Диссертация (1174246), страница 17
Текст из файла (страница 17)
При этом известно, что нативный АКТГ4-10 обладает сродством к МС-рецепторам [214]. Также известно, что впечени экспрессируются МС5-рецепторы [250] и МС4-рецепторы [156, 207],наиболее гомологичные между собой по сравнению с другими типами меланокортиновых рецепторов [214], а также МС1-рецепторы [209, 226]. Показана рольМС4-рецепторов в модуляции процессов регенерации печени после частичной резекции путем активации сигнального протеинкиназного пути in vitro [259].Кроме того активация МС4-рецепторов гепатоцитов в условиях развитияреакций острой фазы оказывала гепатопротекторное влияние за счет ингибирования продукции медиаторов воспаления и провоспалительных цитокинов клеткамиКупфера, регуляции энергетического метаболизма в гепатоцитах [156, 207].Сходный противовоспалительный гепатопротекторный эффект обнаружен в условиях стимуляции МС1 и МС4-рецепторов гепатоцитов их агонистами при гипоксическом повреждении печени при геморрагическом шоке [209]. В связи с этим118можно предположить, что семакс мог связываться с данными рецепторами и оказывать прямое влияние на функциональное состояние гепатоцитов.Также важно отметить, что трансмембранная и последующая внутриклеточная передача сигнала меланокортиновых пептидов с одного и того же рецептора в зависимости от концентрации лиганда может осуществляться различнымипутями: за счет активации цАМФ, инозитолфосфатной системы [188, 255], а также Са++ и протеинкиназ [255].
Данные механизмы установлены для всех типов меланокортиновых рецепторов [188, 229, 255]. Активация того или иного механизмапередачи сигнала влияет на направленность, силу и продолжительность стимула ивызванного этим стимулом эффекта и зависит от концентрация агонистов рецепторов и «плотности заселения» поверхности клетки рецепторами. При этом величина экспрессии рецепторов может регулироваться синхронизацией различныхсигнальных путей [229, 255].Возможность участия как центральных, так и периферических механизмов вреализации стресспротективных эффектов препарата показана в отдельных исследованиях [108].При повторяющемся стрессорном воздействии отмечалось большее количество изменений исследуемых признаков по сравнению с однократным воздействием.
Так, в контрольной группе животных по сравнению с интактными отмечалось увеличение активности АлАТ, уменьшение концентрации сывороточногобелка и мочевины на фоне роста концентрации ЩФ, МДА и уменьшения показателей (СОД, ОАА) антиоксидантной системы.Описанные изменения биохимических показателей свидетельствуют оналичии деструктивных и холестатических процессов в тканях печени, результатом которых стало снижение синтетической и детоксикационной функции нафоне усиления липидной пероксидации гепатоцитов. Холестатические процессы вданном случае, вероятно, носят внутрипеченочный характер и обусловленыфункциональными нарушениями синтеза желчи гепатоцитами [196].
Наблюдаемое уменьшение активности антиоксидантной системы согласуется с имеющимися литературными данными об истощении активности ее элементов при длитель-119ном воздействии стрессоров и хронических заболеваниях [26, 109, 178], а также овозможном прямом ингибирующем влиянии компонентов антиоксидантной системы накапливающимися в гепатоцитах АФК и карбонильными продуктами свободнорадикального окисления [1].Биохимические изменения, свидетельствующие о наличии деструкции клеток, согласуются с данными морфологического исследования в виде некроза гепатоцитов с дискомплексацией печеночных балок и признаков гидропической дистрофии.
Снижение относительного числа многоядрышковых гепатоцитов во всехотделах дольки и многоядерных гепатоцитов в периферических отделах подтверждает выявленное при биохимическом исследовании нарушение синтетическойфункции печени. Описанные гистологические изменения наблюдаются на фонеувеличения относительной массы печени по сравнению с интактными животными, что, по литературным данным, свидетельствует о наличии повреждений органа вследствие оксидативного стресса [173], а также может быть обусловлено застойными явлениями с развитием интерстициального и внутриклеточного отека[32] и накоплением продуктов липидного обмена в гепатоцитах вследствие переключения энергетического обмена с «углеводного» типа на «липидный» [74].Принимая во внимание вышеописанные изменения функциональных иморфологических характеристик гепатоцитов, можно заключить, что использованная модель стресса привела к снижению их адаптивных возможностей, что иповлекло за собой развитие стрессиндуцированных поражений печени.
Введениесемакса во всех использованных дозах характеризовалось гепатопротекторнымиэффектами различной степени выраженности.Так, наибольшим эффектом пептид обладал в дозе 150 мкг/кг. При введенииданной дозы отмечалось уменьшение цитолиза, восстановление синтетической идетоксикационной функции печени на фоне уменьшения ПОЛ. Увеличение дозыдо 450 мкг/кг лишь нормализовало стресс-индуцированное увеличение активности АлАТ без влияния на другие показатели.
Нормализация синтетической функции печени отмечалась при введении препарата в дозах 5 и 50 мкг/кг. При этомвведение препарата в дозе 50 мкг/кг способствовало увеличению активности120СОД. Отсутствие выраженного эффекта пептида на изменение концентрации щелочной фосфатазы и сохранение его повышенной концентрации в сыворотке крови объясняется длительным периодом полураспада данного фермента, составляющего около 1 недели [175].Вышеуказанные гепатопротекторные эффекты пептида в отношении исследованных биохимических показателей подтверждаются данными гистологического исследования. Так, наибольший эффект проявился также при введении пептидав дозах 150 и 450 мкг/кг в виде значительного уменьшения выраженности деструктивно-дегенеративных процессов.
Кроме того, доза 150 мкг/кг нормализовала относительную массу печени. Однако морфологического подтверждения восстановления синтетической функции печени установлено не было.При уменьшении дозы до 50 мкг/кг помимо сохраняющихся эффектовпредыдущих доз на деструктивно-дегенеративные процессы тканей печени отмечалось улучшение ее синтетической функции.
Дальнейшее уменьшение дозы препарата до 5 мкг/кг нивелировало эффекты семакса в отношении морфологическихпоказателей, и значимых различий со стрессированными контрольными животными установлено не было.Характеризуя действие пептида в условиях повторяющегося действия раздражителя, следует отметить усиление его антицитолитического эффекта с увеличением дозы на фоне уменьшения темпов восстановления концентрации сывороточного белка и роста относительного числа многоядерных и многоядрышковыхклеток. При этом уменьшение цитолиза гепатоцитов на фоне усиления выраженности морфологических признаков белоксинтетических процессов в виде возрастания степени полиплоидии клеток и изменения концентрации сывороточногобелка под влиянием больших доз пептида может свидетельствовать об активностирепаративных процессов в паренхиме печени за счет усиления конституционального синтеза белка.Таким образом, в условиях хронического эмоционально-болевого стрессасемакс во всех использованных дозах оказывал стресс-лимитирующее гепатопротекторное влияние.
Анализируя изменения морфофункционального состояния пе-121чени подвлиянием острого и хронического эмоционально-болевого стресса,можно заключить, что степень выраженности выявленных изменений находится впрямой зависимости от длительности стрессорного воздействия. При этом пептидоказывает более выраженное гепатопротекторное влияние в условиях хронического стресса, что может быть обусловлено как непосредственным влияниемАКТГ4-7-ПГП, так и временными рамками.Влияние острого иммобилизационного стресса, по сравнению с острымэмоционально-болевым, проявилось изменением большего числа исследованныхпоказателей. Так, данный вид воздействия привел к увеличению активности сывороточных аминотрансфераз, снижению концентрации общего белка и увеличению концентрации мочевины на фоне увеличения содержания МДА, активностиизучаемых антиоксидантных ферментов и уменьшения ОАА.Полученные данные свидетельствуют о повреждении гепатоцитов вследствие активации процессов свободнорадикального окисления, липидной пероксидации и последующей активации антиоксидантной системы.
В целом можно заключить, что данный вид стрессорного воздействия носит более выраженный характер, что объясняется вышеописанным сочетанием центральных и периферических механизмов развития стресс-реакции, а также большей продолжительностьюстрессорного воздействия [12, 92, 96].Морфологические проявления ответа на иммобилизационное воздействиетакже характеризуются большей степенью выраженности. Так, на фоне повсеместно распространенной гидропической дистрофии гепатоцитов в периферических отделах долек отмечаются клетки в состоянии фокального гидропическогонекроза. При этом морфологические характеристики белоксинтетической функции неоднозначны: в периферических отделах долек отмечается уменьшение относительного количества многоядрышковых клеток, тогда как в центролобулярных отделах, напротив, увеличение.
Данный факт может объясняться «метаболической зональностью гепатоцитов [117, 118, 233]. Установлено, что в гепатоцитахпериферических отделов преимущественно осуществляется синтез белка «на экспорт», тогда как в центролобулярных отделах осуществляется синтез «для себя».122В условиях стрессорного повреждения печени экспортный синтез белка являетсянецелесообразным, и с целью активации репаративных процессов в самом органевозрастает конституциональный синтез белка. Данные изменения протекают нафоне уменьшения относительной массы печени, что с учетом временного фактораможет быть обусловлено истощением запасов гликогена в процессе гликогенолиза, содержание которого в печени животных может достигать 15% от ее веса, чтоподтверждает мобилизацию готовых резервов, в том числе и энергетических, впроцессе срочной адаптации [81, 170, 225].Как и при остром эмоционально-болевом стрессе, введение пептида приводила к неоднозначным эффектам в отношении стрессиндуцированных измененийисследованных показателей.
При введении семакса в дозе 5 мкг/кг отсутствовалиизменения со стороны процессов ПОЛ и компонентов антиоксидантной системы,но наблюдалась коррекция стрессиндуцированного повышения активности АлАТна фоне еще большего увеличения активности АсАТ и снижения концентрациищелочной фосфатазы. Аналогичный эффект в отношении активности АлАТ и ЩФнаблюдался и при введении пептида в дозе 50 мкг/кг, при этом отмечалось снижение активности каталазы и СОД. Дальнейшее увеличение дозы до 150 мкг/кгприводило к усилению процессов ПОЛ, как и при остром эмоционально-болевомстрессе, и снижению ОАА.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
