Диссертация (Разработка способа получения субстанции антимикробного действия на основе ройлеанонов из корней шалфея лекарственного), страница 2

На основе полученной субстанции антимикробного действия разработанафармацевтическая композиция антимикробного действия. Получен Патент№2596500 от 10 августа 2016 года.Основные положения, выносимые на защиту1. Результаты морфолого-анатомического исследования сырья, изучениякомпонентного состава ройлеанонов в корнях шалфея лекарственного исравнительной оценки их антимикробной активности.2.

Технологическая схема получения субстанции антимикробного действияРойлевин из корней шалфея лекарственного на основе наиболее активногоройлеанона – горминона ЛР 04868244-01-2016.3. Результатыисследованияхимическогосоставапентациклическихтритерпенов, сопутствующих горминону в субстанции антимикробногодействия Ройлевин.4. Результатыопределенияпараметровстандартизациисубстанцииантимикробного действия Ройлевин (проект ФС), промежуточныхпродуктов технологического процесса получения субстанции Ройлевин(№М-04868244-52-2016) и стандартного образца горминона (ТУ 9369-18804868244-2015).МетодологияпостроенаиметодынаанализеиисследованияМетодологияобобщениилитературныхданныхисследованияпоизучениюботанических характеристик корней шалфея лекарственного, химическихсвойств, медико-биологических характеристик, распространения ройлеанонов вприродеивключалаизучениехимическогосоставакорнейшалфея10лекарственного, изучение химического состава субстанции антимикробногодействия из корней шалфея лекарственного, изучение биологической активностисубстанции и индивидуальных веществ.

При выполнении работы былииспользованы фармакогностические, химические, инструментальные физикохимические и микробиологические методы исследования.ДостоверностьнаучныхположенийивыводовДостоверностьвыполненных исследований подтверждается точностью регистрации данных впервичнойдокументации,получениемрезультатовсиспользованиемсовременных методов анализа, а также статистической обработкой полученныхданных и сопоставлением с данными литературы.Апробация результатов исследования Основные положения работыдоложены на III и IV научно-практической конференции с международнымучастием «Молодые ученые и фармация XXI века» (г. Москва, 2015, 2016);Международнойнаучно-практическойконференции«Биологическиеособенности лекарственных и ароматических растений и их роль в медицине (г.Москва, 2016). Апробация работы прошла 30 мая 2017 года на заседании секциипоразработкеиисследованиюбиологическиактивныхвеществифитопрепаратов Ученого Совета ФГБНУ ВИЛАР.Личный вклад автора Автору принадлежит ведущая роль в определениитемы, в постановке цели и задач исследования диссертационной работы, анализеи обобщении полученных результатов.

Все экспериментальные работывыполнены лично автором. Автором разработана следующая нормативнаядокументация: проект ФС на субстанцию антимикробного действия, методикиколичественного определения горминона в сырье, промежуточных продуктахтехнологического процесса и готовой субстанции, ТУ на горминон СО. Вкладавтора является определяющий и заключается в непосредственном участии навсех этапах исследования: от постановки задач, их экспериментальнотеоретической реализации до обсуждения результатов в научных публикациях идокладах и внедрения их в практику.11ВнедрениерезультатовисследованияРезультаты,полученныедиссертантом в процессе исследования, внедрены в учебный процесс дляаспирантов ФГБНУ ВИЛАР (Акт внедрения от 02.05.2017 г.), а такжеиспользованы отделом фармацевтической технологии ФГБНУ ВИЛАР дляразработки лекарственных форм антимикробного действия.

Получен патент №2596500 «Фармацевтическая композиция антимикробного действия». Датарегистрации 10 августа 2016 года.Соответствие диссертации паспорту научной специальности Научныеположения, изложенные в данной диссертационной работе, соответствуютпаспорту специальности 14.04.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия.Результаты проведения исследования соответствуют паспорту специальностиконкретно по пунктам 2,3,6.Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтическойнауки Работа выполнена в соответствии с тематическим планом научноисследовательских работ ФГБНУ ВИЛАР с 2014 по 2017 год (№государственной регистрации 0576-2014-0009).Объем и структура диссертации Диссертационная работа изложена на 143страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы,главы, посвящённой методам и объектам исследования, четырех главэкспериментальной части, списка литературы и приложений.

В диссертациисодержатся 21 таблица, 39 рисунков. 3 схемы. Список литературы включает всебя 134 источника, из которых 78 на иностранных языках.Публикации Основное содержание диссертации опубликовано в 7 научныхработах, из них 5 статей в журналах, рекомендуемых ВАК Министерстваобразования и науки РФ, и 1 патент РФ.12ЧАСТЬ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫГлава I. СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОГО, ФИТОХИМИЧЕСКОГО ИФАРМАКОЛОГИЧЕСКОГО ИЗУЧЕНИЯ ШАЛФЕЯЛЕКАРСТВЕННОГО. РОЙЛЕАНОНЫ. ТРИТЕРПЕНОИДЫ1.1. Ботаническая характеристикаШалфей лекарственный (Salvia officinalis L.) относится к семействуяснотковые (губоцветные) (Labiatae) [8,11,13,20,27,32,35,38,50,51,54,56].Многолетний полукустарник. Стебель длинный (80-120 см), прямой,ветвистый, короткоопушенный, внизу одревесневший, четырехгранный; приоснованиисмногочисленнымигустооблиственнымивегетативнымипобегами [8,32,56].

Листья черешковые, длиной 2 – 8 см, шириной 0,8 – 2,5см, продолговатые, супротивные, морщинистые, по краю мелкогородчатые,на нижней стороне – с сильно выступающими жилками,иногда с одной илидвумя лопастями при основании пластинки, опушенные (особенно с нижнейстороны), серовато-зеленые, по окончании вегетации – серебристо-серые[11,50,56].Соцветияколосовидные,рыхлые.Цветкинакороткихцветоножках, собранные по 5-10 в расставленные ложные мутовки [8,56].Чашечка бурая, длиной 10-13 мм, двугубая, мягковолосистая, усеяннаяжелёзками, неопадающая. Венчик двугубый, опадающий, сине-фиолетовый.Тычинок 4, из них развиты 2 передние, а 2 задние редуцированы встаминодии.

Нити нормальных тычинок тонкие, в нижней части приросшие квенчику, вверху – свободные, изогнутые. Пестик с четырехгнездной,четырехлопастной верхней завязью, сидящей в округлом ложе. Столбикнитевидный, изогнутый, немного длиннее верхней губы венчика, сдвураздельным неравнолопастным рыльцем. Запах сильно ароматный. Плодсухой, распадающийсяна 4односемянныхорешка. Семена почтишаровидные, диаметром 2,4–3,1 мм, гладкие, черные или темно-бурые [8,56].Время цветения: май – июль [8,13,32,35,50,56].131.2. МестообитаниеРодина шалфея лекарственного – средиземноморские страны Европы[8,55], центр культуры – Далмация (Хорватия, Черногория) и Франция.

Внебольшом количестве растение культивируют в Северной Америке (США,Канада), в Азии (Сирия, Индия и др.) [8,13,20,27]. В России в диком виде невстречается [8,20,27,35,50,56]. Основной район возделывания СеверныйКавказ [8,38,51,54,56]. Ранее возделывался в Крыму [50,56].1.3. Химический состав шалфея лекарственного1.3.1. Надземная частьХимический состав листьев шалфея лекарственного изучен достаточнополно.

Хронологически первым объектом изучения был состав эфирногомасла, так как с ним связывалась биологическая активность.Терпеноиды.В состав эфирного масла входят в основном монотерпеноиды: туйон иизотуйон, камфора, 1,8-цинеол, борнеол. В последнее время наибольшийинтерес представляют нелетучие компоненты. Одной из основных группявляются дитерпеноиды абиетанового ряда с ароматическим кольцом С –карнозоловая кислота и ее производные[23,28]. Эта группа соединений средивсех других компонентов листьев представляет для нас наибольший интерес,так как генетически связана с действующими веществами разрабатываемогонами препарата. Из тритерпеновых соединений в надземной части шалфеялекарственного обнаружены урсоловая и олеаноловая кислоты [85].

Этагруппа веществ также является объектом нашего внимания, так кактритерпеноидыявляютсясопутствующимивеществами,идалеконеиндифферентными, в разрабатываемом нами антимикробном препарате.Фенольные соединения. Кроме названных соединений в листьяхшалфея лекарственного обнаружено большое разнообразие производных14кофейной кислоты [28,131,132]: кофейная, дигидрокофейная (мономеры),розмариновая (димер), сальвиноловая (тример), шалфейная (тетрамер)кислоты, их эфиры и другие олигомеры кофейной кислоты. Посколькубиогенез производных кофейной кислоты связан с аминокислотами[4],последние также были обнаружены в составе надземной части шалфеялекарственного [33].

В результате исследовательских работ Литвиненко исоавторов [36] из травы шалфея лекарственного были выделены флавоноиды:апигенин, лютеолин, сальвигенин. В работе А.М. Першуковой [40] отмеченоналичиев надземной части шалфея лекарственного рутина, кемпферола,астрагалина в гликозидной форме, а также фенолкарбоновых кислот:феруловой, п-кумаровой, протокатеховой. Все фенольные соединенияприсутствуют в растении обычно в гликозидной форме[95,132].Липиды. В надземной части шалфея лекарственного показано наличиетриглицеридов: линолевой, олеиновой и линоленовой кислот [12].1.3.2.

КорниДитерпеноиды.Корнишалфеякаквхимическом,такивфармакологическом аспекте начали изучаться позднее надземной части. Вкорнях также найдены абиетановые дитерпеноиды, где кольцо С имеетстроение хинона: ройлеанон I, горминон II (7-гидроксиройлеанон) иацетилгорминон III (7-ацетоксиройлеанон) (Рисунок 1) [5,6,23,45].Рисунок1.Структурныеацетилгорминона.формулыI-ройлеанона,II-горминона,III-15Ациклические углеводороды. В корнях шалфея лекарственногообнаружены ациклические насыщенные углеводороды типа нонакозана [44].Более подробно будут рассмотрены ройлеаноны и петнациклическиетритерпены,входящиевсоставразработаннойнамисубстанцииантимикробного действия из корней шалфея лекарственного.1.4. РойлеаноныРойлеаноны представляют собой абиетановые дитерпеноиды, вкоторых кольцо С имеет структуру п-хинона.1.4.1.

Распространение в растительном миреРойлеанонысравнительнонемногочисленнаягруппаприродныхсоединений (к настоящему времени известно 30 ройлеанонов (Таблица 1)).Распространены преимущественно среди следующих родов семействаЯснотковых: Salvia, Plectranthus, Coleus. Исключением является Inularoyleana D.C.