Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 78
Текст из файла (страница 78)
Апо|Ьег Пе16 ъч!|Ь аггее| ге!ечапсе |о рго|еш !плегасл!опа 1а йа| ог пю1еси!аг пюъ!е1ш8, ъчЬкЬ сошЪ!пел 1пгогша6оп аЪои| рго|еи| |1оша|пя расселил ол" ечо1и6опагу сопаегчаг!оп, ап|1 ягис|ига! сооггПпа|юп |о ргесПс| ш|егас|юп ра||егпя Рог |$!асыяопа ог" пю|1е1ш8 арргоасЬея р1еаае аее А)Л)ъеп (1999), Епг!8ЬГ е| а!. !1999), ап|1 Магсо||е е| а!. !1999). ТЬ!а сЬар|ег уосиаеа оп а пшпЬег ог Ьаяс сесЬпщиеа |Ьа| Ьаче Ва)пеь) ъчЫе ассер|апсе а||се аге ашепаЫе |о ые Ьу )пъ!!чЫиа1 !пчел|!Васога лосиаес! оп йе алибу оГ прес)Пс рго|ешя ° Вас|епаПу ехргеяе|1 81и|айюпе 5-ггапаГегаае !С5Т)-йае6 рголе!па аге иаеь) |о регуогш сПгес| |пеаялге ог" рго|е!и-рго|е)п !пгегасл!опа апд Гог ауПлп!лу рипПса|юп.
Раг ъчеалегп апа!уяа !В1ас)ъъчоог! апл! Е!аепшап 1991; Кае1ш е| а1. 1992), ш ъчЬкЬ а )аЬе1е|1 рго|еш ргоЬе !а иаеъ) |о ргоЬе !ог !пгегасг!опа ъч|й Пейпед ог ПЬгагу-епсобед рголе!па иппюЬ~1|хед оп а шегпЬгапе, ь ап о1ЬЬоос ол сопчеп|юпа1 ъчеалегп апа1уаея ТЬе С5Т риПдоъчп (Кае1ш е| а1. 1991) ь а ге!алей ГесЬпщие ш ъчЬ|сЬ еПЬег (1) а яп81е |1еПпед ш-ч!Лго-ехрге|ьъе6 рго|еш, !2) ап ип!ъпоъчп рго|е!и ргеаепг !п а роо1 оу рголе)па ш а сеП !уаале, ог !3) ап ип)ъпоъчп рго|е!и ехрге|ье|1 )гош а роо1 оу !и-ч!гго-сгапа1агеъ! с)3!ъ)Аа !а соПес|е|1 Ьу |ып|егасбоп ъчПЬ а !ияоп рго|е!и согпроае6 оу йе |а|8ес рго|еш 1ш)сел) со а С5Т шо)е|у. ТЬе сошр!ех !а йеп !ао!агед йгои8Ь лЬе Ь~п|Ппц оу йе С5Т пю!е|у |о 81и|айюпе-соир1е|1 Ьеа|Ь, уоПоъче|1 Ьу рипПса6оп.
ТЬ!а |есЬпнрле сап а1ао Ье ые|1 |о Пег!че аеш)ъ)иапл!лал!че еалппалеа ог |Ье ауПпПу ог" рго|е|п-рго|е|п ш|егас|юпя ° 1п РЬа8е ъ!)ар!ау !5пи|Ь 1985), а ПЬгагу оу ргоге)па !Валь е| а1. 1990) ог рерг!Пел !Съч!г1а е| а!. 1990; 5со|| апъ! 5пий 1990) ь ехрге|ье|1 аа !ияопа |о а лиг!асе-ъ!!ар!ауел! соа| рго|еш ог а 61- ашеп|оы РЬа8е аисЬ аа М13. Ргоге!па ехрге|ье|1 ш лЬыпаппег сап Ье ргоЬе|1 ияп8 аггаге- 8!еа япи1аг |о |Ьоае и61!лед Рог асгеешп8 сопчеп6опа! Ъас|епа1 ехргеаяоп ПЬгапеа ъч!|Ь ап6- ЬосПеа ог С5Т-гиаеь! РгоЪея ТЬе ЬТе сус!е апс! си!шпп8 ргорегл!еа оу|Ье 61ашеп|оы Ьас|епорЬа8е ГасППа|е йе Вепега|юп ог ПЬгапеь оурагбси!аг1у Ь!8Ь согпр1ехПу (ир |о 10ю )пъ!1- чЫиа1 сопл|!лиепга), |ЬегеЬу шахип|хш8 сЬапсеа оу Пп|Пп8 а поче! )п|егасбоп ог ъ!)асочег!п8 пш|а6опа |Ьа| рег|игЬ а рге|1ейпе|1 ш|егас|юп ш а шеап!п8)и1 ъчау. Рог |Ье йеогу апъ! Ргас|ке ог" агглп)лу ае!есл!оп лесЬп)с!иеа ые|! ъч!|Ь РЬа8е 6!ар!ау-Ьааеь! ауяепь, р1еаае аее ВагЪаа е| а1.
(2001) апг! йе )пуогшал!оп рапе1 оп Н!АМЕ|ЧТО1|5 РНАСЕ 015РГАЧ а| йе епъ! оу йь сЬар|ег. ° Тъчо-ЬуЬ66 ауяеша (Р!е!сЬ ап|1 5оп8 1989; СЬ|еп е| а!. 1991; )лиг|ее е| а1. 1993; Суипа е| а1. 1993; ъго)ге)с е| а1. 1993) а!ао пшшс па|ига1 ауа|е|пя ТЬеае ауЯепь и|П!хе |Ье Вепе6с роъчег оу |Ье уеааг Басс)|аготусел сегечлбае аа Ьоаг !ог апа1уяа ол" рго|е|п-ргосе|п |п|егас|юпя ТЬе гъчо- ЬуЬ|Ы ауагеш (Р!е1сЬ ап|1 5оп8 1989) аг6Пс|аПу шип!сз |Ье па|ига! Ргосе|ь ол |гапаспр6оп, Ъш!|Ппц оп оЬаегчал!опа |Ьа| |гапаспрбопа1 асг!чагога сап Ье аерагагег! |псо ъ!1асгеле ге8!опа !8.4 С)ларгег 18: Реп|его Гпгегасг)оп Тес)лпо!ое!еь соггеьропсПп8 |о Т|Ь)А-Ь!пс)!п8 |1огпашь апс! |гапьспр6опа! ас6ча|юп Пиша!пь (Вгепл ап|1 Р|аьЬпе !985; Норе ап|1 5|гиЫ !98б). 1п |Ье ьсапбаг6 лчло-ЬуЬгЫ арргоасЬ, лЬе аььос!аг!оп оЕ ап ас6ча6оп Пиша!и чч!ГЬ а Р!чА-Ь!п61п8 |1оша|п !ь гепг!егер Перепл)епг оп а Ь|ЫВ!п8 Гипс6оп ргоч!Пей Ъу пчо ш|егас6п8 ргосешь, Еиьед геьресбче)у |о |Ье )3ХА-Ь!п6!п8 Паша!и ап6 йе ас6ча|юп Йоша!и; ргобисг!че |п|егас|юп 1еас)ыо |гапьспр|юпа! ас||ча|юп оГ герог|егь лчЬоье ргобис|ь сап Ъе еая1у ьсоге|1 оп |Ье Ъаяь оЕ со1опп|е|пс геыь ог йе аЪ|1иу оЕ |Ье поле! |сап|-ас||ча|ог |о |гапьспЪе а уеаьг Пепе еььеп6а! Еог Пголч|Ь о! йе ог8ашяп.
ТЬе еаье оГ шагбри1а|юп апд Пепе|!с ро|чег оЕ уеая аПочч аььеььшепс оГ а 1аг8е пшпЪег оГ !п|егас6опь а| 1оъч соы, апд чч!|Ь ЕЬе ро|еп6а1 Еог Ь!ПЬ |ЬгоиПЬриг, аь ехеп|р!гПед ш гесеп| Вепоп|к аррП- са|юпь !е.8., р1еаье ьее Ргошопг-Пас!пе е| а1. ! 997; !)егг е| а1. 2000; Ха!Ьоил е| а1. 2000). ° 1шшипо1о8!са1 ыисПеь Ьаче 1оп8 иьел! па|игаПу Пепегасеб апПЪосПеь аь соо!ыо ргоЬе сПчегье сеПи!аг Еипс6опь !Наг!пан ап|1 Папе 1988). Соппшипоргес!р!гаг!оп — |Ье с)е|ес|юп оЕ а рго|е!и Ьу нппшпоргес|р||а|юп лч!|Ь ап апг!Ьос!у гПгес|е|1 а8а)пы а раг|пег шо!еси1е — Ьаь Ьееп пьем Гог а| )еаы Лччо |1еса|1еь (е.8., р1еаье ьее Мооп ап|1 ПахагЫеь 1983) ап|1 ргочЫеь а сПгес| ше|Ьод оЕ еыаЫ!ьЬ)п8 ргосеш аььос|абоп ш еПЬег ш н6|го ог !п ч!чо я|иа6опь.
1п рагаПе1, апл!Ьоб!еь Ьаче Ьееп с)ече1оре|1 аь соо1ыо 1осаПге ьрес!Пс рго|е|пь ш |Ье соп|ех| оГ сеПи!аг и1|гаьгплс|иге. 1г66а1 апа1уяь оЕ |Ье сеПи1аг сугоь)се!с|оп ъчПЬ ап6ЪосПеыо ас6п ГПааагЫеь апс! ХеЬег !974) дене!оре6 |п|о |Ье сиггеп| ье| оГ со1оса1|ха6оп Ыгале8!еыо аьы8п рго|е|пь члй ьиьрессе6 сопппоп Еипсбоп |о очег1аррш8 соп|раг||пеп|ь (е.8., р1еаье ьее ЪЧеЬег е| а1. 1982).
Моге гесеп| гейпешеп|ь !пс!ис)е Йиогеьсепсе геьопапсе епегцу |гапьЕег !РВЕТ), ш лч)6сЬ йе |гапьЕег оЕ епег8у Ггош ап ехсПе6 |1опог ПиогорЬоге сагпе|1 Ьу опе рго|е!и !ь лгапьЕеггед |о ап ассер|ог ПиогорЬоге сагпе6 Ьу апойег рго|еш. Аььос)агюп Ъе||чееп йе лччо рго|е!пь геялПь ш а с)иапл|Т|аЫе сЬап8е ш |Ье га6о оЕ |п|епя|у оГ йе гччо 1аЬе1е6 рго|е!и ргоЬеь, ччЬзсЬ ль а с)упапис шеаьше оГ йе|г ргохип||у члй!и а!пбп8 ог Глхеб сеП (Ас!ашь е| а!. 199!).
Опе абчапла8е оГ РКРТ !ь йас рго|ешь сап Ье шас)е Пиогеьсепс ш а чаг|е|у оЕ|чауь, еПЬег Ьу геас6оп чч!|Ь 1аЬе1ес! ап6Ьо|1у, ог сПгес| соирПп8 оЕ с!уе, ог Ьу ьуп|Ьеяь аь а Еияоп ргоге!и |чПЬ а Еопп оЕ Пгееп Пиогеьсеп| рго|еи| !СРР). ° Р!паПу, Ъ|осЬегпка1 арргоасЬеь дея8пес! |о аПои гарЫ шеаялгешеп| оЕ Ъ|псПп8 сопыап|ь ап|1 о|Ьег РЬуяса1 рагагпе|егь аььос|а|е|1 лч!|Ь рго|е|п-рго|е|п ог рго|е|п-рер|Ые ш|егас6опь 1е|1 со |Ье |1ече1орп|еп| оГ ьигЕасе р1аяпоп геьопапсе ГГог еаг1у Пеьспр|юпь оЕ йе гесЬпи)ие, р!еаье ьее Р!асе е| а1. [1985! ап|1 )опььоп е| а1. (199! !).
1п |Ь!ь арргоасЬ, опе рго|е|п |о Ъе апа!ухес! |ь ьесигед |о а Па| ьепьог сЬ|р ш а Поъч сЬашЬег, айег лчЬкЬ а ьо!и|юп соп|ашш8 а ргоьрес|!че !пгегасл!п8 раг|пег !ь раьье|1 очег |Ье Пгы рго|еш ш а соп6пиоиь Лонч. 1лПЬг |ь сПгес|е6 а| а деПпед ап81е асгоьь йе сЬ|р, апд йе геьопапсе ап8!е оЕ гейесгес! ППЬг !ь шеаьигей йе еьсаЫ!ьЬшепг оЕ а рго|е!и-ргосеш !пгегасл!оп саиьеь а сЬап8е !п ГЬ)ь апи1е. Ву са1- си1аг!п8 я|сЬ сЬап8еь очег |ипе, ел!иП!Ьг)ит Ь|псПпц сопяапгь ап|1 оп апс! оГГ га|еь сап Ье геасП1у еыипа|е|1. 1|ь ьреес! апс! Ь!ПЬ ьепя|пб|у |па1|е |Ь!ь гесЬп!с)ие ех|геше1у аягас6че Гог шапу Гоппь оЕ апа1уьеь.
ТЬе гччо-ЬуЬг!6 апс! СВТ-Гиь!оп-Ъаьес! ьсгееп!п8 арргоасЬеь с)еьсг!Ьес) !п Рго|осо!ь 1, 2, ап|1 3 аге аП ьи!|аЫе ш арр!ка6опь йа| сая а Ъгоа|1 пе|. Рог ьшсПеь а|Ыгеьып8 РЬуь!о1о8!са! ча1- Ыа6оп апг! ехр1огабоп оГ |п|егас|юпь, соиппшпоргес|РПа6оп оГ епбо8епоиь рго|е|пь !Рго|осо1 4) апд РВЕТ (Ргогосо! 5) аге с1еаг1у ргеЕеггей Рог йе гарЫ апа1уяь оЕ ргеч!оиь!у |1еПпе6 !п|егас6опь, гччо-ЬуЬп|1 ап|1 ОВТ ри1Ыоччп аььауь Ьане Гоппер ьоше я8плТлсапс иье; ьигЕасе р1аяпоп геьопапсе (Ргогосо! б) оЪчюиь1у Ьаь шисЬ росеп6а1 ро|чег. 1| !ь ипрог|ап| |о посе |Ьа| |Ье ш|ппяс па|иге оЕ раг|ки1аг рго|е!пь сПс|а|еыо ьогпе ех|еп|, лчЬкЬ сесЬш|!иеь сап Ъе цашуиПу пьем Гог апа1уяь оЕ рго|еш-рго|е|п ш|егас6опь.
Рог РГО1ОСО! 1 Тччо-пу0гМ апд Обжег Тч~о-сот ропеп1 5уМеть Ег1еа А. Со1егп!я апс! Нуа 8егеЬг!!я)г!1 Рок СЛаяе Сапсег Сепсег, РЛЕlагсе!рЛЕа, Реппяуунапса 197 т т м ояс ркотнсся согся!ят ог мссгт!Ргс стомл~яся оЕ рагба11у ог сошр1есе1у яерагаЫе Ецпсс!оп. 5!8п!Ессапс1у, йеяе пш16р1е г)оша!пя !и гпапу саяея гсо пос пеег! со Ъе рЬугбса11у ассасЬегС Ъу соча1епс Ьопбя; !пясеад, асссч!с!ея оЕ сЬе шсасс ргосеш сап Ье гергос1цсец Ъу Ъг!п8!п8 шбсч!6- ца! ссошашя спсо !псцпасе сопсасс. ТЬ!я Ьаяй ргорегсу Ьая Ьееп ехр1оссег1 ш ясгеепш8 яуясешя со гпеаяцге йе аЕЕсп!су оЕргосеш-ргосеш шсегас6опя ш нсно апг) со Ыеп6Еу поне! ргосе!и-ргосеш !псегасбопя. Ргосе!и !псегаес!опя яо ехр1оЬес1 Ьаче яраппе6 а гап8е оЕЬю1о8!са! Ецпс6опя, !пс1ц61п8 а-сошр1ешепсас!оп !П1шапп ес а!.
1967), цЬщцсс!и-ше6!асег) саг8ес!п8 Еог ргосесп де8гадагсоп (!оЬпяяоп аист 'чагяЬачя)су 1994), гесопяг!Сит!оп оЕ гергеяяог Ецпсгюп (Нц еС а!. 1990), ап6 8епега6оп оЕ а сгапяспрбопа1 ассгчасог Ьу сошЬ!шп8 Е)ХА-Ь!п6!п8 гсошаспя ъч!сЬ Сгапяспрбопа1 асбнаСюп г)ошаш Ецпебопя !Р!е16я апс1 5оп8 1989).
ТЬ)я 1аяг арргоасЬ Ьая 6ене)оре6 шСо йе Ссчо-ЬуЪгЫ яуятеш (Р18цге 18-1) ап6 Ьая Ьесоше а ягапбаг6 апс1 росчегЕц! соо1 Еог ргосеш апа1уя!я. Ая сЬе яуясепс гпасцгег1, Ес Ьая ярцп оЕЕ а яеПея оЕ яесопгс-8епега6опге1асед сесЬпо!о81ея сЬас ргопияе со 8геас!у ехрапс1 сся цс)!!су. ТЙЕО-НУВО! О Я'$ТЕМ$ ЯагФсстц Ро!сто Ттчо-ЬуЬг!6 яуясешя снеге сшба1!у дес68пег1 со Ыеп6Еу апс! еясппасе йе айшссу оЕ шсегассюпя Ъесччееп ра!гя оЕ яп81е ргосе!пя (р!е)6я апс1 5оп8 1989). Ноъчечег, Ъесацяе ссчо-ЬуЬг!6 яуясегпя сопсбяс оЕ а яцЪясап6а1 пшпЬег оЕ сошропепся !р1аяш!6я Еог Ъа!с, ргеу, апг) герогсег, ая чче1! ая !псе8гасе6 герогсегя), Ь ъчая !пЬ!а11у цпсегса)п счЬесЬег йеу сои!6 ассцгасе!у 61яс!п8ц!яЬ !псегассюпя оЕ рЬуяю!о8!са1 ге)ечагъее Егогп 1осчег-аЕВппу шсегассюпя оЕ г)цеяс!опаЫе ге!ечапсе.
АЕсег яечега! уеагя оЕ ияе Ьу йе яссеп66с сопшшшсу, апг! аЕсег сопсго1!ес1 сея!я оЕ шеаяцге6 спсегас6оп аЕВпЬу ЕЕясо)а)г ес а1. 1995), Ь Ьесагпе аррагепс йас Еог йе спа)опту оЕ Ъасс ргосеспя !)75%), а ссчо-ЬуЬгЫ арргоасЬ сои!6 Ье еЕЕеепчесу цяе6 Ьой со ясгееп ехргеясбоп ЬЬгапея Еог поче! шсегас6п8 ргосешя апг! со яшбу шсегас6опя Ъессчееп )итоснп рагспепц С~!чеп сЬ)я 6епюпясгасег) еЕЕесс!чепеяя оЕ сЬе Ъасбс сччо-ЬуЪгЫ яуясегпя (СЬ|еп ес а!. 1991; 13цгЕее ес а1. 1993; Суцг!я ес а1.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
