Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 18
Текст из файла (страница 18)
ТЬе геааопа сог сЫа аге с1еаг. Тоо 1сп1е ь 1споъчп аЬоис йе псесЬашяп оЕ Ео!йпд оЕ ргосеша ш 61ЕЕегепс огдав!аспа со ргеедсс ъчЫсЬ Ьоас-чессог ауасет тсдЬс Ье Ьеас Сог а ддчеп ргосесп, апъЕ Ееъч шесЬоъса аге ачадаЫе со шсгеаае сЬе ебсссепсу оЕ со!ссшд ог со ргечепс йе аддгедасюп, с!епасигасюп, апъ11ог ъ1едгассассоп оЕ Соге1дп ргосеша ехргеяед ш епч1гоптепса йас аге шспасша! со йет. 1п сЬе аЬаепсе оЕ апу сьери1 ди161пд рппсср!ея сЬе ехргеаяоп оЕ ечегу сРсъСА ог депе ргеаепса а ив!с!ие аес оЕ ргоЫепь, ъчЫсЬ спсьс Ье сю1чей етрспсаПу. де!есс!оп оЕ ап Ехргеаа!оп духсет Бче та!ог ехргемюп ауасепь Ьаче Ьееп ссече1орес! со а рошс ъчЬеге йеу аге геааосъаЫу рогсаЫе 6от опе 1аЬогасогу со апосЬег, ъчЬеге йе песеыагу согпропепь апс1 чессога аи геаг61у ачас1аЫе Погп сопппегсса1 аоигсеа ог риЫк героясопея апс1 ъчЬеге тесея сап Ье ссоситепсесс ъчссЬ споге сЬап а Ьапс11и! оЕ ргосешя ТЬе Ьоас серь сог сЬеае ауасепь аге Е.
со!6 Васд!аь тЬггдя 5ассйшотусеь се гелВае, сиИиге6 Ес ее я седя апс1 си!сшес1 тапппа1сап седя Чегу Ееъч, П апу, !аЬогасопеа Ьаче аП 6че оЕ сЬеае ауасеша пспшпд апс1 псоас шчеассдасога ъч61 Ьаче со сЬооъе атопд йе чапогь орповя ° Ехргемсоа т Е. со11. Р1еаае аее СЬарсег 15. ° Вхргегьюп т таттайап хуяетя Р!еаае аее СЬарсег 17. ° Ехргехяои т дассЬаготусеа сегечсасае.
А1йоидЬ йе гапде оЕ ачадаЫе ехргеясоп чессога ь ехсепяче ЕЕгш 19906 Ееъч Еогесдп ргосеша Ьаче Ьееп ргоссисесс сп уеаас ас!ече1а йас аге пюге сЬап пюс1еас. 5. сегеляае ь депегаПу а Еасг1у шейксепс Еассогу Еог гесотЬспапс ргосешя Ноъчечег, сЬе ехсгете!у роъчегЕи! депе6с ауасета оЕ сЬе огдашяв Ьаче Ьееп ехр!оиес1 сп съчо 'ипрогсапс ъчауя пеПЬег оЕ ъчЫсЬ геъ!иссек гпааяче очегргоъсиссюп оЕ Еогесдп ргосешя Р1гас, Ьесаиае спапу списапса оЕ 5. сегеляае сап Ье согпр!егпепсес1 Ьу ехргеяюп оЕ сЬе Ьопю!одопа гпапипадап ргосеша, уеааса гпау Ье иаесС аа Ьоаса Еог сЬе Во1асюп оЕ спапипадап сРЫАа Ьу согпр!епъепсасюп.
5есопъ1, йе роъчегди1 депес1са оЕуеая Ьаче Ъееп е!едапс!у ехрсоссеъс со ссече!ор ае1есбче ауасета Еог сЬе Во!асюп оЕ депеа йас епсоссе рапь оЕ спсегас6пд ргосеспа Ер!еаае аее СЬарсег 18, Ргососо1 1!. ° Вхргезяан т ВасПЕиа ясЬс1Вя В.
ъи6616 Ьаа а ъчеП-даче!пресс ъесгесогу ауасет, апс1 гесоспЬспапс ргосеспа сап обеп Ье сседчегесс со сЬе гпесдщп ш ЬсдЬ усе!6 ш а ао1иЫе апс1 ас6че Еопв. Ноъчечег, сЬВ ь пос песеяап!у а дгеас асЬ апсаде япсе В. зиЬссрь а!сю аесгесеа а пшпЬег оЕ ргосеааеа ъчссЬ роъчегЕи1 ъседгассассче асдиссея 1п асяс!1сюп, сЬе гапде оЕ чессога ь гасЬег 1ппссес1, апъс сЬеге аге Ееъч ехагпр1еа оЕ ргосеша сЬас сап Ье ехргеааес1 гпоге ейкъепс!у сп В. аиВЕПВ йап ш Е, со!6 ° Ехргегьсоа са си!гигеъЕ Епхесг сеИя ТЬе Ьаси!олгьь ехргеъяоп ауасеш 1а сьев со депегасе!агде сСиапс1- Пеа оЕ гесогпЬспапс ргосеша ш си!сигеъ1 пьес! седя А росев6а! асЬ"апсаде оЕ йе ауасепс ь йас ргосеспа аесгесес! Егот шаесс седа ипссегдо а Еопп оЕ согпр1ех дсусоау!асюсс.
Ноъчечег, а та!ог с!1аасСчапсаде 6 сЬас ехргеьсоп оссЬе Еогесдп ргосеш оссига ссиппд асше!у6с шЕессюп оЕ сеПа ъчсй а гесогпЬспапс Ъасисочсгиа асос1ь. Ргосеш ргоъсиссюп сЬегеЕоге оссига Еог оп!у а аЬогс регюс1 оЕ сапе апсс гесш!ь ш сеП ссеасЬ. Сопаессиессс1у, сЬеге ь а сопасапс пееъс со депегасе пеъч лгиа а!ос!ъа апъс пеъч седа Еог спЕесдоп.
Р1еаае аее йе шЕоппа6оп рапе! оп ВАСО!.ОЧ!КР5Е5 АЬСР ВАСО!.ОЧ!В05 ЕХРКЕ551О!ч 5Ч5ТЕМ5 ш СЬарсег 17. 15.5б СЬаргег 15: Ехрге|ь!оп о) С!опег) Сепел т ЕхоЬег!сЬ!а соП Е. СОЕ.Е ЕХР!хЕвв!ОМ Ьх'вТЕМв Ехрге|ьюп оЕ Еоге!8п Певек ш Ьас|епа Ьаа а!ъчауа Ьееп СЬе Е'гаП оЕ шо1еси!аг с1ошп8.
ТЬе еаг!у с!овеса ъчеге гешаг)саЫу сопППепс сЬас Е. соП сои!6 Ье герго8гашгпед со е1аЪогасе апу дел!гед ргосеш ш с)паис)- с)ек аийк|епс Еог апу с1еяге6 рыро|е. Рипп8 сЬе Нгеас ПесошЪ!паис Р)ъ)А деЬасе оЕ сЬе еаг1у 19708 сЬе |Пеа сЬас йеге пв8Ы Ье ргоЫепь )и сова|свес)п8 асса)па оЕ Е, соП йас ъчои!д |па1|е ргосеша со оМег ъчаа Ьаг|Пу циеавопей 1п Еаес, пшсЬ оЕ йе 6)асили)оп сепсеге6 агоип|1 сЬе с1е8гееа оЕ рЬуяеа1 ап|1 Ью!оббеа! сопса)пп|епс сЬас ъчов!д Ье гес)шге|1 со рюсеес сЬе ъчо|16 Егогп Ьаесепа йас ехрге|ье|1 сЬь ог йас гоге|Пи репе.
8увсЬеяа оЕ Еоге)8п ргосе!ва ш рго)сагуосеа ъча| Ееагед аа сЬе арргоаеЬсп8 ароса!урае Ьу йе Евдб)се Епп8е ап|1 ъчаа яшв1сапеов|1у ре661е6 со ъ'ъгаП 8сгеес аа ап аросЬеояа Ьу сЬе и|осе епсгергепеипа) оЕ сЬе пю1еси! аг Ью1о8ься Аа )с сигпе6 ош, ие!йег сЬе Паг)с рагапо|а пог йе Пау-81о ор6пвяп оЕ сЬоае с!шел ъчаа )и|66ей ТЬе доогпаауега ъчеге арессаси)аг1у ъчгоп8, аа сЬеу япсе Ьаче Ьееп аЬош осЬег регге|че6 Пап8ега |п гпо!еси1аг с1ошп8.
1п сЬе 20 уеаь япсе йе Ая1оп|аг соиЕегепсе, |папу сЬоыапй оЕ асса)иа оЕ Е. со!!'Ьаче Ьееп соиасгиесе6 йас ехргея Еоге|8п ргосешя ъч)сЬоис ипсоъчаг|1 сопле|)вел|сея 1п гесо8п|сюп оЕ сЬ)а !асс, пюас оЕ сЬе ге8и!асюпа сЬас геаспссе6 ехрге|ьюп ъчог)с ш Е. саб ъчеге Пгорреб ш сЬе )тп)се6 8сасеа а Ееъч уеаь аЕсег Ая!огпгш ъчПЬ оп1у со)сеп орроя6оп Егош сЬе Ьагйсоге ре|ьпп)ася Аъ Еог сЬе епсгергепеигя оп1у а Ееъч оЕ йеп| Ьееагпе псЬ Егош ргосешк сЬас ъчеге аупсЬеяхе6 ш Е. | о!Ь рог сЬе шоас рагс, сЬехе ргосеша ч еге япаП суси)с)вел ап6 8гоъч|Ь Еассоь ъчЬоае аесгесюп шсо гпегПшп сои)6 Ье еая!у еп8)пеегей Ьаг8ег ъесгесе6 ргосе!па авс) сусохоПс ргосеша оЕ аП ягеа ргоче6 со Ье Еаг |поге 6!ЕПси1с со ргойисе. АЕсег аечега! уеага оуейогс со |ю1че ргоЫепь оЕ рго1|агуос|е ехргеьяоп, пюас Пепе6с еп8!пеег)п8 сошрав)еа аЬапбопес1 Е. соб |п Еачог оЕ еи)сагуоск сеП| аа йе шеаы со ргобвсе 1аг8ег аесгесе6 ргосешя А1сЬои8Ь йе ъо!цс)ова гешаш е!ы|че, сЬе геааопа Еог сЬеае ргоЫеша аге с1еаг епои8Ь.
Тоо Пс|1е ь )споъчи аЬоис сЬе шееЬапьш оЕ Ео!еПп8 оЕ ргосеша ш Е. со)с, ап6 Ееъч |пЕаП|Ые гпесЬосЬ аге ачаПаЫе е|сЬег со !псгеаае |Ье ей)с!епсу оЕ Ео1|Пп8 ог со ргечепс сЬе а88ге8асюи, дева!огас)ов, ав6!ог де8габа6ов оЕ Пъге)8п ргосеша ехргеме6 ас ЫПЬ 1ече1к ш ав евч)гоп шеи! сЬас ь вива|ига! со йегп. 1в аоп|е садбея сЬе ые оЕ пшсапь оЕ Е. |об Ее.8., !ои пшсапь) сЬас аге с)еЕес6че |п де8габа6оп Ьаа ргочеп Ье!р|и!; |п шипу осЬег сааея ао!иЬ|1иу ргоЫешь Ьаче Ьееп аПеч)асе6 Ьу ехрге|ьш8 сЬе ро1урерс!Пе оЕ !псегеас аа рап оЕ а ЬуЬп|1 ргосеш. Ноъчечег, шоас попаесгесес) ргосешк аув|Ьеяке6 ш Е.
соП ассипш!асе аа депасигед а88ге8асея саПе|1 шс1ияои ЬоеПея ъчЬссЬ сап Ье рипбе|1 Ьу ЙЕЕегепс!а! еепспбл8асюп !Еог гечсечг, р1еаае аее Мага!оп 1986; Соиаепа ес а1. 1987). ТЬеъе а88ге8асеа аге шао1иЫе )и ас!иеоы ЪиЕЕега ас пешга1 рН, Ъис |Ьеу ияла1- 1у сап Ье 61|во!чес) ш ЬвЕЕега сЬас аге |паг1|е|Пу ас)6к ог аП|аПпе ог сопса|п ЫцЬ сопсепьабопа оЕ десегцепь, о|8ашс |о1чепся ог с)епашгапся 1п а Ееъч сааея |с Ьаа сЬеп Ьееи роьяЫе со Ео!6 йе ао1иЬ|1|хе6 ргосеш ш ч|сго |псо ап аессче ог пабче асасе ЕЕог геъвеъчя р!еаае аее Мага|оп 198б; КоЬпо ес а1. ! 990).
Моя шссе|ь чбй Е. соб ехрге|ьюп аулсегпа Ьаа Ьееп аеЬиече6 чий япаП аесгесогу ргосеша (Е)ое66е! 1990), ъчЬгеЬ сап Ье сгапа1осасе6 шсо |Ье ребр!аяп|с |расе оЕ Е. со!П Сгош ъчЬеге сЬеу сап Ье гесочеге6 ап|1 рипбед, |ю|пе6гпеа ш ап ая|че Еопп. То асЫече |пахипшп еЕЕсе!епеу, Ьоъчечег, и ь ыиаПу песе|вагу со гер!асе |Ье еи)сагуо6е Ьу|1горЬоЬ!с а|8па! аециеисеа ъч)сЬ а Ьаесепа! я8па! аециепсе апд е1еача8е ясе. 1с ь ипгеаюпаЫе со ехресс аесгесогу ргосешь |Ьас Перепл оп 81усоау!акоп ог арес)йс ргосео1ус|е Неача8е со Ье гесочеге|1 ш ап ас6че |гасе. Аа шеПсасе|1 аЬоче, яиаП сусоаоПс ргосеша ап|1 ро1урерс|беа !<100 геяйиеа ш 1еп8сЬ) аге Ьеас ехрге|ье6 ш Е.
| ой аъ Еыюп ргосе|пя ТЬе сагпег лес)иепсеа ойеп асаЬ|1|ге сЬе ргосеш оЕ шсегеас а8ашлс шсгасеПи!аг Пе8габасюп ап6 ргочЫе а Ь|п|Пи8 ясе сЬас сап Ье иае6 Еог аЕЕсв!су риППса6оп. ТЬе ргосе|п оЕ !всегеас сап аоше6|пеа Ье гесочегед |п ап ас6че Еопп Ъу шс1иеПп8 а ргосео1ус|е с!еача8е ясе ас ап арргорпасе 1оса6ои |и |Ье Еиаюп ргосе|п. Рибп8 йе 1ая 20 уеагя спапу 6!йегеис сагпег аеъ)иепсеа Ьаче Ьееп иае6 ш ЬуЬгЫ ргосешя Апу опе оЕ сЬесп шау ъчог)с ъчеП |п а |рес!Пс сова!свес ог ш а раг6еи!аг Ьассег)а) ксгаш, Ьис попе оЕ |Ьесп ь а ии|- ъ егаа! рапасеа. Ноъчеь ег, пеъч)у Пече1оре6 ехргеаяоп ау|сею| йас исП)хе Е, соП ргосеш сЫоге|)ох|и аа а сагпег арреаг со Ье а яцшбеапс ипргочеп|епс очек пюге сга|Псюпа1 |ияоп рагспега, аисЬ аа )3-8а!ассояс1аае.
ТЬе СоПоъчш8 аге йе съчо гпоя ргоЫеша6с 8гоира оЕ ргосешя ° Суголо))е ргоге|ы >!00 геак1иеа аге аошес)спел сохпх оусеп ипасаЫе, ап|1 Егесрлепс1у Еопп ш|о1иЫе шс1ияоп ЬогПея 1и~оттаг(оп РапеВ 15.57 ° Еагце се!1-ьагуасе ргосе(пь апИ ьесгегогу ргогеть аге сгапь1осасес( ше(6|с(епс1у асгоьь сЬе шпег пкгпЬгапе осЕ. со(1, апс( оп1у а япаП угассюп о( |Ье пю1еси!еь сЬас геасЬ йе репр1аяп|с ьрасе аге аЫе со со!6 шсо ап ас6че соп6цигасюп, РегЬарь йь В пос ьигрпяиц ш меч о( сЬе (асс сЬас |п тапипаПап сець, сгапьрогс, Со!йпц, ап|1 Ью1оц(са! асс|ч|су ог сеП ьигсасе ап|1 !агце ьесгесогу ргосешь аге ойеп с(ереис(епс оп сЬе соггесс сопяеца6оп о( сЬарегопе ргосешь, аычеП аь ц1усоьу!апоп апйог осЬег уогпь ос' роясга|ь!ацопа1 той6са6оп.
!и йе аЬьепсе о( апу (пуогпипц рппс(р1еь сЬас |чоиЫ Ье1р со 6пс( а цепега! ьо(исюп со сЬе ргоЫеть ос |псгасеци1аг ргосеш (о1йиц, йе ехргеьяоп о( ечегу сРС4А еисойпц "сИВси1с" ргосе|пь ш Е. со!| ргеьепсь а ишсрле ьес оГ ргоЫетя ъчЫсЬ пшя Ье ьо1чес( еп|р|псацу, ! АСЕ ГОЯОй!$ Репе йяопь аге сгеасес( Ьу сошшц соцесЬег с|чо р|есеь о! Р!4А сЬас |чеге пос рге|6осьсу соппессес!.
ОВеп, сЬе геци!асогу ьессиепсеь ос йе цепс о( |псегеьс аге р! асес( ирьсгеагп ау ьес(иепсеь сойпц Рог а герогсег пю1- еси1е ъчЬоье (ече1 о( ехргеьйоп сап Ье еая!у п|еаьигей (ог ехагпр!е, В ца1ассоьЫаье, ТЬьь суре о(цепе |Ьяоп ацо|чь гарЫ ехрегипепса1 апа1уыь ог сЬе РЬуью!оц(са! сопйсюпь аКес6пц |Ье ехргеяюп о( сЬе депе о( шсегеьс; ап|1 и уас|Псасеь пшсасюпа1 апа1уяь оГ сЬе ирьсгеат геци!а|осу гец(оп.
Сепе Йляопь аге а1ьо сье|1 со сгеасе ЬуЬгЫ ргосешып |чЬ~сЬ сЬе ргосеш о( шсегея В ассасЬес( со йе атшо сеппшиь ог |Ье сагЬоху! сеппшиь оу а сагпег ргосеш. Мапу чессог ьуяегпь Ьаче Ьееп Вече!прес( (ог сЬе ехргеьяоп ол !асЕ |Ьяоп цепеь. 5оте о( йеье аге Пасе|( |п ТаЫе 15-6. Еасоф |Ьяоп ргосешьЬаче ьечегас ас(чапсацеы ° ТЬе|г ехргеььюп В р!асес( ипс!ег йе с(от(пюп о( а ъчеП-сЬагассепхес( ргоп|осег |чЬоье асс|чВу сап Ье (псгеаьес( Ьу ьечега1 огс(егь ог таци(сис(е Ьу ятр!е ташри1асюп оу йе Ьассепа1 си1сиге. Тгапьспрс|оп оу Еасу. ь ьиЬсесс со ЬосЬ пеца6че ап|1 роя6че геци!асюп. Ыецас|че геци1асюсс и ехегсе|1 Ъу йе 1.ас гергеяог, |чЬкЬ Ь(пс(ь со сЬе орегасог (ЕасО) ап|1 ргечепсь ьупсЬеяь оГ (ас п|ВЫА. ТЬе (ас гергеяог, а сесгап|епс ргосеш о( 150 ИЭ, ь епсос(ес( Ьу сЬе (ас1 депе. С4огтацу, йеге аге аЬоис сеи ию1еси!еь о( гергеяог рег сеП, ьий|с|епс со ьтосЬег, Ьш пос соп|р!есе1у ьсгапц1е, |гапьспрсюп о( |Ье Еас орегоп.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
