Диссертация (Разработка лекарственных форм нифедипина с применением твердых дисперсий), страница 8

Так напряжение сдвигавязкопластичного материала в ротационном вискозиметре, характеризующеесопротивляемостьЛФдеформациямприопределеннойскоростиассоциируется с усилиями, приложенными потребителем для равномерногонанесения МЛФ.Таким образом исследование реологических свойств МЛФ позволяютмоделироватьтехнологическиепараметры,экструзиюиудобствоприменения МЛФ [7, 12, 13, 66, 67, 71, 79, 89, 101, 113].Структурно-механические параметры изучали в соответствии стребованиями ОФС 1.2.1.0015.15 «Вязкость» на коаксиальном ротационномвискозиметре Lamy Rheology RM 200 (Франция), программное обеспечениеRheomatic.

В ходе эксперимента использовалась измерительная система:«цилиндр в цилиндре» ms din 33 и ms din 11 (объем ячейки 17 и 32 млсоответственно), предназначенных для измерения образцов различнойвязкости. Динамическую вязкость изучали по схеме «малый сдвиг-большойсдвиг-малый сдвиг» в двух диапазонах скоростей сдвига от 0 до 10 с-1 и от 0до 300 с-1. Температура исследования составляла 20°С – соответствующаяусловиям хранения.

Для прогнозирования поведения гелей в процессеприменения,структурно-механическиехарактеристикиизучалипритемпературе 37°С при малых скоростях сдвига. По результатам экспериментаполучены реограммы зависимости напряжения сдвига от градиента скоростисдвига для образцов гелей нифедипина, т.е. так называемые «петлигистерезиса»,которыепредставленыввиделинийразрушенияивосстановления. Разрушение структуры геля, описанное восходящей кривой51происходит из-за механического воздействия на систему, вследствие чегоснижается структурная вязкость.

Кривая восстановления характеризуетопределенное равновесное состояние, в котором находится система послеразрушения. По площади петли можно судить о механической устойчивостиструктурированных систем.2.2.2.1.2. Исследование агрегативной устойчивостиИсследованиеагрегативнойустойчивостиосуществлялипутемцентрифугирования исследуемых образцов гелей. Для этого исследуемыйобразец в количестве 5 мл отмеряли в центрифужные пробирки Greiner Bioone емкостью 15 мл и помещали в центрифугу Biosan LMC-3000 (Германия).Образцы центрифугировали в течение 5 мин при скорости 3000 об/мин. Приизучении композиций, исследовалась способность к выделению жидкой фазы(водыидругихкомпонентов),характеризующаясякоэффициентомкинетической стабильности, который вычисляют по формуле:Кк =, гдеКк – коэффициент кинетической стабильности;Н1 – высота слоя выделившейся фазы;Н2 – высота слоя геля.2.2.2.2.Исследованиевысвобождениянифедипинаизразработанных мазей и гелейВ оценке биофармацевтических характеристик особое место занимаетанализ высвобождения ФС из основы МЛФ.

В частности, при изученииаппликационных ЛФ применяют метод, основанный на диализе. Данныйанализ позволяет провести сравнительное изучение и выбор ВВ при созданииоснов, а также оценить эффективность ЛФ.В данной работе для изучения скорости и полноты высвобождения ФСиз разработанных МЛФ применяли метод Крувчинского - равновесныйдиализ через полупроницаемую мембрану [8, 58, 76]. В ходе эксперимента намембрану из нелакированного целлофана толщиной 40 мкм наносили52равномерным слоем навеску модельной смеси (2,0 г), при этом мембранунеподвижно фиксировали на конце полой диализной трубки. Площадьдиализной поверхности составляла 5,90±0,19 см2. Трубку с мембранойопускали на 4-5 мм в воду очищенную объемом 30 мл, используемую вкачестве диализной среды.

Температура инкубации 36±0,5 °С. В течениешести часов каждый час производили забор проб диализата в объеме 5 мл, адиализат восполняли водой очищенной до первоначального объема – 30 мл.Количественное содержание ФС в отобранной пробе определяли УФспектрофотометрией. При необходимости осуществляли разведение пробы иизмеряли поглощение (А) при соответствующей для нифедипина длиневолны – 340±2 нм. Эксперимент проводили в 3-кратном (n=3) повторении натрех навесках модельной смеси одинакового образца.

Ввиду отсутствияМЛФ нифедипина на фармацевтическом рынке, в качестве мази-сравненияиспользовали мазь нифедипина на гидрофобной основе, изготовленную постандартнойдлямалорастворимыхФСтехнологии–растираниемрассчитанного количества нифедипина с вазелином. Готовят данную мазь последующей технологии: 0,2 г нифедипина смешивают в ступке с вазелином вколичестве 99,8 г до получения однородной смеси.

Данная мазь являетсясуспензионной.2.2.2.3. Оценка внешнего вида и органолептических свойствмягких лекарственных формДанный анализ проводился на кафедре аналитической, физической иколлоидной химии Института фармации ФГАОУ ВО Первый МГМУ им.И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет). Согласно XIIIГФ, ОФС.1.4.1.0008.15 визуально определяется внешний вид мазей и гелей.Данные МЛФ должны быть однородными, мягкими по консистенциисистемами без признаков физической нестабильности (седиментации,синерезиса и агрегации частиц), а также не должны иметь прогорклогозапаха.53Также, для наиболее содержательного описания внешнего видаобразцов МЛФ проводили микроскопическое исследование.Исследование проводилось на кафедре аналитической, физической иколлоидной химии Института фармации ФГАОУ ВО Первый МГМУ им.И.М.

Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет). Исследованиепроводилось с помощью цифрового микроскопа Levenhuk D50LNG (Китай),программное обеспечение для Windows- Levenhuk ToupView придесятикратном увеличении. Микропрепарат исследуемой ЛФ готовилисогласно ОФС.1.2.1.0009.15 «Оптическая микроскопия». Для этого образцымазей и гелей наносили на предметное стекло тонким слоем и накрывалипокровным стеклом. Микрофотосъемку производили благодаря наличиюUSB-интерфейса, что позволяло подключать микроскоп к компьютеру.Результаты исследования представлены в главе 3 и 4.2.2.2.4. Определение подлинности нифедипина в МЛФИсследование проводилось на кафедре аналитической, физической иколлоидной химии Института фармации ФГАОУ ВО Первый МГМУ им.И.М.

Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет).2.2.2.4.1. Метод УФ-спектрофотометрииДля проведения данного анализа навеску исследуемого образца весом2,0 взбалтывают в 50 мл воды очищенной при 37±1оС. Затем из раствораотбирают пробу объемом 5 мл и фильтруют через шприцевые насадкиMinisart с размером пор 0,45 мкм (фильтрующий материал – нейлон).Профильтрованную пробу переносят в кварцевую кювету и проводят анализпо методике, описанной в пункте 2.2.1.3. УФ-спектры водных вытяжек мазии геля в диапазоне от 190 до 500 нм должны соответствовать похарактеристическим пикам стандарту нифедипина – максимум поглощенияпри 340±2 нм, минимум поглощения при 282±2 нм.542.2.2.4.2.Качественноеопределениенифедипинавмягкихлекарственных формахКачественная реакция на нифедипин, основана на оранжево-красномокрашивании при взаимодействии с раствором натрия гидроксида.

Для этогоисследуемый образец – навеску (2,0 г) разработанных МЛФ взбалтывают в 50мл воды очищенной при 37±1оС, фильтруют через бумажный фильтр марки«синяя лента» (ТУ 2642-001-68085491-2011). Из полученного раствораотбирают 10 мл и смешивают с 5 мл 0,1 моль/л раствора натрия гидроксида.Должнонаблюдатьсяоранжево-красноеокрашивание,доказывающееналичие нифедипина в исследуемом образце.2.2.2.5. Определение размера частиц в мягких лекарственныхформахИсследование проводилось на кафедре аналитической, физической иколлоидной химии Института фармации ФГАОУ ВО Первый МГМУ им.И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет).

Согласно XIIIГФ, ОФС.1.4.1.0008.15 Размер частиц в гелях определяли методомоптической микроскопии (ОФС.1.2.1.0009.15) по следующей методике. Вкачестве прибора использовали микроскоп биологический («Биолам 70»,Россия), оборудованный окулярным микрометром при увеличении окуляра15× и объектива 8×. Предметные стекла обрабатывали следующим образом:на середину стекла наносили квадрат (≈15 мм) и диагонали, окрашенныекарандашом. Навеску геля (≈0,05 г) помещали на необработанную сторонустекла, затем пробу накрывали покровным стеклом и просматривали в 4полях зрения участков, образованных диагоналями квадрата. Визуально недолжны наблюдаться частицы, размер которых превышает 100 мкм. Дляодной ЛФ проводится определение 5 проб.2.2.2.6.

Количественное определение нифедипина в мазях и геляхДанный анализ проводился на кафедре аналитической, физической иколлоидной химии Института фармации ФГАОУ ВО Первый МГМУ им.55И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет) методом УФспектрофотометрии. Для этого готовят испытуемый раствор и растворстандартного образца (СО) нифедипина.

Для приготовления испытуемогораствора, навеску МЛФ (2,00 г) взбалтывают в течение 5 мин в 50 мл водыочищенной при 37±1оС. Раствор СО нифедипина готовят следующимобразом: Около 0,05 г (точная навеска) нифедипина (ФС.2.1.0029.15)помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 500 мл воды,нагревают на водяной бане до полного растворения, доводят объем раствораводой до метки и перемешивают.Из полученных растворов отбирают пробы объемом 5 мл и подвергаютих фильтрации через фильтр типа «Миллипор» с диаметром пор 0,45 мкм(фильтрующий материал – нейлон). Измеряют поглощение испытуемогораствора и раствора СО на УФ-спектрофотометре в максимуме поглощенияпри длине волны 340±2 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.В качестве раствора сравнения используют воду очищенную.Содержание нифедипина в геле в процентах вычисляют по формуле:А – поглощение испытуемого раствора;А0 – поглощение раствора СО нифедипина;а0 – навеска стандартного образца нифедипина, в граммах;L – номинальное содержание нифедипина в 2 граммах;Р – содержание основного вещества в СО нифедипина, в процентах.Содержание нифедипина должно быть 100,000±3,000 %.2.2.2.7.

Методика определения рН водного извлеченияИсследование проводилось на кафедре аналитической, физической иколлоидной химии Института фармации ФГАОУ ВО Первый МГМУ им.И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет).56Определяют рН водной вытяжки из МЛФ потенциометрическисогласно ОФС 1.2.1.0004.15 «Ионометрия».

К навеске изучаемого образца(2,00 г) прибавляют 50 мл воды очищенной и перемешивают навысокоскоростной мешалке (Ultra-turrax, 8000 об/мин) в течение 30 минутпри температуре 37±1оС. Полученный раствор фильтруют через бумажныйфильтр марки «синяя лента» (ТУ 2642-001-68085491-2011). В качествеприборадляпотенциометрическогоопределениярНиспользовалилабораторный иономер И-160 МИ (ООО «Измерительная техника», Россия).Калибровка приборов производится по стандартным буферным растворам,приведенным в ГФ XIII ОФС.1.3.0003.15 «Буферные растворы».