Диссертация (Функциональная неоднородность нейтрофилов и гормональный дисбаланс у больных системной красной волчанкой и системной склеродермией)

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждениевысшего образования «Ярославский государственный медицинский университет»Министерства здравоохранения Российской ФедерацииНа правах рукописиДУРОСОВА Полина АлексеевнаФУНКЦИОНАЛЬНАЯ НЕОДНОРОДНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ ИГОРМОНАЛЬНЫЙ ДИСБАЛАНС У БОЛЬНЫХ СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙВОЛЧАНКОЙ И СИСТЕМНОЙ СКЛЕРОДЕРМИЕЙ14.03.09 – клиническая иммунология, аллергологияДиссертацияна соискание ученой степени кандидата медицинских наукНаучные руководители:доктор медицинских наукдоцент М.В. Ильиндоктор медицинских наукдоцент Н. В.

РомановаЯрославль – 20182ОГЛАВЛЕНИЕВВЕДЕНИЕ ...................................................................................................................... 4ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ .............................................................................. 131.1 Функциональная неоднородность нейтрофилов при системной краснойволчанке и системной склеродермии....................................................................... 131.2 Роль кислородзависимого метаболизма нейтрофилов, активных форм азота исистемного воспаления в патогенезе аутоиммунных заболеваний ......................

221.3 Роль гормонального дисбаланса в патогенезе аутоиммунных заболеваний . 291.4 Взаимосвязь функциональной активности нейтрофилов и уровня половыхгормонов ..................................................................................................................... 341.5 Возможности терапевтической коррекции нарушений функциональнойактивности нейтрофилов ........................................................................................... 37ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ .................................... 402.1 Клиническая характеристика больных ..............................................................

402.1.1 Клиническая характеристика больных системной красной волчанкой ...... 432.1.2 Клиническая характеристика больных системной склеродермией ............. 452.2 Методы исследования ......................................................................................... 472.3 Статистическая обработка данных ....................................................................

52ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ ........................... 543.1 Функциональная неоднородность нейтрофилов при системной краснойволчанке ...................................................................................................................... 543.2 Функциональная неоднородность нейтрофилов при системнойсклеродермии ............................................................................................................. 723.3 Изменение содержания эстрадиола и тестостерона в крови больныхсистемной красной волчанкой и системной склеродермией ................................

883.4 Взаимосвязь показателей кислородзависимого метаболизма нейтрофилов игормонального спектра при СКВ и ССД ................................................................. 993.5 Изменение показателей функциональной активности нейтрофилов убольных СКВ и ССД в зависимости от наступления менопаузы ....................... 1043ГЛАВА 4. ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ НЕОДНОРОДНОСТЬ НЕЙТРОФИЛОВ ИГОРМОНАЛЬНЫЙ ДИСБАЛАНС ПРИ СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКЕ ИСИСТЕМНОЙ СКЛЕРОДЕРМИИ: КЛИНИКО-ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИЕАСПЕКТЫ....................................................................................................................

108ЗАКЛЮЧЕНИЕ ........................................................................................................... 123ВЫВОДЫ ..................................................................................................................... 144ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ .....................................................................

146СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ......................................................................................... 147СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ........................................................................................... 150ПРИЛОЖЕНИЕ А ....................................................................................................... 175ПРИЛОЖЕНИЕ Б ........................................................................................................

178ПРИЛОЖЕНИЕ В ....................................................................................................... 1814ВВЕДЕНИЕАктуальность проблемыВ последние десятилетия ревматические болезни привлекают к себеповышенное внимание. По обобщенным данным Всемирной организацииздравоохранения (ВОЗ) ревматическими заболеваниями обусловлены 30%случаеввременнойнетрудоспособностии10%общейинвалидности.Статистические данные, полученные в разных странах мира, свидетельствуют обезусловном значении ревматических болезней в состоянии здоровья населения,поскольку от 16% до 23% популяции в возрасте старше 15 лет страдаютразличными заболеваниямиэтойгруппы. Большое социальное значениеопределяется не только их распространенностью, но и развитием у значительногочисла больных временной и стойкой нетрудоспособности преимущественно вмолодом возрасте.

Помимо ранней инвалидизации работающего населения исокращения продолжительности жизни, значение также имеет высокая стоимостьлечения таких пациентов [3].По всем вышеперечисленным характеристикам ревматические болезнинаходятся среди наиболее социально значимых заболеваний, оказывающихнегативное влияние не только на самого больного и его семью, но и на общество,в целом.Несмотря на относительно небольшую, в сравнении с ревматическимизаболеваниямисуставов,распространенностьсистемногопоражениясоединительной ткани (0,4 - 4%), она продолжает оставаться в центре вниманиямедицинской науки, так как до настоящего времени в лечебном арсеналеощущаетсядефицитсредств,способныхостановитьпрогрессированиепатологического процесса, что приводит к высокой летальности в данной группе[31].Эффективность борьбы с данными заболеваниям зависит от уточненияпричин и механизма развития этих заболеваний, ранней постановки диагноза,5адекватной патогенетической терапии и ее контроля, а также успешнойпрофилактики заболеваний.

К сожалению, ни одна из этих задач в настоящеевремя целиком не решена [12]. Помимо этого, и системная красная волчанка(СКВ)исистемнаясклеродермия(ССД),характеризуютсявыраженнымклиническим полиморфизмом, что затрудяет своевременную диагностику началаэтихзаболеваний.Первыесимптомыихчастосхожисомногимираспространенными внутренними болезнями.

Трудности решения этих проблемсвязаныснеопределенностьюотдельныхпатогенетическихмеханизмовуказанных заболеваний [12].Исследованияпониманиипоследнихлетдемонстрируютмолекулярно-клеточныхУстановлено,чтоосновоймеханизмовразвитиябольшойразвитияревматическихпрогрессСКВболезнейивССД.являетсяаутоиммунная воспалительная реакция. При этом в результате воспалительногопроцесса не элиминируются этиологические повреждающие факторы, которые, вбольшинстве случаев, остаются неизвестными. Кроме того, персистенцияповреждающегоагентачастосопутствуетнарушениюмеханизмов,ограничивающих интенсивность воспалительных реакций.

Что приводит кусилению и хронизации воспаления, и как следствие к дальнейшему поражениютканей, нарушению функций органов и систем организма [55].В процессе воспаления принимают участие макрофаги, нейтрофилы,лимфоциты, моноциты, тромбоциты и эндотелий сосудов. В регуляциисосудистыхбиологическииклеточныхактивныхреакцийвеществ.принимаетИзвестно,участиечтобольшоеглавнымичислоклетками,принимающими участие в развитие аутоиммунного воспаления, являютсялимфоциты. Однако в последнее время появилось много работ, доказывающихзначительную роль нейтрофилов (Нф) в патогенезе СКВ и ССД [33].Нейтрофилы составляют основную массу всех лейкоцитов, обладаютвыраженной способностью к фагоцитозу, будучи продуцентам активных формкислорода (АФК), синтезу веществ с бактерицидным действием (лизоцима,интерферона, миелопероксидазы, лактоферрина), а также медиаторов воспаления6(лейкотриенов).

Таким образом, данные клетки являются перспективнымобъектом для изучения их роли в патогенезе ревматических заболеваний.В проведенных ранее исследованиях установлено, что при активномвоспалении гиперпродукция АФК нейтрофилами сопряжена с увеличениеминтенсивности их апоптоза, что является одним из механизмов, способствующихограничениювоспалительногодоказательстванеоднородностипроцесса[56].Втожевремянейтрофиловвзависимостиимеютсяотихфункциональной активности (ФА).Оказалось, что нейтрофилы одного класс: нейтрофилы-киллеры (Нк),потенциальные фагоциты, контактируют с субстратом и интенсивно генерируютАФК,вследствиечегоинактивируются.Нейтрофилыдругогокласса:нейтрофилы-кейджеры (Нс) в меньшей мере продуцируют АФК и исключительнос целью самозащиты, не контактируют с субстратом, не инактивируются и,вероятно, выполняют в фагоцитозе вспомогательные функции, например,контролируют действие вазоактивных медиаторов и компонентов комплемента.Можно предположить, что активация нейтрофильных гранулоцитов имеетособенности, обусловленные присутствием среди них клеток двух классов [19].Помимо клеточного иммунитета при развитии системных заболеванийсоединительнойтканиопределяютсянарушениягормональногостатусапациентов.

СКВ и ССД – это заболевания поражающие в большинстве случаеженщин. Установлено, что гормоны репродукции обладают способностьюстимулировать нейтрофильный фагоцитоз и повышают окислительный потенциалкак интактных, так и активированных нейтрофилов [65].Таким образом, исследование феномена функциональной неоднородностинейтрофилов,атакжевыявлениевзаимосвязеймеждуфункциональнойактивностью нейтрофилов и концентрацией половых гормонов у больныхсистемной красной волчанкой и системной склеродермией, представляетсяактуальной проблемой.7Цель исследованияУстановить клинико-патогенетическое значение феномена функциональнойнеоднородности нейтрофилов и гормонального дисбаланса у больных системнойкрасной волчанкой и системной склеродермией.Задачи исследования1.Исследоватьнейтрофиловусостояниебольныхсистемнойкислородзависимогокраснойволчанкойметаболизмаисистемнойсклеродермией в зависимости от уровня биоцидности клеток, указывающей на ихфункциональную неоднородность.2.Выявить особенности функционирования нейтрофилов, обладающихнизким, средним и высоким уровнем кислородзависимого метаболизма, присистемной красной волчанке и системной склеродермии.3.Исследовать изменение концентрации половых гормонов в группахбольных системной красной волчанкой и системной склеродермией с различнойфункциональной активностью клеток и установить наличие взаимосвязи междуконцентрациейэстрадиола,тестостерона,коэффициентомэстрогениииинтенсивностью кислородзависимых реакций.4.Установитьклинико-патогенетическоезначениефеноменафункциональной неоднородности нейтрофилов у больных системной краснойволчанкой и системной склеродермией.5.Определить клинические и лабораторные факторы, обладающиенаибольшим влиянием на активацию нейтрофильных гранулоцитов у пациентов ссистемной красной волчанкой и системной склеродермией.Научная новизна1.Впервые продемонстрировано наличие феномена функциональнойнеоднородности нейтрофилов у больных системной красной волчанкой исистемной склеродермией.82.Впервыеисследованоизменениепоказателейбиоцидностинейтрофилов в группах с высокой, средней и низкой функциональнойактивностью клеток в зависимости от возраста пациентов, формы и длительностизаболевания, активности и характера течения патологического процесса при СКВи ССД.3.Впервые на основании комплексного исследования установленавзаимосвязь между показателями экспрессии факторов окислительного стрессанейтрофилов и концентрацией половых гормонов у больных СКВ и ССД.4.Впервые установлено клинико-патогенетическое значение феноменафункциональной неоднородности нейтрофилов при СКВ и ССД.Теоретическая и практическая значимость работы1.Полученные результаты позволяют уточнить механизмы развитиясистемной красной волчанки и системной склеродермии в связи с наличиемфеномена функциональной неоднородности нейтрофилов.2.Дифференцированноеопределениепоказателейбиоцидностинейтрофилов является эффективным лабораторным методом оценки характератечения и активности заболевания.3.Исследование показателей окислительного стресса нейтрофильныхгранулоцитов в группах с высокой, средней и низкой функциональнойактивностью клеток позволяет оценить эффективность терапии больных СКВ иССД.Соответствие паспорту научной специальностиОсновные научные положения диссертации соответствуют паспортуспециальности 14.03.09 – клиническая иммунология, аллергология, а именнообласти исследований «Фундаментальные исследования, посвященные изучениюстроения, функционирования иммунной системы и механизмов иммуннойзащиты.Изучениепатогенезаиммунозависимыхзаболеваний(иммунодефицитных состояний, аллергической и аутоиммунной патологии).9Разработка и усовершенствование методов диагностики, лечения и профилактикиаллергических и иммунопатологических процессов».Внедрение результатов в практикуМетодыисследованияпоказателейкислородзависимогометаболизманейтрофилов и продукции метаболитов оксида азота внедрены в работуревматологического отделения ГБУЗ ЯО «Областная клиническая больница»,МежкафедральнойиммунологическойлабораторииФГБОУВОЯГМУМинздрава России, что позволило усовершенствовать и расширить методыдиагностики ревматических заболеваний.