливание (пинцетом) ветвей седалищного нерва(на уровне 5 мм выше коленного сустава); это приводит к более быстрому, чем при аксотомии, протеканию денервационно-реиннервационного процесса. Так, у мышей спустя 7 — 8 суток после раздавливания нерва регенерирующие аксоны успевают заново прорасти к мышцам голени и стопы.
На 11 — 14-е сутки после раздавливания нерва наблюдается устойчивое проведение нервных импульсов по аксонам к мышцам голени и стопы, однако в этот период функциональные показатели регенерирующего нерва и реиннервированой мышцы (такие, например, как, порог, скорость проведения ПД по нерву и др.) восстановлены не полностью. Полное восстановление наступает не ранее, чем через 1 — 2 месяца после раздавливания нерва. Цель задачи. Воспроизвести в экспериментальных условиях денервационно-реиннервационный синдром скелетных мышц мыши.
Исследовать функциональное состояние регенерирующих аксонов и реиннервированных мышечных волокон на 14-е сутки после раздавливания периферического нерва. МЕТОДИКА Студенты осваивают: 1) хронические хирургические операции по раздавливанию малоберцовго нерва у мышей; 2) метод раздражения малоберцового нерва мышей т Юи с одновременной регистрацией сократительного ответа мышцы голени; 3) метод электромиографической регистрации суммарного потенциала действия мышцы голени (М-ответа) с помощью внутримышечных игольчатых биполярных элекродов.