И.П. Ашмарин, А.А. Каменский, Г.С. Сухова - Руководство к практическим занятия по физиологии человека и животных (1128356), страница 31
Текст из файла (страница 31)
Общая продолжительность операции не превышает 5 — 10 минут, при этом с открытой грудной клеткой животное находится около 30 с. Таким образом, после наложения лигатуры воз- место перевязки никает ишемический не- сосуда кроз стенки левого желу- о дочка сердца крысы. Вели- Рис. 6. Схема области наложения лигатуры на левую нисходящую коронарную артерию крысы (пояснения в тексте) левая нисходящая оронарная артерия лудочек 168 Часть 11.
Практические задачи по патофизиологии чина некроза зависит от места наложения лигатуры по отношению к верхушке и основанию сердца: чем выше накладывается лигатура, тем больше размер ишемизиронанной зоны. Локализация поражения варьирует в зависимости от хода и ветвлений перевязываемой артерии. Контрольной группе животных делают аналогичную операцию, но сосуд не перевязывают (ложная операция). Компьютерная,регисшрация ЭКГ. Современные методы автоматизированной компьютерной обработки биоэлектрических сигналов дают возможность сохранить простоту метода и одновременно значительно повысить точность ЭКГ-измерений, оперативно анализировать получаемую информацию и проводить большие объемы исследований в относительно короткие сроки.
В обеих группах животных ЗКГ регистрируют до операции по моделированию ИМ, а затем после операции, спустя 5, 10, 30 и 90 мин, а также через сутки. После последнего измерения вырезают сердце и зарисовывают зоны некротического повреждения, если таковые имеются. Регистрацию ЭКГ проводят у наркотизированных крыс, фиксированных за конечности в положении "на спине"; используют подкожные игольчатые стальные электроды. Для минимизации шумовой наводки на сигнал важно заземлить животное, замкнув его в контур заземления прибора для регистрации.
Электроды А и В располагают на правой и левой среднеподмышечных линиях у основания передних лап; С вЂ” посредине между грудной и средне- подмышечной линиями„на уровне верхушечного толчка;  — у основания задней правой лапы; Е (электрод сравнения) — у основания левой задней лапы (см. рис. 4). Выбор этих точек отведения позволяет получить пространственную трехмерную систему координат: А и В соответствуют оси 1 отведения по Зйнтховену, или оси Х; А и 0 — оси И отведения, или оси У; С вЂ” И отведению по Вильсону, или оси Х, направленной от вентральной стороны тела животного к дорсальной.
ЗКГ можно регистрировать и обрабатывать с помощью специализированной компьютерной программы для аныиза электрического сигнала сердца крысы — ВАТ12, которая была создана в Отделе медицинской техники фирмы Геолинк-электроникс (Москва, Россия). Потенциалы от животного через усилитель и АЦП с частотой оцифровки 1000 Гц подаются на компьютер 1ВМ РС-386 (или более высоких марок процессора) для дальнейшей обработки. Каждый экспериментальный файл содержит в себе 200 кардио- циклов.
По ним рассчитывают как параметры стандартных отведений ЭКГ, так и векторные характеристики. Мониторинг гемодинамических параметров. Кроме ЗКГ в двух группах животных регистрируют с помощью соответствующей ус- Тема ! !. Патофизиология сердечно-сосудистой системы 159 тановки для измерения давления гемодинамические параметры: среднее артериальное давление; частоту сердечных сокращений (через катетер, введенный в брюшную аорту); диастолическое и систолическое давление левого желудочка, его первые производ- ные +оР/М, — дР/д~, характеризующие контрактильность миокарда и конечно-диастолическое давление — минимальное давление в левом желудочке, характеризующее функциональное состояние сердца (через катетер, введенный в левый желудочек сердца). Фармакологические тесты.
1. В качестве фармакологического теста на сократительную функцию миокарда можно предложить введение бета-агониста (добутамин в дозе 4 мкг/кг в/в или изопротеренол) до операции по перевязке коронарной артерии и спустя сутки после операции. Можно ожидать снижение сократительной функции сердца у крыс с обширной зоной некроза по сравнению с контрольными животными. При этом должны меняться амплитуды зубцов ЯВ5-комплекса и соотношение площадей под их положительными и отрицательными компонентами.
2. Фармакологический тест на так называемый эффект "обкрадывания" можно провести с использованием любого периферического вазодилататора (кратковременная инфузия нитропруссида, пиридамола). В этом случае можно наблюдать увеличение негативной составляющей ДИ~-комплекса (увеличение зоны некроза) и уменьшение подъема БТ-сегмента с соответствующим снижением площади под Т-зубцом (за счет улучшения коллатерального кровотока). Имеет смысл проводить инфузию не меньше 5 мин и такой дозой вещества, чтобы давление понижалось плавно и не более чем на 20 мм рт. ст.
Результат будет более наглядным в том случае, если проводить тест с 20-й мин после перевязки коронарной артерии и до 40-й. Например, на 20-й фиксируют фоновый уровень ЭКГ-сигнала и затем проводят инфузию. Регистрируют ЗКГ на последних минутах инфузии препарата и затем последовательно каждые 5 мин до конца первого часа после перевязки сосуда. ХОД РАБОТЫ 1. Проверяют готовность к работе всех приборов, наличие и стерильность хирургических инструментов. 2. Животных взвешивают, каждую крысу индивидуально, рассчитывают и вводят внутрибрюшинно необходимое количество наркотизирующего вещества. 3. Через 5 — 10 мин, когда глубина наркоза будет достаточной (определяют по отсутствию мигательного рефлекса и боле- Часть 1!.
Практические задачи по патофизиологии 160 вой чувствительности, по расслаблению мышц брюшной стенки), приступают к записи ЭКГ. Если для выполнения задачи требуется провести мониторинг гемодинамических показателей, то до регистрации ЭКГ крысе имплантируют соответствующие катетеры и подключают их к установке для регистрации артериального давления (АД). При этом важно помнить, что после вставления катетера в левый желудочек сердца, регистрацию исходных параметров можно проводить только через 15 — 25 мин, после адаптации сердечно- сосудистой системы к нагрузке.
4. После записи фонового уровня ЭКГ и АД приступают к моделированию ИМ методом Селье (у опытного животного) и ложной операции (у контрольного). 5. Повторяют запись показателей гемодинамики и электрической активности сердца крысы через 5, 10, 30, 90 мин после перевязки сосуда. Отмечают моменты изменения формы сигнала ЭКГ, аритмии, падения давления.
Проводят выбранное фармакологическое тестирование согласно описанию. 6. Через сутки после перевязки животное наркотизируют, записывают показатели ЭКГ и АД. Для определения локализации зоны некроза миокарда через венозный катетер вводят 0,7 мл 1%-го раствора метиленового синего. Здоровый мио- Дата начала эксперимента. Крыса №, вес, пол, наркоз (тип, доза, время введения), опытная группа: ин- фаркт или ложная процедура. 1, И вЂ” отведения ЭКГ; ЧСС - частота сердечных сокращений; АД вЂ” среднее артериаль- ное давление; САД вЂ” систолическое артериальное давление; КДД вЂ” конечно- диастолическое давление.
Тема 11. Патофизиология сердечно-сосудистой системы кард окрашивается в синий цвет, а зона некроза остается светлой. Спустя 1 мин сердце иссекают и вырезают левый желудочек с межжелудочковой перегородкой. Зоны некротического повреждения зарисовывают. 7. Данные по каждому животному в ходе эксперимента обсчитывают и заносят в таблицу.
Для каждой группы животных вычисляют средние показатели и сравнивают группы между собой по всем параметрам. ' Рекомендуемая литература 1. Мурашко 8.3., Струтынский А.В. Электрокардиография. М., 1998. 2. Аринчин О.И. Эволюционное и клиническое толкование электрокардиограммы и фаз сердечного цикла. Минск, 19бб. 3. Т11е Ка1 ЕСС 111 р11аг111асо1ову а11д 1ох1со!оиру. !ЧХ., 1980. Задача 3. Экспериментальная модель сердечной недостаточности ВВЕДЕНИЕ Сердечная недостаточность — это патологическое состояние, при котором нарушается насосная функция сердца и оно не справляется с предъявляемой нагрузкой, не может перекачать в артериальную систему всю поступающую по венам кровь.
В результате повышается венозное давление, что ведет к застойным явлениям и отекам, нарушению кровообращения в органах и тканях, сопровождающемуся ишемией (недостаточность кровоснабжения) и гипоксией (кислородное голодание) и, как следствие, ухудшением их функционирования. Причиной сердечной недостаточности может быть ослабление сократительной способности самой сердечной мышцы вследствие токсико-инфекционных поражений миокарда, воспалительных процессов или ишемической болезни сердца — недостаточности коронарного кровообращения. С другой стороны, причиной сердечной недостаточности могут быть перегрузки, в частности перегрузка давлением в сосудистом русле и объемом крови в полостях сердца.
Перегрузка давлением связана со значительным увеличением сопротивления в артериальной системе, которое сердце преодолевает, выбрасывая кровь. Это может быть обусловлено стойким повышением артериального давления (гипертоническая болезнь), а также стенозом полулунных или атрио-вентрикулярных клапанов. Перегрузка обьемом связана с переполнением камер сердца избыточным объемом крови.
Так, при недостаточности митрального клапана в период систолы желудочка часть крови поступает об- 11 — 2261 Часть 11. Практические задачи по патофизиологии ратно в предсердие и затем вместе с кровью, притекающей по венам, вновь попадает в желудочек. В результате общий объем крови, притекающий в желудочек, значительно возрастает. Возникшая патология, однако, долгое время может оставаться скрытой в результате включения компенсаторных механизмов, обеспечивающих увеличение минутного объема сердца за счет возрастания силы и/или частоты сердечных сокращений.
Тем самым восстанавливаются соответствие между количеством притекающей и выбрасываемой в артериальную систему крови, а также необходимый уровень кровоснабжения органов и тканей. При этом клинические симптомы сердечной недостаточности в покое отсутствуют и выявляются лишь на фоне повышенных физических нагрузок. Комиенсаторные механизмы сердца по своему происхождению и способам реализации подразделяются на нейрогенные (внутрисердечные и экстракардиальные) и миогенные, т.