Автореферат (Способы коррекции ранних механизмов канцерогенеза в органах репродуктивной системы), страница 8

Безопасность фармацевтическойкомпозиции на основе дииндолилметана в виде суппозиториев упациенток с CIN 1-2 (II фаза). Вестник Российского научного центрарентгенорадиологии. – 2015. – Т. 15. - № 2.23.Друх В.М., Кузнецов И.Н., Андрианова Е.А., Барановский П.М.Исследование безопасности применения препарата Цервикон-ДИМ упациенток с диагнозом CIN 1-2. Современные проблемы науки иобразования. - 2015.

- №6.24.Друх В.М., Кузнецов И.Н., Андрианова Е.А., Барановский П.М. Оценкапереносимости и безопасности новой формуляции дииндолилметана упациенток с гиперплазией эндометрия. Современные проблемы науки иобразования. - 2015. - №5.25.Киселев В.И., Пальцев М.А., Друх В.М., Муйжнек Е.Л., Кузнецов И.Н.,Андрианова Е.А., Барановский П.М. Промежуточные результатыисследования безопасности и переносимости фармацевтическойкомпозиции на основе дииндолилметана у пациенток с гиперплазиейэндометрия без атипии. ЭНИ Забайкальский медицинский вестник.

- 2015,№4, с. 50-56.26.Киселев В.И., Друх В.М., Кузнецов И.Н., Муйжнек Е.Л., Андрианова Е.А.,Андреева Ю.Ю., Аллина Д.О., Лоран О.Б., Франк Г.А. Морфологическиеизменения в ткани предстательной железы у пациентов с простатическойинтраэпителиальной неоплазией в процессе химиопрофилактики спомощью новой фармацевтической композиции дииндолилметана.Экспериментальная и клиническая урология. - 2015, №4, с. 54-58.27.Ашрафян Л.А., Сухих Г.Т., Киселев В.И., Пальцев М.А., Аполихина И.А.,Друх В.М., Кузнецов И.Н., Муйжнек Е.Л., Андрианова Е.А.

Исследованиеэффективности препарата Цервикон-ДИМ у пациенток с диагнозом CIN12 степени. Вестник Российского научного центра рентгенорадиологии. –2015. – Т. 15. - № 4.28.Киселев В.И., Друх В.М., Кузнецов И.Н. Способ лечения простатическойинтраэпителиальной неоплазии (ПИН). Патент России на изобретение №2564438. 2015. Бюл. № 27.29.Друх В.М., Кузнецов И.Н., Киселев В.И., Муйжнек Е.Л., Пчелинцева О.И.Исследование влияния новой фармацевтической композиции 3,3дииндолилметана на соотношение метаболитов 2-ОНЕ1/16α-ОНЕ1 умышей с раком эндометрия. В сборнике: Наука 21 века: новый подход47Материалы 13 молодёжной международной научно-практическойконференции студентов, аспирантов и молодых учёных. Научноиздательский центр «Открытие».

- 2015. - С. 103-106.30.Друх В.М., Кузнецов И.Н., Пчелинцева О.И. Исследованиепротивоопухолевой активности фармацевтической формуляции на основе3,3-дииндолилметана в отношении ксенографтов рака эндометрия. Всборнике: Клиническая и профилактическая медицина: опыт и новыеоткрытия. Сборник материалов международной научной конференции[Электронный ресурс].

- 2015. - С. 68-71.31.Ашрафян Л.А., Киселев В.И., Кузнецов И.Н., Муйжнек Е.Л., Друх В.М.Ранний канцерогенез, как хроническое и системное заболевание. Всборнике: Юбилейный Всероссийский Конгресс с международнымучастием «Амбулаторно-поликлиническая помощь – в эпицентреженского здоровья». Сборник тезисов. М., 2014.

- С 161.32.Пчелинцева О. И., Киселев В. И., Друх В. М., Кузнецов И. Н., Муйжнек Е.Л. Влияние новой формуляции дииндолилметана на иммунную системуживотных. В сборнике: Материалы 81-ой Всероссийской Байкальскойнаучно-практической конференции молодых ученых и студентов смеждународным участием «Актуальные вопросы современной медицины»(81-ой итоговой научно-практической конференции НОМУС им. И.И.Мечникова ИГМУ). Иркутск; 2014. - С.

282.33.Andrianova E., Paltsev M., Kiselev V., Drukh V., Muyzhnek E., Kuznetsov I.Study to Assess Safety and Tolerability of the Pharmaceutical CompositionBased on Diindolylmethane in Patients with Endometrial Hyperplasia withoutAtypia. Biology and Medicine. 2015, 7:4.34.Ashrafian L., Sukhikh G., Kiselev V., Paltsev M., Drukh V., Kuznetsov I.,Muyzhnek E., Apolikhina I., Andrianova E.

Double-blind randomized placebocontrolled multicenter clinical trial (phase IIa) on diindolylmethane’s efficacyand safety in the treatment of CIN: implications for cervical cancer prevention.The EPMA Journal 2015, 6:25.35.Paltsev M, Kiselev V, Drukh V, Muyzhnek E, Kuznetsov I, Andrianova E,Baranovskiy P. First results of the double-blind randomized placebo-controlledmulticenter clinical trial of DIM-based therapy designed as personalizedapproach to reverse prostatic intraepithelial neoplasia (PIN). The EPMA Journal2016, 7:5.36.Киселев В.И., Кузнецов И.Н., Друх В.М., Муйжнек Е.Л. Лекарственнаярегуляция активности генов.

Вопросы биологической, медицинской ифармацевтической химии. 2016. Т. 19. № 9. С. 28-35.48РЕЗЮМЕЦель работы - определение новых молекулярных маркеров и ключевых механизмовраннего канцерогенеза в органах репродуктивной системы человека и способов их коррекции.Были отобраны природные соединения, обладающие наибольшим потенциалом для созданиялекарственных средств, направленных на подавление гормонального канцерогенеза,метилирования генов-онкосупрессоров и дисбаланса ростовых факторов. При проведениитоксикологических исследований созданных на их основе прототипов лекарственных формдииндолилметана (DIM) и эпигаллокатехин 3-галлата (EGCG) установлено, что они обладаютнизкой общей и специфической токсичностью.Показано, что прототип лекарственной формы DIM в дозе 133 мг/кг через 1 месяцвоздействия у крыс снижает активность HDAC на 28%. Применение прототипа лекарственнойформы EGCG в дозе 133 мг/кг приводило к деметилированию генов RASSF1 и MLH1 после 3месяцев введения.

Прототип лекарственной формы DIM в дозе 133 мг/кг/сут в пересчете наDIM через 1 месяц воздействия у крыс с перевитыми клетками линии рака эндометрияувеличивает соотношение 2-гидроксиэстрон (2-ОНЕ1) / 16α-гидроксиэстрон (16α-ОНЕ1) вэкспериментальной группе до 3,8±0,91, тогда как в контрольной оно остается на уровне0,84±0,36.

У мышей прототип лекарственной формы DIM оказывал противоопухолевыйэффект на ксенографты рака простаты человека CRL-1740 и CRL-1435; значение торможенияроста опухоли в опытной группе по сравнению с контрольной группой составляло до 55,5% и69,3% соответственно. Показано, что он также подавляет туморогенность клеток линий CRL1740 и CRL-1435 на 30-35%.Для оценки влияния препаратов на баланс факторов роста в ткани простаты у человекабыл использован метаболический предшественник DIM – индол-3-карбинол (I3C). Поднаблюдением находилось 34 пациента с простатической интраэпителиальной неоплазией,экспериментальная группа принимала индол-3-карбинол (400 мг/сут) и EGCG (160 мг/сут),контрольная - плацебо.

После 12 месяцев терапии выявлено снижение экспрессии IGF на 5,7%(p=0,004) и EGF на 11,8% (p=0,002), а также повышение уровня экспрессии TGF-b на 6,9%(p=0,047). При этом в группе контроля значимых изменений не было.Клиническое исследование роли метилирования генов-онкосупрессоров впредраковых процессах в шейке матки включало 102 пациентки с фоновыми заболеваниямишейки матки и CIN I-II, принимавших EGCG в дозе 180 мг/сут 6 месяцев. Уровеньметилирования определялся до лечения и через 6 месяцев после окончания терапии. Выявленозначимое снижение уровня метилирования генов HIC1, RASSF1А и N33. В исследованиевлияния EGCG на метилирование генов в эндометрии была включена 21 пациентка сразличной степенью неопластических изменений эндометрия; все они получали терапиюгестагенами или агонистами ГнРГ и дополнительно EGCG в дозировке 180 мг/сут в течение 6месяцев. Установлена выраженная тенденция к понижению частоты случаев метилированиягенов-онкосупрессоров после комбинированной терапии с использованием EGCG.Было проведено плацебо-контролируемое исследование препарата индол-3карбинола (44 пациентки с циклической масталгией на фоне доброкачественной дисплазиимолочной железы) в дозе 200 мг 2 раза в сутки.

Соотношение 2-ОНЕ1 / 16α-ОНЕ1 в моче вгруппе приема активного препарата выросло у 82% пациентов, а в контрольной только у 43%,что коррелировало с клиническим улучшением.Сформулирована гипотеза о том, что патофизиология раннего канцерогенеза ворганах репродуктивной системы заключается в комплексе молекулярно-генетическихизменений, включающих в себя гормональную гиперстимуляцию, эпигенетическую блокадугенов-онкосупрессоров и активацию протоонкогенов, а также сдвиг баланса ростовыхфакторов и цитокинов в сторону стимулирующих пролиферацию со снижением активностифакторов, подавляющих пролиферацию.49ABSTRACTThe aim of the work is to identify new molecular markers and key mechanisms of earlycarcinogenesis in the organs of the human reproductive system and the ways of their correction.Natural compounds with the greatest potential for the creation of drugs aimed at suppressinghormonal carcinogenesis, methylation of oncosuppressor genes and imbalance of growth factors wereselected.

Toxicological studies of pharmaceutical prototypes based on diindolymethane (DIM) andepigallocatechin 3-gallate (EGCG) revealed their low total and specific toxicity.It was shown that DIM pharmaceutical prototype at a dose of 133 mg / kg after 1 month ofexposure in rats reduced the activity of HDAC by 28%. The use of EGCG pharmaceutical prototypeat a dose of 133 mg/kg resulted in the demethylation of the RASSF1 and MLH1 genes after 3 monthsof administration. DIM pharmaceutical prototype at a dose of 133 mg/kg/day after 1 month ofexposure in rats with endometrial cancer xenografts, increased the ratio of 2-hydroxyestrone (2OHE1) / 16α-hydroxyestrone (16α-OHE1) in the experimental group to 3.8±0.91, while in the controlit remains at the level of 0.84±0.36. The DIM prototype had an antitumor effect on human prostatecancer xenografts CRL-1740 and CRL-1435.

The value of inhibition of tumor growth in theexperimental group as compared with the control group was up to 55.5% and 69.3%, respectively. Itwas shown that it also suppresses the tumorigenicity of the CRL-1740 and CRL-1435 cell lines by30-35%.To assess the effect of drugs on the balance of growth factors in prostate tissue, a metabolicprecursor of DIM indole-3-carbinol (I3C) was used in humans. 34 patients with prostaticintraepithelial neoplasia were enrolled, the experimental group was administered with indole-3carbinol (400 mg/day) and EGCG (160 mg/day), control group - placebo. After 12 months of therapy,a decrease in the expression of IGF by 5.7% (p=0.004) and EGF by 11.8% (p=0.002) and an increasein the expression level of TGF-b by 6.9% (p=0.047) was determined.

At the same time, there wereno significant changes in the control group.A clinical study of the role of methylation of oncosuppressor genes in precancerousprocesses in the cervix uteri included 102 patients with background diseases of the cervix and CIN III who received EGCG at a dose of 180 mg/day for 6 months. The level of methylation wasdetermined before the treatment and 6 months after the end of therapy. A significant decrease in themethylation level of the HIC1, RASSF1A and N33 genes was revealed. In the study of the EGCGeffect on the methylation of genes in the endometrium, 21 patients with various degrees of neoplasticchanges in the endometrium were included.