И.П. Ашмарин, А.А. Каменский, Г.С. Сухова - Руководство к практическим занятия по физиологии человека и животных (1128356), страница 29
Текст из файла (страница 29)
Эта операция была разработана П.Голдблаттом (Р.Оо10ЫаИ) в начале 30-х гг. ХХ в. Существует несколько ее модификаций, например "две почки — один зажим" (~во КЫпеуз, опе сйр) и "одна почка — один зажим" (опе КЫпеу, опе сБр). Модель "две почки — один зажим". Проводится односторонее сужение одной из почечных артерий, вторая почка остается интактной.
Наложение клипсы на почечную артерию снижает в ней кровоток и вызывает падение перфузионного давления. В результате увеличивается синтез ренина и выброс его в кровь, что приводит к увеличению содержания в крови ангиотензина 11, который запускает множество реакций, направленных на увеличение объема циркулирующей жидкости и повышение системного артериального давления. Модель "одна почка — один зажим". У крыс удаление одной почки недостаточно для развития гипертензии.
Однако при сужении артерии оставшейся почки в результате падения внутрипочечного давления помимо активации ренин-ангиотензиновой системы развивается почечная недостаточность, приводящая к задержке и накоплению в организме жидкости и ионов натрия. При увеличении объема циркулирующей крови повышается сердечный выброс и отмечается избыточная перфузия периферических органов. Для снижения кровотока в органах их артериолы сужаются и, как следствие, увеличиваются периферическое сосудистое сопротивление и артериальное давление.
Часть сосудов закрывается: сначала это обратимое функциональное закрытие, а затем наступает структурная деградация. Кроме того, при удалении одиой почки возможно снижение в плазме крови эндогенных антигипертензивных веществ: вазодилятаторных простагландинов, брадикинина, медуллипина, источником которых является почечная Часть И. Практические задачи по патофизиологии мер, для крысы весом 250 — 300 г просвет зажима должен быть равным 0,3 мм. Лигатуры, хирургические иглы и зажимы помещают в чашку Петри со спиртом.
ХОД РАБОТЫ Операцию проводят под нембуталовым наркозом (40 мг/кг, внутрибрюшинно). Наркотизированную крысу располагают на столике брюшной стороной вверх и с помощью 4 завязок фиксируют зубы, задние лапы (вместе) и передние лапы (отдельно). Пальпированием определяют расположение правой и левой почек (правая почка расположена ростральнее левой). Путем выбривания или выщипывания удаляют шерсть на поле размером 6~2,5см.
Операционное поле протирают спиртом. Скальпелем или острыми ножницами делают разрез кожи по средней линии (длиной 3 см). Затем по белой линии разрезают подлежащий слой мышц. Края разреза раздвигают ранорасширителем. На первом этапе обеспечивают доступ к левой почке. Для этого петли кишечника осторожно сдвигают вправо и фиксируют ватными тампонами. Лопаточкой сдвигают почку влево. Далее предстоит самый сложный этап операции: надо найти левую почечную артерию, отделить ее от расположенной рядом почечной вены и окружающей жировой ткани, а затем подвести под артерию лигатуру. Для этого используются глазные пинцеты и стеклянные крючки. Жировую ткань удобно счищать маленьким ватным тампоном, намотанным на глазной пинцет. Артерию приподнимают за лигатуру и надевают на нее зажим-клипсу.
Края зажима сдвигают с помощью москита, после чего лигатуру удаляют. Для модели "две почки — один зажим*' на этом операция заканчивается. Для модели "одна почка — одни зажим" на втором этапе операции удаляют правую почку. Петли кишечника над правой почкой раздвигают и фиксируют ватными тампонами (использовать чистые тампоны). Почку отделяют от окружающей жировой ткани, после чего снимают соединительнотканную капсулу (это следует делать осторожно, чтобы не повредить надпочечник). Ножку почки обводят лигатурой из толстого шелка. После завязывания лигатуры почку срезают ножницами, оставшиеся кусочки почечной ткани тщательно удаляют глазным пинцетом.
Концы лигатуры обрезают на расстоянии 2 — 3 мм от узла. У крыс контрольной групиы на левой стороне выполняют все описанные выше действия, за исключением наложения суживаю- щего зажима. При модели "одна почка — один зажим" у них также удаляют правую почку. На заключительном этапе операции очень важно своевременно удалить все ватные тампоны из брюшной иолости! Ранорасширитель удаляют, края раны сшивают'. мышцы — тонким шелком, Тема 11. Патофизиология сердечно-сосудистой системы непрерывным швом, кожу — толстым шелком, прерывистым швом. Кожный шов смазывают 3%-м спиртовым раствором йода и засыпают порошком стрептоцида. После операции крыс содержат в клетках по 6 — 8 животных. Пищу и воду животные должны получать в избытке.
Задание 2, Злектроплетизмографическое измерение артериальногодавления Материалы и оборудование. Артериальное (систолическое) давление измеряют в хвостовой артерии у бодрствующих крыс. Экспериментальная установка изображена на рис 2, А. Подогреваемый столик, плексигласовый домик для иммобилизации животного, пневматическая манжета; манометр и резиновая груша от прибора для измерения артериального давления по методу Короткова; датчик; усилитель; осциллограф С1-19Б (можно использовать и другой осциллограф, имеющий экран с послесвечением); самописец. Датчик представляет собой резиновую ("нипельную"') трубку длиной 10 см, которая заполнена графитовым порошком и с помощью проводов соединена с усилителем.
Усилитель разработан сотруд- А никами кафедры физиологии человека и животных биологического факультета МГУ Д.Н.Лапшиным и А. Установка для измерения давления крови в хвостовой артерии у бодрствующих крыс: (— подогреваемый столик; 2 — манжета, надетая на хвост крысы; 3 — буферная емкость; 4— манометр; 5 — резиновая груша; 6 — угольный датчик; 7 — усилитель; 8 — осциллограф. Б. Регистрация артериального давления на самописце: 1 — давление воздуха в буферной емкости; 2 — сигнал от усилителя (ритмические изменения окружности хвоста); 3 — отметка времени (( с) Часть !1.
Практические задачи по патофизиологии В,Б.Кошелевым (см. схему в статье: Лапшин, Кошелев, 1989). Датчик регистрирует изменение окружности хвоста при прохождении пульсовой волны (его обматывают, вокруг хвоста в 2 — 3 оборота и укрепляют с помощью мягкого зажима). После усиления сигнал от датчика подается на осциллограф. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ Пример обработки данных приведен в виде таблицы.
Данные обрабатывают статистически с помощью непараметрических кри- Дата измере- ния Измерения АД Контроль/ опыт Среднее по группе Среднее ,ц'о огге а ии 10.09.01 10.09.01 112 11О 112 опыт опыт !22 115 120 119 121 ' ! 0.09.0! 120 118 !25 117 опыт 117 10.09.01 10.09.01 115 115 конт оль конт оль 122 120 120 118 10.09,01 120 125 124 конт оль Че ез 2 недели ггосле огге аггии 25.09.01 168 168 165 170 опыт 25.09.01 150 152 152 155 опыт 164 172 170 172 175 опыт 120 125 115 120 123 25.09.01 25.09.01 конт оль конт оль -118 1!8 25.09.0! !25 122 124 125 конт оль ХОД РАБОТЫ Крысу помещают в плексигласовый домик на подогреваемом столике.
На основание хвоста надевают манжету, которую через буферную емкость соединяют с мембранным манометром и резиновой грушей. С помощью манометра измеряют давление воздуха в манжете. Дистально от манжеты располагают датчик. В манжету нагнетают воздух до прекращения кровотока в хвостовой артерии. Затем давление воздуха в манжете медленно снижают и отмечают уровень на манометре, при котором появляются пульсации сосуда. Это значение давления соответствует систолическому артериальному давлению крысы. У каждого животного измерение проводят трижды, полученные значения усредняют.
Регистрацию можно проводить и на самописце: на один канал самописца подают сигнал от тензометрического датчика, измеряющего давление в буферной емкости, а на другой — сигнал от усилителя. При этом регистрируется и частота сердечных сокращений: ее подсчитывают по записи на самописце при скорости движения ленты 10 мм/с (рис.2, Б). Тема 11. Патофизиология сердечно-сосудистой системы териев Манна-Уитни (при межгрупповом сравнении) и Вилкоксона (при сравнении значений давления одной и той же группы крыс до и после операции).
Рекомендуемая литература 1. Лапшин Д.Н., Кошелев В.Е Новая модификация непрямого метода регистрации артериального давления в хвостовой артерии у крыс//Физиол. журн. СССР им. И.М.Сеченова. 1989. Т.75. М 2. С. 282 — 286. 2. Элементы патологической физиологии и биохимии/Под ред. И.П.Ашмарина. М., 1997. С.
93 — 108. 3. Фа~ай Е.б., Лзи Е., ~оп ТЬип А., ег а7. Бпгаче11п8 йе пчуз$егу оГ бо1дЫай Ьурег~епяоп// Меам Рйуь1о1. Яс1. 1998. У.13. Р. 170 — 176. Задача 2. ЭЕГ-мониторинг экспериментального инфаркта миокарда у крыс ВВЩЕНИЕ Злектрокардиография — регистрация злектрофизиологических процессов в миокарде — позволяет неинвазивно (без хирургического вмешательства) оценивать функциональное состояние сердца и определять степень повреждения миокарда при различной патологии (ишемия, инфаркт, гипертрофия).
По злектрокардиограмме (ЗКГ) рассчитывают ряд параметров: амплитуду и продолжительность зубцов, а также длительность интервалов между ними (происхождение зубцов и интервалов ЗКГ подробно описано в Части 1: см. с. 87). Во всех отведениях Я-зубец всегда считают положительным, Д (если представлен) и 5' зубцы — всегда негативными, а зубцы (волны) Т и Р могут быть как положительными, так и отрицательными (рис. 3, А). Точку перехода комплекса ЯВЬ в сегмент ЗТ или зубец Т считают точкой соединения — 1-точкой (от английского 1опсбоп).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
