Диссертация (Функциональная неоднородность нейтрофилов и гормональный дисбаланс у больных системной красной волчанкой и системной склеродермией), страница 2

Исследование параметров биоцидностинейтрофилов применяется для оценки эффективности проводимого лечения встационаре. Результаты работы включены в лекционный материал и программупрактическихзанятийдляобучающихсякафедрытерапииИнститутапоследипломного образования и кафедры микробиологии с вирусологией ииммунологией ФГБОУ ВО ЯГМУ Минздрава России.Основные положения, выносимые на защиту1.При системной красной волчанке и системной склеродермиинаблюдается феномен функциональной неоднородности нейтрофилов.2.Существуетвзаимосвязьмеждупоказателямифункциональнойактивности нейтрофилов и уровнем половых гормонов в сыворотке крови упациентов с СКВ и ССД.3.Функциональная неоднородность нейтрофилов у больных с СКВ иССД коррелирует с клинико-патогенетической картиной заболевания.Степень достоверности и апробация результатовНаучные положения, описанные данные, выводы и рекомендации,сформулированные в работе, базируются на обследовании 50 больных СКВ и 28больных ССД, контрольную группу составили 25 относительно здоровых донора.Дизайн исследования включал клиническую оценку исследуемых, а такжесовременныелабораторныеисследования.Исследованиепроводилосьс10использованием хемилюминесцентного метода с добавлением люминола илюцигенина, иммуноферментного анализа.

В работе проанализированы 20специфических иммунологических параметра, которые определялись на базелаборатории ГБУЗ ЯО «Областная клиническая больница», где автор былсоисполнителем. Полученные данные были статистически обработаны влицензионной программе «Statistica 10.0» (StatSoft Inc.) с использованиемпараметрических и непараметрических методов оценки результатов. Учитываявышесказанное, можно считать, что полученные научные положения, выводы ирекомендации,сформулированныевдиссертации,являютсядостаточнообоснованными и достоверными.Диссертационная работа прошла апробацию на заседании Проблемнойкомиссии по ревматологии, кардиологии и внутренним болезням ФГБОУ ВОЯГМУ Минздрава России, совместном заседании кафедр ФГБОУ ВО ЯГМУМинздрава России по терапевтическим дисциплинам (кафедра терапии Институтапоследипломного образования, кафедра микробиологии с вирусологией ииммунологией,кафедрапропедевтикивнутреннихболезней,кафедрагоспитальной терапии с профпатологией, кафедра терапии педиатрическогофакультета, кафедра поликлинической терапии и клинической лабораторнойдиагностики с курсом ОВП ИПДО, кафедра клинической фармакологии с курсомИПДО).

Основные положения и выводы диссертации были представлены авторомна Международной научно-практической конференции «Проблемы современноймедицины: актуальные вопросы» (6 ноября 2014 г., г. Красноярск); IXНациональном Конгрессе Терапевтов (12-14 ноября 2014 г., г. Москва); VIIМеждународной научно-практической конференции «Научные перспективы XXIвека. Достижения и перспективы нового столетия» (12-13 декабря 2014 г., г.Новосибирск);IVМеждународнойнаучно-практическойконференции«Современная биология: актуальные вопросы» (27-30 декабря 2014 г., г. СанктПетербург); III Международной научно-практической конференция «Проблемымедицины в современных условиях» (11 июня 2016 г., г.

Казань); IIIМеждународной научно-практической конференции «О некоторых вопросах и11проблемах современной медицины», (11 июля 2016 г., г. Челябинск); IVМеждународной научно-практической конференции «Актуальные проблемы идостижения в медицине», (11 апреля 2017 г., г. Самара); I Терапевтическомфоруме "Мультидисциплинарный больной", I Всероссийской конференциимолодых терапевтов», (16-17 мая 2017 г., г.

Москва); XVI Всероссийском научномфоруме «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге», (5-8 июня 2017 г., г. СанктПетербург).ПубликацииПоматериаламдиссертацииопубликовано20работ,изних10оригинальных статей в рецензируемых научных изданиях, рекомендованных ВАКМинистерства образования и науки РФ для публикации материалов исследований,представляемых на соискание ученой степени кандидата медицинских наук.Личный вклад автора в проведенное исследованиеАвтором самостоятельно проведен аналитический обзор отечественной изарубежнойлитературыпоизучаемойпроблеме,составленапрограммаисследования, разработана методологическая основа, проведено обследованиепациентов (личное участие 100%).Математико-статистическая обработка проводилась с участием автора(личное участие - 85%).

Анализ, интерпретация, изложение полученных данных,формулирование выводов и практических рекомендаций выполнены автором(доля личного участия - 100%).Объем и структура диссертацииДиссертация изложена на 182 страницах машинописного текста и состоитиз введения, обзора литературы, двух глав собственных исследований,обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций и указателялитературы.

Диссертация иллюстрирована 52 таблицами и 11 рисунками.Библиографический указатель содержит 208 источников, в том числе 56отечественных и 152 иностранных.12Работа выполнена на кафедрах терапии Института последипломногообразования (зав. кафедрой – доктор медицинских наук, доцент М.В. Ильин),кожных и венерических болезней (зав. кафедрой – доктор медицинских наук,доцент Н.В. Романова), микробиологии c вирусологией и иммунологией (зав.кафедрой - Почетный работник высшего профессионального образования РФ,доктор медицинских наук, профессор В.А.

Романов) ФГБОУ ВО «Ярославскийгосударственный медицинский университет» Минздрава России (ректор –Заслуженный работник высшей школы РФ, доктор медицинских наук, профессорА.В. Павлов), на базе экстренной лаборатории, ревматологического отделения иотделения функциональной диагностики ГБУЗ ЯО «Областная клиническаябольница» (главный врач – Корнилов А.А.).13ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ1.1 Функциональная неоднородность нейтрофилов при системной краснойволчанке и системной склеродермииДиффузные болезни соединительной ткани, к которым относятся системнаякрасная волчанка и системная склеродермия, принадлежат к гетерогенной группезаболеваний с точно неустановленными причинами [62], характеризующейсягенерализованным воспалением различных органов и систем, сочетающимся сразвитием аутоиммунных и иммунокомплексных процессов и избыточнымфиброзированием.

Причиной объединения СКВ и ССД в одну группу являетсяналичиеобщихгрупповыхихарактерныхдлякаждогозаболеванияиммунологических маркеров, близкие принципы противовоспалительного ииммуносупрессивного лечения. Наличие overlap-синдромов ССД, так жепозволяет рассматривать СКВ и ССД, как заболевания с похожим патогенезом. Втоже время их клиническая картина, общие закономерности развития ивисцеральная патология до конца не изучены [5].В развитие СКВ и ССД вносят вклад клетки как адаптивного, так иврожденного иммунитета.

Со стороны адаптивной ветви преимущественнодействуют два типа клеток: В-лимфоциты и Т-лимфоциты, - оба необходимы дляразвития СКВ. В-клетки участвуют в патогенезе СКВ, продуцируя аутоантитела(анти-ДНК и анти-нуклеосомные), а также цитокины. Т-клетки запускаютактивацию В-клеток. Важную роль в патогенезе СКВ играют субпопуляции Тклеток, включая Т-хелперы 1 типа, Т-хелперы 17 и CD3+ CD4 - CD8 - «двойныенегативные» Т-хелперы. Роль врожденного иммунитета также существенна. Наранних стадиях заболевания дендритные и прочие миелоидные клетки, в томчисле и нейтрофилы, продуцируют медиаторы, например, активирующий факторВ-клеток; эти явления приводят к активации адаптивной иммунной системы.Системная активация иммунитета приводит к генерации эффекторных Т-клеток и14аутоантител, впоследствии действующих против собственных тканей и органов[144, 139, 145].При ССД активацию CD4+ Т-лимфоцитов и макрофагов рассматривают какодин из первых маркеров начала иммунного ответа, способствующего процессуфиброзирования и выработки антител.

При этом взаимодействие клетокиммунной системы происходит за счет продукции ими биологически активныхвеществ (цитокины, интерлейкины). Изучаются механизмы влияния некоторыхцитокинов, таких как интерлейкины ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6 и ИЛ-8, и молекулыCD40 - CD154 на развитие и прогрессирование склероза. Имеются сведения оновомпровоспалительномцитокинеИЛ-17,обладающимплейотропнымдействием на кератиноциты, фибробласты, нейтрофилы и Т-клетки памяти,эндотелиальные клетки, вырабатываемый субпопуляцией Т-лимфоцитов (Тхелперы 17). Приводят данные о роли других интерлейкинов (ИЛ-13, -15, -17, -18,-22) и факторах роста в патогенезе склеродермии.

Некоторые из них могутслужить индикаторами тяжести течения болезни и/или фиброза кожи, и/илисистемного воспалительного, и/или аутоиммунного процессов [44, 145].Запоследнеедесятилетиенакопленобольшоеколичестводанных,свидетельствующих о важной роли нейтрофильных гранулоцитов в развитиеаутоиммунных заболеваний [37]. Происходит изменение понимания функцийнейтрофилов в воспалительном процессе и формирование абсолютно новогопредставления как о развитии воспаления, так и о нейтрофилах - клетках смногофункциональными возможностями. Установлено, что нейтрофилы сразличной рецепторной оснащенностью отличаются по своим биологическимсвойствам.

Они способны перестраивать хроматин и секретировать про- ипротивовоспалительные цитокины; реализовывать содержимое гранулярногоаппарата;продуцироватьактивныеформыкислородаиосуществлятьмикробицидные эффекты; образовывать нейтрофильные внеклеточные ловушки[34].Функциональнаяактивностьнейтрофиловнапрямуюопределяетсяпродукцией ими активных форм кислорода, а также кислороднезависимым15метаболизмом.Кислородзависимыймеханизмнеявляетсясистемойжизнеобеспечения нейтрофила, при помощи окислительного стресса нейтрофилрешает чисто эффекторные задачи.Врезультатереспираторноговзрывавысвобождаетсязначительноеколичество активных метаболитов кислорода, включая супероксид анион (О2-),пероксидводорода(Н2О2),гипохлорит,гидроксильныйрадикал(ОН-).Уменьшение заряда молекулы на один электрон под воздействием никотинаденин-динуклеотид-фосфат (НАДФ) оксидазы приводит к образованию О2.НАДФ-оксидаза находится в фаголизосоме в активированном состоянии ипреобразует О2 в супероксид (О2-).

Потребление О2- является первым этапом всерии реакций, которые приводят к образованию токсических продуктовкислорода [17].АФК продуцируются в результате респираторного взрыва, которыйинициируется в результате активации НАДФ-оксидазы [17]. Поддержаниеоптимального уровня продукции АФК нейтрофилами важно для нормальногофункционированиявсехсистеморганизма,чтообеспечиваетсяскоординированным взаимодействием компонентов внутриклеточных сигнальныхсистем. В норме нейтрофилы находятся в состоянии покоя, а при стимуляцииобнаруживаютцитотоксическуюактивность,опосредованнуюпротеолитическими ферментами гранул и АФК.Различные провоспалительные цитокины, такие как ИЛ-1, ИЛ-6, ФНО-α,ИНФ-γ, образующиеся в очаге воспаления, активируют нейтрофилы и замедляютпроцесс запуска апоптоза клетки [135, 138].Врегуляциидеятельностинейтрофиловсуществуютиерархическиеотношения на уровне сигналов [198], рецепторов, внутриклеточных сигнальныхпутей и функциональных ответов.