Диссертация (1174241), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Изучить острую токсичность 4-алкил-замещенного производного 2аминохромена при внутрижелудочном и внутрибрюшинном введении ивлияние субтоксических доз вещества АХ-554 при курсовом внутрижелудочном введении на некоторые показатели гомеостаза лабораторных животных.2. Определить диапазон эффективных противоопухолевых доз и концентраций вещества АХ-554 в эксперименте на сингенной опухоли легкого умышей и в культуре клеток немелкоклеточного рака легкого A549/ATCC.3.
Исследовать противоопухолевую активность и антиметастатическоедействие 4-алкил-замещенного производного 2-аминохромена АХ-554 прикурсовом внутрижелудочном введении в эффективных терапевтических дозах на модели карциномы легкого Lewis.4. Изучить аллергизирующие и иммунотоксические свойства 4-алкилзамещенного производного 2-аминохромена АХ-554 при курсовом внутрижелудочном введении.5. Исследовать мутагенную безопасность АХ-554, канцерогенность 4алкил-замещенного производного 2-аминохромена, а также влияние курсового внутрижелудочного введения вещества на репродуктивную сферу животных и состояние потомства.Научная новизнаВпервые проведено комплексное экспериментальное исследованиебезопасности и противоопухолевой активности 4-алкил-замещенного производного 2-аминохромена АХ-554 в виде фармацевтической субстанции в от-8ношении солидной опухоли легкого и в культуре клеток немелкоклеточногорака легкого.При изучении острой токсичности вещества АХ-554 в виде фармацевтической субстанции для мышей и крыс обоего пола впервые показано, чтостепень интоксикации, вызванной введением вещества, носит дозозависимыйхарактер.
Основными признаками интоксикации являются выраженное угнетение двигательной активности, миорелаксация, затруднение дыхания. АХ554 относится к 4 классу опасности (малоопасные вещества) в соответствии сГОСТ 12.1.007-76.В соответствии с модифицированной классификацией Организации экономического содействия и развития (OECD) фармацевтическая субстанция АХ-554 относится к VI классу токсичности (относительнобезвредные вещества) при введении внутрижелудочно мышам и крысам ипри введении внутрибрюшинно мышам.
При введении внутрибрюшиннокрысам вещество относится к V классу токсичности (практически нетоксично). Впервые показано, что АХ-554 при однократном внутрижелудочномвведениивсредне-терапевтической,5-и10-кратнойсредне-терапевтическойдозах, вызывает снижение амплитуды зубца Т на ЭКГкрыс,снижение протромбинового индекса относительно параллельного контроля,не изменяет поведения животных и артериального давления относительнопараллельного контроля.Впервые установлено, что диапазоне доз от 21,2 до 384 мг/кг и концентраций от 10-9 до 10-4 М АХ-554 подавляет соответственно рост опухоли вмодельной системе у мышей и вызывает гибель злокачественных клеток немелкоклеточного рака легкого A549/ATCCв опытах in vitro от 20% до90%.Высшая терапевтическая доза АХ-554 превышает минимально действующую более, чем в 18 раз, что свидетельствует о большой широте терапевтического действия вещества.Установлено, что внутрижелудочное курсовое введение фармацевтической субстанции АХ-554 увеличивает продолжительность жизни животных– носителей карциномы легкого Lewis, причем в группе мышей, получавших9средне-терапевтическую дозу АХ-554 средняя продолжительность жизни составляет 53 дня, а у животных, получавших в течение 7 суток внутрижелудочно высшую терапевтическую дозу субстанции – 58 суток, что в последнем случае превышает продолжительность жизни мышей контрольной группы более, чем на 50%.Впервые установлено, что при однократном и курсовом внутрижелудочном введении АХ-554 в терапевтических и субтоксических дозах вещество не проявляет аллергенных, иммунотоксических, канцерогенных и мутагенныхсвойств.Изученное4-алкил-замещенноепроизводное2-аминохромена не оказывает негативного влияния на репродуктивную функцию самцов и самок крыс и не обладает эмбриотоксическим действием.Научно-практическая значимость работыПолучены новые данные о биологической природе и совокупностифармакологических эффектов представителей перспективного класса веществ, обладающих противоопухолевой активностью, – 4-алкил-замещенныхпроизводных 2-аминохромена, обогащающие современную науку и практику.Комплекс научных результатов о токсикологической характеристикесоединения АХ-554 в виде фармацевтической субстанции, его химиотерапевтической активности, отсутствии аллергизирующего, иммунотоксического,мутагенного, канцерогенного и эмбриотоксического эффектов, наряду сосведениями, обобщающими характер влияния АХ-554 на репродуктивнуюсферу животных при курсовом внутрижелудочном введении вещества в терапевтических и субтоксических дозах, позволяют рассматривать исследуемое производное 2-аминохромена в качестве потенциального противоопухолевого лекарственного средства для химиотерапии немелкоклеточного ракалегкого, обосновывают необходимость проведения изучения спектра терапевтической активности, механизма действия, фармакокинетики и биодоступности при внутрижелудочном введении.10Методология и методы исследованияИсследование выполнено в полном соответствии с положениями «Руководства по доклиническому изучению лекарственных средств» и включалопостановку опытов in vivo и in vitro.Острая токсичность производного аминохромена АХ-554 изучена надвух видах грызунов – мышах и крысах обоего пола – при внутрижелудочном и внутрибрюшинном введении с проведением контроля массы тела, поведенческих реакций, общего вида животных.
Расчет показателей токсичности проведен с использованием пробит-анализа методом Finney.Влияние длительного курсового внутрижелудочного введения АХ-554на экспериментальную летальность и показатели гомеостаза лабораторныхгрызунов проведено в хроническом опыте на крысах с неинвазивной регистрацией АД, ЭКГ, поведенческих реакций, показателей коагулограммы.Противоопухолевая активность АХ-554 изучена на модель сингеннойгетеротопической солидной опухолиLewis, дающей метастазы в легкие, перевитой на мышей-самцов С57Bl/6, а также на культуре немелкоклеточногорака легкого A549/ATCC, путем определения эффективных доз и концентраций АХ-554, регистрации размера опухолевого узла в динамике, количества иразмеров метастазов в легкие, выживаемости животных – носителей опухолевых систем, частоте выздоровления и ремиссий.Аллергизирующие и иммунотоксические свойства АХ-554 изучены вопытах in vivo и in vitro путем постановки реакций анафилаксии, гиперчувствительности немедленного и замедленного типов, специфического лизисалейкоцитов, НСТ-теста, определения уровня гемагглютининов и гемолизинов.Мутагенное действие АХ-554 при внутрижелудочном введении былоизучено в тесте Эймсас системной метаболической активацией и без таковойна основании сопоставления количества спонтанных и индуцированных ревертантных колоний.
В качестве тест-объекта использовали Salmonellatyphimurium – штаммы ТА 97, ТА 98 и ТА 100. Канцерогенность АХ-554 оце11нивали по способности вещества индуцировать ДНК-повреждения в паренхиматозных клетках костного мозга, печени, почек и селезенки методомДНК-комет.Влияние курсового внутрижелудочного введения терапевтических исубстоксических доз АХ-554 на репродуктивную сферу самцов и самок оценивали на основе анализа фертильности, морфологического исследованияполовых органов животных, изучения морфофункционального состояния потомства.Связь диссертации с основными научными темами СеченовскогоуниверситетаНастоящий диссертационный проект выполнен в соответствие с комплексным планом научных исследований научными и учебными подразделениями ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России(Сеченовский университет), а также при финансовой поддержке Государственного контракта от 22 ноября 2017 года № 14.N08.11.084 «Доклиническиеисследования лекарственного средства, действующего на рецепторные тирозинкиназы ALK (киназа анапластической лимфомы) и Met, Бета-тубулинкласс 3 (TUBB3), для лечения рака лёгких» (шифр темы – 2017-14-N08-0070)Федеральной целевой программы «Развитие фармацевтической и медицинской промышленности Российской Федерации на период до 2020 года идальнейшую перспективу», утвержденной постановлением ПравительстваРоссийской Федерации № 91 от 17 февраля 2011 года.Ключевыерезультатыдиссертациивнедренывнаучно-исследовательскую работу кафедры оперативной хирургии и топографической анатомии, учебный процесс и работу научного семинара кафедры фармацевтической технологии и фармакологии Института фармации ФГАОУ ВОПервый МГМУ им.
И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский университет), используются в исследовательском процессе лаборатории фармакологии и отдела химии, технологии синтетических лекарственных средств и аналитического контроля АО «ВНЦ БАВ» (г. Старая Купавна), лаборатории12фармакокинетики и таргетной фармакотерапии Центра перспективных исследований инновационных лекарственных средств ФГБОУ ВО «МГУ им.Н.П. Огарёва» (г.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
