Диссертация (Антибластомная активность и безопасность 4-алкил-замещенного производного аминохромена), страница 3

Саранск).Основные положения, выносимые на защиту1. При изучении острой токсичности при внутрижелудочном введенииустановлено, что фармацевтическая субстанция АХ-554 относится к 4 классуопасности (малоопасные вещества) в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76.В соответствии с модифицированной классификацией Организации экономического содействия и развития (OECD) АХ-554 относится к VI классу токсичности (относительно безвредные вещества) при введении внутрижелудочномышам и крысам и при введении внутрибрюшинно мышам. При введениивнутрибрюшинно крысам вещество относится к V классу токсичности (практически нетоксично).2. Диапазон эффективных цитотоксических концентраций в отношенииопухолевых клеток немелкоклеточного рака легкого A549/ATCC находится впределах от 10-9 до 10-4 М, при этом средняя эффективная концентрация составляет 2х10-7 М, что сопоставимо с вычисленными эффективными дозамифармацевтической субстанции АХ-554на опухолевой модели in vivo: ЭД20 составила 21,2 мг/кг, ЭД50 составила 137,6 мг/кг, в то время как ДД90 равнялась384,0 мг/кг.3.

На гетеротопической модели сингенной опухоли мышей – карциномы легкого Lewis– курсовое 7 суточное внутрижелудочное введение 4-алкилзамещенногопроизводного2-аминохроменаАХ-554всредне-терапевтической и высшей терапевтической дозах сопровождалось формированием противоопухолевого и антиметастатического действия в виде торможения роста опухоли, уменьшения частоты метастазирования и количестваметастазов в легкие, а также увеличением продолжительности жизни животных – носителей опухоли.4.

Внутрижелудочное однократное и курсовое введение 4-алкилзамещенное производное 2-аминохромена АХ-554 является безопасным, по13скольку не сопровождается развитием аллергических реакций немедленногои замедленного типа, иммунотоксического действия, не повышает вероятность мутагенных аберраций ДНК, не оказывает отрицательного влияния нафертильную функцию самцов и самок и полученное от них потомство.Степень достоверностиРабота проводилась в соответствии с принципами надлежащей лабораторной практики.

В качестве биологического объекта для экспериментальныхисследований использованы лабораторные животные, в том числе линейные,бактериальные тест-системы, а также культуры опухолевых клеток, полученные из сертифицированных питомников, государственных банков штаммовмикроорганизмов и опухолей. Содержание, хранение, культивирование и всеманипуляции с биологическими объектами выполнялись в строгом соответствии с требованиями национального законодательства и иных регулирующих нормативно-правовых актов. Для регистрации эффектов использованыобразцы субстанции АХ-554, прошедшие аналитический контроль, и референтные противоопухолевые лекарственные средства в виде официнальныхлекарственных форм, приобретенные у официальных дистрибуторов. Репрезентативность полученных итоговых данных подтверждена достаточным количеством животным в составе опытных групп, а также использованием корректных и общепринятых методов сбора, обработки, хранения и статистического анализа информации.Апробация результатов работыАпробация результатов диссертации проведена на совместном заседании кафедр оперативной хирургии и топографической анатомии; фармацевтической технологии и фармакологии Института фармации ФГАОУ ВО Первый МГМУ им.

И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский университет), протокол №1 от 4.10.2019 г.Результаты исследований докладывались на XXVIРоссийском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2019), конгрессе «Фундаментальная наука и клиническая медицина – человек и его здоровье» XIХ14Всероссийской медико-биологической конференции молодых исследователей с международным участием (Санкт-Петербург, 2018), Всероссийскойнаучно-практической конференции с международным участием «Алмазовские чтения-2018» (Санкт-Петербург, 2018).Личный вклад автораИдея выполнения настоящей работы принадлежит М.О.

Дудиной. Автор диссертации самостоятельно сформулировала цели и задачи работы, разработала ее план и дизайн. Автор лично обобщила зарубежный и отечественный литературный материал и написала литературный обзор. Ею были поставлены эксперименты по изучению острой и хронической токсичности АХ554. Автор лично перевивала опухолевый штамм линейным мышам и работала с культурами клеток. При вовлеченном участии автора проведены опыты по изучении аллергенного и иммунотоксического действия субстанции.Автор деятельно участвовала в исследованиях мутагенности и канцерогенного потенциала АХ-554.

Ею лично изучена репродуктивная токсичность производного 2-аминохромена. Сбор, хранение, статистическая обработка первичных данных проведены лично автором работы. Автор непосредственноучаствовала в подготовке научных публикаций по материалам исследований.Публикации по теме диссертационной работыПо теме диссертационного исследования опубликовано 8 научных работ, из них: 4 статьи – в журналах, входящих в перечень ВАК при Минобрнауки России, 1 статья – в журнале, индексируемом международной системой цитирования Scopus, и 1 патент на изобретение Российской Федерации.Объём и структура работыДиссертация написана в соответствие с требованиями к рукописямдиссертационных работ, включает введение, обзор литературы, главу с описанием материалов и методов исследования, использованных в работе.

Раздел собственных результатов изложен в четырех главах. В заключении отражены перспективы дальнейшего развития темы, сформулированы выводы ипрактические рекомендации.15Диссертация изложена на 143 станицах компьютерного текста, иллюстрирована двадцатью рисунками и тридцатью пятью таблицами. Библиографический список содержит выходные данные 140 работ, из которых 15работ отечественных и 125 –зарубежных авторов.16ГЛАВА 1.ПЕРСПЕКТИВНЫЕ ПОДХОДЫ К ПОВЫШЕНИЮ ЭФФЕКТИВНОСТИПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ ХИМИОТЕРАПИИ НЕМЕЛКОКЛЕТОЧНОГО РАКА ЛЕГКОГО(ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)На протяжении последних десятилетий в мире наблюдается неуклонный рост заболеваемости онкологическими новообразованиями [1]. Рак легких среди всего спектра злокачественных опухолей обладает одним из самыхнеблагоприятных прогнозов как для выздоровления, так и для жизни пациентов.

При этом рак легких занимает первое место в структуре онкологическойсмертности у мужчин и второе место – у женщин во всем мире [2-5], в томчисле и в Российской Федерации.Рак легкого формируется в результате онкогенной альтерации ткани –эпителия респираторного тракта, в частности, бронхов, бронхиол и альвеол[6]. Множественные морфологические, молекулярные и генетические изменения влекут за собой аккумуляцию злокачественных клеток [7-9].

Рак легкого в настоящее время классифицируется на две основные категории в соответствие с гистологической характеристикой опухоли: немелкоклеточныйрак и мелкоклеточный рак легкого. В свою очередь, немелкоклеточный ракподразделяется на три подгруппы: аденокарциному, высокодифференцированный рак с ороговением и крупноклеточный рак.Немелкоклеточный рак легкого наиболее часто встречающаяся форма,составляющая не менее 80% от всех злокачественных процессов легких, приэтом аденокарцинома занимает лидирующие позиции (40% всех случаев онкологического поражения органа).

Следует отметить, что бронхоальвеолярная карцинома чаще встречается у женщин и некурящих людей. Напротив,развитие рака с ороговением чаще связано с курением [2, 10-12]. Мелкоклеточный рак имеет склонность к поражению нейроэндокринной системы и17связан с табакокурением, у некурильщиков данная форма рака диагностируется лишь в 1% случаев [2].Морфологическая верификация рака и установление его стадийностиявляются критическими моментами для постановки точного диагноза, определения стратегии лечения и прогноза [2].Выбор методов лечения определяется совокупностью следующих факторов, относящихся как к пациенту, так и к опухоли: гистологическая формарака, стадия развития опухоли, молекулярно-биологическая характеристикаопухолевых клеток, общее состояние пациента и коморбидность [13, 14].

Приэтом в спектре возможных воздействий клиницисты могут выбирать хирургические, лучевые, химиотерапевтические методы или их комбинации [15].Несмотря на то, что химиотерапевтические методы лечения чрезвычайношироко используются в онкологии, фармакологическое лечение рака легкогоимеет ряд сдерживающих факторов, ведущим среди которых является трудность создания высоких действующих концентраций препарата в легочнойткани даже введенных в высоких дозах [16].В последние годы в связи с успехами в области молекулярной биологии, генетике, иммунологии были вскрыты разнообразные молекулярные изменения - мутации и генные трансформации, отвечающие за процесс развития опухолевой ткани, и, следовательно, определяющих прогноз заболевания[17]. Фармакотерапевтические подходы, базирующиеся на определенных молекулярных механизмах развития опухоли, называются направленной, таргетной или персонализированной терапией.

Подобные химиотерапевтическиепротоколы воздействуют на конкретные биологические мишени и существенно повышают продолжительность жизни, особенно у пациентов, которымне показано хирургическое лечение [18, 19]. Химиотерапия, воздействующаяна биомишени, может быть использована для идентификации рисков в зависимости от генетической характеристики, а также позволяет воздействоватьна опухоль прицельно в определенное время и в строго определенной дозе и /или концентрации [20].18Так, идентифицирован ряд медиаторов, которые могут играть определяющую роль в лечении рака легких. Среди таких факторов особую прогностическую роль имеют рецептор эпидермального фактора роста (EGFR), эндотелиальный фактор роста сосудов (VEGF), тубулин подкласса бета-3(TUBB3), рецепторная тирозинкиназа анапластической лимфомы (ALK), идр.

[18, 21].Настоящий обзор посвящен выяснению роли указанных факторов в направленной терапии рака легкого.1.1 Ключевые направления совершенствования химиотерапии рака легкого: фармакологическое воздействие на биомишениВ настоящем обзоре обобщены результаты исследований в области молекулярной биологии и фармакологии генетических изменений, ассоциированных с процессом легочного канцерогенеза. Несколько крупных исследований уже описали роль таких молекулярных мишеней, как рецептор эпидермального фактора роста и рецепторная тирозинкиназа анапластическойлимфомы, в развитии и прогрессии рака легких, в частности, немелкоклеточного его варианта. Однако, все многообразие молекулярных маркеров онкопроцесса в органе, безусловно, не ограничивается лишь данными факторами.В последнее время показана роль эндотелиального фактора роста сосудов,BRAS, KAS, TUBB3, MET в прогрессии немелкоклеточного рака легкого[22].1.1.1 Рецептор эпидермального фактора роста (EGFR)Рецептор эпидермального фактора роста представляет собой трансмембранный гликопротеин, играющий важную роль в процессе карциногенеза[18] (рис.