Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 19
Текст из файла (страница 19)
!п йе аЬьепсе ос(пс!исег, Ьаьа! ехргеыюп цепегасеь -60 гпо!еси1еь оусЬе п|опогпег о((5-ца1ассоыЫаье рег сеП тчЬеп!асЛ ь сагпес( аь а сЬгоиюьогпа1 Р' цепе, апс( ЫВЬег! ече! ычЬеп сЬе цепс Ь сагпес( оп а иш1- скору р!аьгпЫ. Весаиье |Ьь \ече1 ос Ьаьа! ехргеьяоп тау 1еас( со ргоЫеть 1(а Еасу. 1ияосс ргосе|п В ехргеььес! сЬас и сох|с со Е.
со(1, |папу!.асУ. (иьсоп ьуьсеть тассе гье о( а гпыапс 1ас1 цепс ((аср|; МицегНП! ес а1. 1908! сЬас ьупсЬеягеь аЬош сепсоЫ тоге гергеяог йап М10 суре. ТЫь очегрго|Ьлссюп ог гергеяог ьирргеяеь |Ье Ьаьа! 1ече1 о( сгапьспрсюп ос сЬе Еас орегоп |п йе аЬьепсе оу (пйкег. Пергеьяоп ос |Ье Еасоф орегоп В геПечес( Ьу шс(исегь, ьисЬ аь !РТС, |чЬ|сЬ Ьии1 со |Ье гергеыог аи|1 сасье а сопсоппасюпа! сЬапце сЬас 1о|чегь |Ье ай|шсу ос сЬе гергеьаог уог |Ье 1ас орегасог.
А сицу (п|1исе|1 си1сиге оу Е. соБ сопсашь -60000 гпо1еси1еь оу !ас7 (Зца!ассоьЫаье рег сеП. 1п ас(й6оп со ап шс(исег ьисЬ аь 1РТС, |Ье е(6с(епс ехргеяюп ос (асц гессшгеь сАМР апс! ап асс(- часог ргосе|п, САР. ТЬе сАМР-Ьоип|1 (огт о! САР Ьшс(ь сч(сЬ ЫВЬ айги(су со а ясе |п йе!ас ргопюсег (Ма!оь 1975! апс( сас|П|асеь Ь|пйпц оГ П(ь(А ро!утегаье.
Весаые САР ассып а роябче уаьЫоп, сЬВ суре о( геци1асюп ь сацед роябче сопсго1. 1п сЬе аЬьепсе о( САР, сЬе 1ече1ь ос!ас цепс ргос(исса аге гес(исес( ир со 50-(о16 (Вес(сьчс|Ь ес а1. 1972!. ТЬе асспцсу о( САР и сопсгоцес( Ьу сЬе шсгасеПи(аг!ече! ос сАМР |чЬ~сЬ гя ш сиги, геци1асе|1 Ьу йе сопсепсгасюп ог 81исоье. Сгосч|Ь оГ сець оп 81исоье ге|Ьлсеь йе шсгасеци1аг сопсепсга6оп ол' сАМР апс( ш1иЬ|сь 1пс!иссюп ос йе (ас орегоп. ° ТЬе 6|яоп ргосеш (пЬепь а пЬоьоте-Ь|пйпц ясе апс( ш|6а6оп ьелсиепсе |чЬоье е61с(епсу и ргочеп. !асЛ с(оеь пос Ьаче а раг6си1аг!у цоос( ьЬше-Ра1цагпо ьел!иепсе, апс( йе ьес(иепсеыпииейасе1у ьиггоипйпц сЬе ьсап со|1оп аге пос орПта! (ог ш|6ацоп оусгапь1асюп (Нш ес а1.
19846 сь(ечегсЬе!еьь, ш|- 15.58 СЬарсег 15л ЕхргеььГоп оГ С!опег) белел ли ЕьсЬеПсЫа соП 6абоп оЕ ргоселп ьупйеяь осеигь ербслепс!у епоиПЬ сЬас П )ь пос поппаПу а 1ппгбп8 Еаесог ш ехргеьяоп оЕ Гаем Еияоп ргосешь. ° ТЬе ГасЕ ье8плепс оЕ йе Еияоп ргоселп ьегчеь аь ап Ыеп66сасюп са8 сЬас сап Ье мел! Еог айлпву ри66- еасюп оп берЬагоье со1шппь сопсалшп8 сЬе шипоЬл!схеб шЬлЬлсог оЕ )3-8а!ассоьЫазе, р-авипорЬепу1- 6-сл-сЫо-8а1ассоьЫе Га1ьо )споъчп аь ТРЕь* ог АРТСл) Г5сеегь ес а1. 1971; ъ егш)по ес а1, 1983; П!шапп 1984).
° Рияоп со !ась ойеш югпе ргосессюп а8алпьс йе лпсгаееПи1аг ргосео!уь)ь йас )ауь ъчаьсе со гпапу Гоге)8п ргосешь ехргеььес! ш Е. со)л) Ргоъ)иеес1 оп сЬесг оъчп, йеье ргоселвь ечЫепс!у ЕоЫ лпсо сопЕоппабопь сЬас аге ьиьсер6Ые со де8габа6оп Ьу АТР-ъ)ерепъ)епс ргосеаьеь ьисЬ аь 1оп апс) г)р Гбоссеявап 1989). ТЫь Гасе 1ь рагски!аг1у сгие оГ япаП ро!урерсЫеь ьисЬ аь юпласоьсасш (1са)сига ес а1.
1977), шьи!ш ГГ)оесЫе1 ес а!. 1979), апс) !)-епссогрЫп Г8Ыпе ес а1. 1980), ъълЬеп ассасЬеъ) со !ас2 ог апойег сагпег, сЬеье ргосе)пь аге ьсаЬл! гхес1 со йе рос пс ъчЬеге йе Еияоп ргосеш сав соплргье 2098 оГ сЬе соса1 сеП ргосеш ГЕос гечлеъч, р!еаье ьее Магьсоп 198б). ° РшаПу, сЬе 1и86 сече)ь оГ ехргеялоп сЬас сап Ье аеЬлечел1 ъч)сЫ.аеЛ Еияоп ргосешз ргопюсе йе Соппасюп оГ )пьо!иЫе а88ге8асеь ог шс1ияоп Ьос)кь, ъчЫсЬ сап Ье )ьо!асес) еая!у ГМагяоп 1987).
Ноъчечег, со оЪсаш ае6че 6лыов ргосеш, йе шс!иыоп ЬогПеь вшьс Ье с!1ььо!чес) лп ьсгоп8!у с)епасиг)в8 ЬиЕЕегь, апд йе Еияоп ргосеш вшьс сЬеп Ье рипбес1 апс1 гего16ей ТЬеье ьсерь аге пос сг)ч)а1, апл1 сопсПсюпь Еог еасЬ оЕ сЬеш пшьс Ье даче)орел) ешрлНсаПу. Рог геаьопь сЬас аге пос ипс1егьсоой Гогел8п ргоселпь ассаеЬес) со сЬе сагЬоху! сегвипиь оГ 1аг2 аге иялаПу ьел)иеьсегел) шсо лпс1ияоп Ьол))еь; аввпо-сепплпа1 Еияоп ргосе)пь аге 8епегаПу ьо1иЫе апс) сап Ье еПгеес!у рипбе6 йогп сеП 1уьасеь Ьу арбшПу сЬгошасо8- гарЬу. ГПъе осЬег ехргеьяоп ьуьсешь, ГасХ Еияопь Ьаче зоше сПьас)чапса8еь.
Бгьс, ов1у а япаП Ггасбоп оС сЬе апипо асЫ геьЫиеь оГ йе Гияоп ргосешь гпау Ье!оп8 со а Еогел8в ргосеш. 5есопй со оЪсалп Ью)о81саПу ассве гпасеНа1, йе Гоге)8п ргосеш иьиаПу шшс Ье с1еачес1, елйег епхушабеаПу ог сЬешкаПу, Егогп )сь Гас2 сагНег, ТЫь е1еача8е сав Ье ассошрПьЬеь) Ъу Ьш1еПп8 а ип)с)ие с!еача8е ясе Ьесъчееп Д-Па1ассоьЫаье апг1 сЬе 6ляоп ргосе)в. Ноъчечег, 1Е йе Еиыов ргосеш )ь лпьо1ийе, с!еача8е плау Ье роьяЫе оп1у айег с)епасигасюп ог лп сЬе ргеьепсе оЕ с)епасигаллс. ТЫь Ееасше р!аееь геьсПссюпь ов сЬе суреь оЕ епхугпабс с!еача8е йас сап Ье изей ТЫгй 6-Па!аслоте)аье )ь пос а ьесгесес! Ргоселп апб саппос Ъе сгаш1осасеб асгоьь йе плегпЬгаве оЕ 6.
соП ечеп 1Е П )ь еци)ррег! ебсЬ а я8па! ьес)иепсе, ТурлсаПу, Гаел. Ыяоп ргосешь йас саггу Еипесюпа! ы8па! ьел)иепсеь Ьесоше )ашшес) ш сЬе шешЬгаве апс1 аге сохсе со сЬе сеП ГВаяЕогс1 ес а). 1979; Могепо ес а1. 1980). Реьр)се сЬеье еПьабчапса8еь, )ас_#_ 6ляопь ъчеге шеб ьиеееььЕиПу лп сЬе 1980ь со ехргея гпоге йап 50 ргосешь !п 6. со)6 Хоъчаъ)ау, Ьочлечег, )ас2 ъчои16 ргоЬаЫу пос Ье йе ьуьсепл оГ еЬо)ее. ълеесогь сопсалпш8 ргоплосегь Еог ЪассеНорЬа8е Т7 К)ъСА ро1угпегаье Ьаче 68Ьсег сгапьспрсюп сопсго! апс) сап Ппче ЫПЬег )ече!ь оГ ехргеьыоп 18сиеПег ес а1. 1990). Ро1уЫьсЫше сгася ГбписЬ ес а1.
1988) гпау поъч Ье йе Пшс еЬоке Гог ргосе)п са8ь япсе сЬеу ПепегаПу с1о пос с1еьсгоу ргосеш Еипссюв апс1 аПоъч аГ6шсу рипбсасюп со Ье сагпеб оис ипс1ег 8епс!е сове!Есюпь. Гп(огата!Гоп Раис(5 !5.59 В!те Ое 1я5ект(Ом Рсл5мсО НестОк Ое РОкесосч 0йА РкОмОтек СОмметчт5 ЙЕЕЕКЕХССЕ5 р( В аспеа Соп(а!па гпи1ир(е с!опш8 я(ев !и аП сЬгсе геайп8 Ггаспея сагЬоху! !спишь оЕ 1асХ ПнсЬег атт6 МнПег-НП1 (1983! ССН5!ис Санса!па с1ои!и8 ясех !и аП сЬгее геайп8 Йашех.
р(!К аспеа аги!ио !стиннес оЕ !асй (3Н5!ос Коепеп ес а1. (1985! сагЬоху! сеппшш оГ !ас7 ЬассепорЬа8е !.рд Соп(асиа а с!оп!п8 яте ш аП СЬгсе геайп8 Еташез. 5(ап(еу ап6 Ьна!о (1984! РЕХ аепеа 1Л'5!ас (2 сор!еа! бгау ес а!. (1982! РМК(ОО сагЪоху! !ситник !ас оЕ !асХ РАХ аепех Сетпт!по ап6 Ва56а (1984! р(!С аепеа, РСВМХ тепея В1неаспрс тет!еа, апс1 гпапу осЬел анино ссгпипот 1ас оГ и-Ега8шепс оГ В-Ва!ассоа!Пахе Онянс Ь а аонЫс инсан! о( сЬе!нс ргосиоссг нт яЬссЬ а О со А паимнои Пег за(ассстс со а Т то А станы сгнои и сЬе КСсА ро1уи стасе-Ьийи8 ысе. С сч5(нг о аи '*нр" рголюсег тЬас аПохо сгапаспртин оЕ йе!нс орегон и й» аЬспке оГ й» СЛРЛМР сотар!ех (ЕПссоон сс а!.
!975!. ТАВЕЕ 15-6 5у51егп5 Тот Ехрге551оп оГ ЕасХ Ен51оп РгоСе!па ЪНЬеп Гогет8п !35(А ь !птегсе6 шсо йе ро!ус1опсп8 ясе, а Гпяоп ргосеш Ь аупсЬеятес$ сЬас Ьах сЬе апнпо сегпнпы оГ йе ЬассепорЬа8е !. с! депе, а сепста! ае8шспс оЕ Еогес8п ргосе!и, ап6 В-Ва1ассов!Пахе ас (Ье сагЬоху1 сегпипня Ат сЬе еп6 оГ йе !асХ Вене, РАХ чессога сопсатп (1! а Ьш8е те8!оп оГ 187 Ьр епсойп8 а Ета8шепс оГ соПа8еп, (2! ап спт1оргосетп- аае Ха гесо8ппюп ясе ГоПотче6 Ъу (3! а пш16р!е с!ошп8 ясе ап6 (4! сЬе ЬассепорЬ48е Х сгапхспр6опа! сспитпасог.
Сопса!пь пш16Р1е с1оптп8 а!сеа ш аП йгее геайп8 Ггаптеа; шаг гсюп оГ Гоге!8п ГСЬ(А сп апу Статпе аЬо1ЬЬеа и-соптр1ешепсабоп; !паег- сюп тп (Ье соггесс геайп8 Егаше 8епегатеа а 1.асХ— и-Гга8шепс Гнх!оп ргосесп. Мета(и8 (1983(; Ь(ог- гапбег ес а1. ( ! 983 1; УапьсЬ-Реттон ес а1. (!985! Ртобнсс (пегасгше (тоги 5сгаса8епе ап6 Ргопте8а 15.60 С)гаргег )5: Ехргезяоп оЕ С!о|сед Сепек |п ЕксЬег(сЬ(а со1| СНАОТРОР!С АСЕ(к!ТБ 1п шо!еси!аг с!опш8, сЬаосгорк а8епь аге оке|1 сЬ|ебу со с1еягоу |Ье |Ьгее-йшепяопа! ксгиссиге оГ ргосешз. ТЬе шок| ро|чег|и( оГ сЬе сошшоп1у |ьед ргосе)п йепашгаиь аге 8иапЫш(шп ьойюсуапасе апд Виашйпшш сЫопс(е, кчЬ~сЬ соичегс пюкс ргосе(пк со а гавйош(у со(!ей ксасе (Тап(огд 1968; Сойов 1972).
ТЬе шесЬапЬш оЕ сЫк соичеьюп ь ипс!еаг, а116ои8Ь ~с кеепь со шчо1че Ь~пйп8 оГ рго8гекяче1у Вгеасег а|поипск оЕ ЕЬе 8иапЫ|шшп ка!с со сЬе ргосеш ак депасигайоп ргосее|Ь (Согс(оп 1972). ТЬе 6гкс Виашйшшп ка!с со Ъе |пей ак а йергосе(пьайоп а8епс с)ипп8 Ьо1асюп оГ И'4А |чак сЫопс1е (Сох 1968). А)сЬоиВЬ 1| Ь а ксгоп8 шЬ|Ьног оЕ ПЬопис!еаке, 8иашйшшв сЫогЫе (а)ю )спосчп ак 8иашйпе сЫопде ог апипо(оппапийпе Ьус(госЫопйе) Ь пос а роъчегси! епоиВЬ депасигапс со а1!окч ехсгасйоп оЕ |псасс КЫА Егош 6миек |Ьас аге НсЬ |и К)к(аке, ысЬ ак сЬе рапсгеак.
Сиашйп|шп ЬосЬюсуапасе (а!зо )спочги ак 8иап(йп!иш гЬойашс1е ог 8иапЫше сЫосуапасе) ь а ксгоп8ег сЬаосгор(с а8епс Ьесасье Ь сопсашк а гес)исса|и со Ъгеа)с ргосеш йЬи16де Ъоп|Ь апй росепс сасюшс ап|1 апюпк Вгоирк йас Гогш ксгоп8 Ьуйго8еп Ьопйк. ТЬе ргосейиге оГ СЬ!г8ипп ес а1. (1979), |чЫсЬ |пчо1чек !узЬ оЕ се11к Ьу 8иапЫш|- шп Ьойюсуапасе ап|1 и!ьасепспуи8асюп оЕ |Ье се11 1укасек йиоиВЬ С|С! Вгайепь (б1!к!п ес а!. 1973), Ьак Ьесоше а ксапдагй шейод Гог Ьо!асюп оГ ипйе8гайей 6ЫА.
Маге гесепс!у, ргосе|1шек Ьаче Ьееп дече1- орей сЬас сошЬ|пе 8иашйпшгп сЬ|осуапасе апй ехсгасйоп лч!|Ь рЬепо!!сЫого(огш (СЬогпсгувкЫ ап|1 ВассЫ 1987; Ршмапс апд Ноис1еЬ|пе 1990; р!саке кее СЬарсег 7, Ргососо1 1). Веса|ье сЬе и1сгасепс66л8асюп яер Ь е)(пипа|ей, пылу кагпр1ек сап Ье ргосеяед яши1|апеоик1у ас шойекс сакс. 1п а рег|еье Га|Ыоп, сЬаосгорк а8епь, кисЬ ак ВиапЫше ЬуйгосЫодде, сап а!ю Ье сией со епЬавсе |Ье гепасигайоп оГ а |1епасиге|1 ргосеш.
ТЫк ике 6п|Ь пчо ша)ог арр1каИо|ып пю1еси1аг Ь~о!о8у. Бгкс, ГЬе очегехргекяоп оЕ Гоге(8п ргосе|пк (и Ьесего!о8ось Ьокь, кисЬ аз Е'. со!л, ойеп 1еа|Ь со сЬе Гогшас!оп ос а88ге8асек оГ |Ье елргеяед ргосеш. ТЬеке ко-са11ей (вс!ияоп Ъойек аге геай1у ьо(асей Ьу 1олч-креей сеп|ПГи8айоп апй икиаИу сопк|кс оЕ а1гпокс риге ассгесюпк оЕ йевасигед !опик оГ сЬе Еоге(8п ргосеш. ТЬе шс!икюв Ьойек сап кошесипек Ье ко!иЬ|!Ьед лч!|Ь 6 хс ко1исюпк оГ Виашйпе ЬуйгосЫойде, лчЫсЬ ась Ьу йыос|айп8 сЬе а88ге8асек авй сошр!есе!у депасийп8 |Ье ргосе(п.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
