Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.2 (522942), страница 43
Текст из файла (страница 43)
сой 0)4А Ро[угпегаье ! 11 ЕаЬе[[пц 3' Тегпнп! о[ 0оиЫе-ь[гапдед 06[А хн[[Ь Вас1ег[орЬаВе Т4 0)4А Ро[угпегаье 12 Епд ЕаЬе[[пц Рго1гийпц 3 Тепгнп! о[ 0оиЫе-ьггапдед 0ЧА едГЬ [а-гаР]Согдусер[п 5 '-Тг[рЬоарЬа1е ог [а-ггР]йдеохуАТР 13 0ерЬоарЬогу[адоп о[ 0[йА ГгаВгпепгь ич1Ь А[]га[[пе РЬоврЬасаве 14 РЬоарЬогу[адоп о1 0НА Мо]еси[еь ъи1Ь Рго1гид[пе 5'-Нус1гоху! Тепп[п! 15 РЬоьрЬогу]адоп о[ 0Ь[А Мо[есйея ед[Ь ОерЬоьрЬогу]агед В[ип1 Епда ог Кесеааед 5' Тегпн'и! 9.9 9.12 9.14 9.18 9.19 9.25 9.29 9.36 9738 9.41 9. 46 9.51 9.57 9 60 9.62 9.66 9. 70 9.1 16 РЬоьрЬогу[адоп о[ 0НА Мо[еси[еь ъи[Ь Рго1гид[пВ 5' Тегпнп! Ьу ЕЬе ЕхсЬапее 9.73 Кеаг Вон !!ЧЕОКМАТ!ОБ! РАЬСЕЕ5 ° ЬаЬе1ед Егавшепса' о1 с1опед РЬ!Л апд о1!Вопис1еос!деа о1 дейпед яге аге гьед аа геаееитт тп сЬепнса1 апд епгушаск ает)иепс!пц, пис!еаае 51 апа1уяа о1КХА, апд Ьапд-аЬ!Ес ехрегппепся 1п сЬеае сааея тЬе 1аЬе1ед геацепс ь сопчегтес1 со ргот1ись о1 д!йегепс ягея ччЬ!сЬ сап Ье т1есессес1 Ьу а чапесу о1 тпейосЬ, це1 е!ессгорЬогеяа Ье!пц йе шоя сопнпоп.
° 1.аЪе1ес1 РЫЛ, К!ч!А, апт1 о1!Копие!еос!де'ргоЬеа аге иаед тп ЬуЬГ!д!гас!оп-Ьааед сесЬп!с)иеа со 1осасе апс1 Ьтпд РХАа апд КХЛа о1 сотпр!етпепсагу ает)иепсе. ТЬеае сесЬп!т)иеа тпс1иде со1опу апс1 р1ат)ие асгеегдпд, 5ошЬегп апд погсЬегп апа1уаея !п яси ЬуЬГ!д!гас!оп, апс1 зет!иепс!пц Ъу ЬуЬГ!д!гас!оп. 1п Ъой сааея яксеаа дерептЬ оп йе Еаст1е шсгос1иссюп о11аЪе!а !псо Р!ч!А ог КХА Ъу шесЬосЬ аисЬ аз епд-1аЪе1шц, гапдош рппнпа, пк1с сгапа1адоп, ш чьго сгапасг!рс!оп, апд чагтассопъ о1 йе ро1уптегаае сЬаш геассюп (РСК). 5отпе оусЬеае тпейосЬ р1асе сЬе 1аЬе1 тп ерес!Етс !оса!!опа чч!СЬ!п СЬе пис1ек асЫ !е.ц., ат СЬе 5' ог 3' Сегш!пиа); о!Бега Вепегате пю1еси!еа СЬаС аге 1аЬе!ед !псегпа11у ас ши1с!р1е ясея 5отпе шесЬосЬ уте1д 1аЬе!ед япц1е-асгапдед ргойкь, ччЬегеаа о!Бега цепегаСе доиЫе-аСгапдед пис1ек асЫя Е!па))у, аоше аепегате ргоЬеа оудейпед 1епВСЬ, апд ойега у!е1д а Ьесегоцепеогь рори!асюп о1!аЪе!ед пю!еси1ея ТаЫе 9-1 япшпаг!геа йе ордопа ача!1аЫе Еог гад!о1аЬе!!пц пис1ек аснЬ апс1 ди!деа !пчеас!Касога со а тпесЬос1 о11аЪе1!па сЬас яиь сЬе саа1с ас Ьапсс.
Вах!с гетеагсБ тау сеет чету ехреит!че. 1 ат а тче!1-ра!ГГ зстеит!ГГ. Му Боиг!у тчаее и ет!иа! Го Йат о1 а р1итЬег Ьит гатедтет ту гетеагсБ гетатт Ьаггеи оУгеги)тг !ог тчее!св тоиГБГ ог уеап аид ту соитс!епсе Ьее!ит Го Ьойег те 1ог и атиие йе ГахрауегБ тоиеу. Вит т геч!етч!ие ту В!еЪ тчог)с, 1 Бане Го ГБ!иБ йат йе ехреите счаз иот тчазтед, Витте гетеагсБ, Го тчБтсБ и е отче ечегуГБ!ид, Ь ге!а!!че!у чегу ГБеар тчБеи сотрагед тч1ГБ ойег оидаут остодеги госте!у, ТБе ойег дау1 таде а гаиф са)си1адои счБ!ГБ 1ед те Го Йе соис)ияои Йат !! оие и еге Го адд ир аП Йе тоиеу ечег трепт Ьу таи ои Баас гетеагсБ, опе пои)д !1ид Ь Го Ье1изт аЬоит ет)иа! Го Йе тоиеу трепт Ьу Йе Реита5ои йЬ ратт уеаг.
А!Ъегс 5гепс-буогцус, ТБе Стаху Аре 9.2 СБартег 9: Ргерагадои о1 Кад!о1аЬе!ед РИА аид ЯМА РгоБет !иопгад!пасс!че ЕаЬе!!па о! Б!ис!е!с АсЫа Е. со!! 0!ЧА Ро!угпегаае ! апд сЬе К!епочч Ргацтпепс тп тт!сто Тгапаспрвоп 5уасета тао!ат!пц О!!Гегепт!а!!у Ехргеааед с0МАа Ьу 0Негепт!а! 5сгееп!пу апд С!оп!па А!!са!!пе РЬоерЬасаае 9. 76 9.82 9.87 9.В9 9.92 ОО 0» о «% о ~~ а. » > 0» < О» 0 а О» ЬО Е О. 'О О Е с » х 00 Е О О х 00 Е О 'О х О с а ЬО 00 .с о а о о О Ю Е а Е а, О. 'О с .О о а.
'О ,а Е о 00 с ? с о 0 х» о с Ь» '9 Ю О о а с Ю з о а с Ю 4 о О с 3 а о о 0 О ьс О с о о 0 'О с х» с 0 'О о а с О ) с а "О ч < 'О О О у Ф .О О Ю О ?а о О а о 00 в ОЬ Ю с Е с Е О 0 с О а а а с с с а а с с 00 о а. о » ?- » -В с с о х я а 0 В д а .а Ф с о с .х 'к а Е к < ?? О О с Оа Ю о Ь о 5 «о Р й о< а ьа с Е а о О а о ЬЕ с .а с с с 0 а 'с с о ОЕ 0 .О 4 с ОЕ < од » Р Ьа— с а .Е В д< Е Х о ~ ЬО с Ы а Е < С~ о д * ОО: Е с — *Ю Ь а .О а О В о о "О а 'О сВБ о .а 'а «аа ьа с - Е Е а.
< Е ~ о 00 00 с с х» ~ с о Е О..с ьа ~ 0 о < юВ < ОВ 00 ЬО о Е а. Ю 3 с Я с о с Ь с а .о 'О с а д Е о с » с Е ь с ЬО .О с ьа аХ Е Е ЬО К ОЕ с » О » -с О Ьа с В с Ь ьс с О »о .а о В 4д о о ?4 — с с ЬО с с В 0 ОЕ "О с .а о а с с ьа Ьа д „ Е с Е 0 .с .с ° .Е ' о сю а ь. о с.с а с 0' а о а о-о а Ь ЬО Е о а » х ю х Ю с о "о с с Б с о с .О с с .с 'О о ЬЕ -о 'С3 с .о о ~ Ю ?? ЬО о Е а Ь 0 с * о а с .а О с а Е о с » а Е Е а а с с ЬО .О д< аа о < В В ~а О~ Е В о а О 00 а Ь 'О с Ь а 0 00 О "О 4 * ЬЕ < ОК О 00 с о о с х . 0 ЬО Е с а .о о О.
о с с о 00 о ,» Ю л с .с .а х» о .В с с 00 с с О о 0» к ~ .Ж ч о .с 00 .с а аВ о .с Ю О Е аВ В4 а с Ьс 7 с ЬО Ь с .о < .Х ОО 0~ о. аа— Ь ю а ю „Е ОЕ а .О о.Е .Е о 'с о О а 00 о "Е Ю 0 'О х ЬО с о О 0 с о с .Е о 'О с с .с ' о,с 0 о » .с О о а .а Е о щ а а а Ь о с ЬО 00 х» 4 с » < о ~ 4а с О Е о В о, Е с а О .О 4 с а ю Е с В < о с ~ С О а с о с с о В Ь д о О с о Е а Е" В М с < аО с о .О к 'О -О .о ю % Е с О В с с Ьа О.О а о а.ь» с с а о а о О с о .о ЬО с Е о а а о ьа 'а с .О о.
.а .о с ос с Е о .Ю о Ь 0 ЬО с а а Е< жВ Е с О» а с "О о— < о к -„' а" О—,с » 0 .С О 00 с О 0 с Ю с ьа о Ю 4 с ЬЕ < а о ~ 'О о с а. с о О О о < о а ° о а. < В а с о .а а о 'В с с т 'а а с о с о .а В ЬО х с о Х Д 'с „ Е В с О с— ао Ю а О о О ЬО Е О а Ю 'О Ю с Е \ с ЬО с а 0 Е .? ЮВ а 00 Е с Е с„с О' о а 'О а о. В Ю О В .с '"О Е, с 'О В с с' а ЬО 'О О .И с .а < о ~ 4 ?? о .с с о „ о о о. с .а 'Е д о .с а ' о о 0 < к с о 0» ЬЕ о 'Е с 00 В с с с а о о Л "-',2 с а 0» 00 с о 'О с О ЬЬ а а» » с о о о а с о о к о 'х с Рго1осо! 1 Капс1от Рппи'пц: Касйо!аЬеЙпу о1 Рипйес1 0МА Ггаупепй Ьу Ех1епьюп о1 Капдогп О!~уоп Ос!ео6дея псоньссеот!огх слы хгхчг А5 Рх!мгах 1ог !прбагюп ог" 13ХА вупгЬеяа оп яп81е-ягапбе6 гегпр1агеа Ьу 13(ч)А ро1ушегааеа (Сои!!ап 1969). 1Г гЬе о!!8опис1еогЫек аге Ьегего8епеогь ш аеоиепсе, гЬеу М11 Гогш ЬуЬг(сЬ аг шапу роягюпя ко йас гЬе сошр!егпепг ог" ечегу пис1еогЫе оГ гЬе гешр1аге (ехсерс гЬоке ас гЬе ехггегпе 5' гегш!пиа) чч)! Ье шсогрогасе6 аг ег)иа1 ггег)пенсу (пго йе ргос1исг.
ТЬеае ргойкь ог 13ХА аупгЬеа(а сап Ье гайо1аЬе1ес1 Ъу ияп8 опе (а-ЯР) 6ХТР ап6 йгее ип1аЪе1е6 6ХТРа аа ргесигеогя 8епега6п8 ргоЬеа чбй крее((1с ас6лбеа о( 5 х 1Оа го 5 х 109 6рш!)г8. Тау1ог ег а1. (1976) герогге6 гЬе ()гаг иае оЕ гапбош ргншп8 го 8епегасе га6(о1аЬе1е6 ргоЬеа (ог ЬуЪг!6(айаг!оп.
Ноччечег, йе шегЬо6 6!6 пог (!п6 ччЫе ассергапсе ипг8 гЬе шЫ 19808 ччЬеп ГЬе геабу ача!1аЬ!1Ьу ог' сопппегс!а! )3ХА ро1ушегааеа ап6 о1г8опис1еоГЫе рпшега а1!огчес1 РегпЬег8 ап6 Чо8е1яге!и (1983, 1984) со с1ече!ор а яег ог' агапдагйхег1 ап6 Ьагбу геасгюп соп61- 6опя ТЬеае соп6!гюпа Ьаче япсе Ъееп (псогрогасе6 )пго 1аЬе1(п8 Ыь, юЬ~сЬ аге шагЬеге6 Ьу зечега! сопнпегс!а1 гпапигасгигегя Ноччечег, гапбош рппнп8 геас6опа аге ю гоЬгьг апд япгр1е гЬас Ыгя аге ап иппесеааагу!ихигу.
1аЬе1ш8 сап Ъе сагПе6 оиг чбй еоиа! еГ()с(енсу ап6 8геасег есопогпу ияп8 сошропепь ригсЬааед (п6(чЫиа11у. Рсапбош рппнп8 Ь !пЬегепГ1у ягпр1ег йап шс1с Ггапв!аГ!оп Ьесагье йе гег(и(гешепГа Еог пчо пис1еаае асг(ч(г(еа (13Хаае 1 апд 5' — +3' ехопис1еаке) аге е1(пнпасей ТЬе га6(о1аЪе!е6 ргос1- ись ог" гапбош рппнп8 геас6опа аге йеге(оге пюге Ьопго8епеогь (п яке апд ЬеЬаче пюге гергодис(ыу (п ЬуЪг(6!айаг!оп геасбопя 1п пк1с ггапз1аг)оп, гЬе ачега8е яке оГ гЬе гас1ю1аЬе1ед ргодисГа саппоГ Ье сопгго11ед чч!ГЬ 8геаГ ассигасу. 1п ганеш рппнп8, Ьоччечег, йе ачега8е яке оГ гЬе ргоЪе ПМА (к ипс1ег гЬе сон!го! ог гЬе шчез68агог япсе ргоЬе 1еп81Ь !а ап )пчегае 6лпсгюп ог" гЬе ргнпег сопсепггагюп (Но68аоп апс1 Р(й 1987).
ТЬеае абчапса8ек Ьаче ргочеп со Ье ао Йес!яче гЬаг гапбош рппип8 Ьаа а!гпоаг согпр!еге!у гер1асес1 п(с1с ггапк1агюп аз гЬе згапбагд гпейос1 оу!аЬе!гп8 оГ 6оиЫе-йгапдес1 13ХА ргоЪея Рготосо! )т Ваидот Рг!т!иет Кттд!о!а(ле!!и8 о~Ригфед Е))чА Рга8теио 9.5 СОМРОМЕЫТ$ ОГ КАМООМ РК!М1]ЧС КЕАСТ1ОЮ 0ЫА Ро1уолега5е Вапдотп рг)пптт8 геас6опь птау Ье сата1ухед Ьу апу оЕ ьечега! ЕЗДА ро!угпегааеа тпс1исбп8, Еог ехашр1е, Тат! (5ауачедга-5ото апд СгеааЬоЕЕ 1992). Наречет, Ьу тдгтие оЕ (та ейк(епсу апд то1- егапсе оЕ а ччЫе гап8е оЕ сопд!т!опя йе ептутпе оЕ сЬоке !а тЬе К!епоъч Ега8тпепт оЕ Етс)тепе(т(а сой Е)ХА ро1ушетаае 1.
Аь д!асиааед ш йе тпЕогшадоп рапе! оп В СОГ! О!ЧА РОттМЕКА5е т А!ЧО ТНе тссейОЪч гаАСй4ей!г, тЬе К)епоьч Ега8шепт !ас!та 5'-+3' ехопис1еаае асдчпу, тю тЬат тЬе гасбоасдче ргодист (а ауптЬеятед ехс!иыче!у Ьу ргипег ехтепаюп гайег йап Ьу пк)т тгапь!атюп апд !а пот аиЬ]ест то ехопис1еаье де8гадатюп. ТЬе геастюп сап Ье сагпед оит ат РН 6.6, тчЬеге тЬе 3' — э5' ехопис!еаае асбчбу оЕ тЬе ьтапдагд К1еполч епхуше (а пшсЬ гедисед ().еЬгпап апт1 ВкЬагдаоп 1964).