Диссертация (1174188), страница 18
Текст из файла (страница 18)
В то же время, Володиным Н.Н. [5] показано, что содержание IL-1b иTNFα в сыворотке периферической крови доношенных детей 3-7 суток жизнизначимо выше, чем при рождении. Авторы связывают наблюдаемое повышениеколичества провоспалительных цитокинов в крови детей с активациейиммунных клеток вследствие воздействия экзогенных антигенов в раннемпериоде адаптации.Нами отмечены особенности постнатального развития иммунной системыдетей с врожденной пневмонией: в отличие от новорожденных без признаковинфекции, у них отмечаются признаки истощения пула нейтрофилов имоноцитов к 3-м суткам жизни, что выражается в снижении числа TLR2+ иTLR4+ нейтрофилов, HLA-DR+ моноцитов и интенсивности экспрессии на нихданной антиген-презентирующей молекулы.
Более низкое содержание γδТклеток, NK клеток, CD16+ лимфоцитов в периферической крови недоношенныхдетей с пневмонией по сравнению с пуповинной может быть связано сперераспределением иммунных клеток и заселением слизистой оболочкидыхательных путей. Выявленная тенденция к увеличению доли В-клетокпамяти в крови новорожденных с пневмонией по сравнению с пуповиннойкровью, а также повышение экспрессии CD95 на лимфоцитах может бытьпризнаком дифференцировки клеток адаптивной иммунной системы.
В то жевремя, отмечается значительное усиление продукции кислородных радикаловклетками периферической крови детей с врожденной пневмонией по сравнениюс пуповинной кровью.Содержание цитокинов (IL-1b, IL-6, IL-12, IFNγ, TNFα, IL-4, IL-13) иростовых факторов (GM-CSF, VEGF, FGF-basic, PDGF-bb) в периферическойвенозной крови детей с врожденной пневмонией существенно ниже, чем впуповинной. Вероятно, пренатальное и интранатальное взаимодействиенезрелой иммунной системы плода с антигенами условно-патогенных105микроорганизмов приводит к истощению ответа цитокин-продуцирующихклеток. Подобное явление также отмечается при продолжительной инкубацииin vitro иммунных клеток в среде, содержащей бактериальный липополисахарид[140].
Снижение продукции цитокинов может быть также следствиемантимикробной терапии, направленной на удаление патогенного стимула и, какследствие, к снижению стимуляции иммунных клеток. Следует отметить, чтопри недостаточной секреции провоспалительных цитокинов затрудненоразвитие каскада иммунологических реакций, направленных на элиминациювозбудителя, что может приводить к хронизации инфекционного процесса.ЗаключениеВрезультатепроведенногоисследованиявыявленыпризнакииммунологической недостаточности у недоношенных новорожденных детей:высокая интенсивность экспрессии рецепторов к ростовым факторам наиммунных клетках, низкая фагоцитарная и бактерицидная активность клетокврожденного иммунитета, повышенное содержание незрелых В-клеток и В1лимфоцитовисниженное–В-клетокпамятиспреобладанием«непереключенных» форм, что может обусловливать высокий риск развития уних инфекционно-воспалительных заболеваний.У недоношенных детей с внутриутробной пневмонией при рожденииотмечаетсяактивацияиммунитета,характеризующаясяболеевысокимсодержанием CD16+ моноцитов и NKT клеток, высокой экспрессией CD64 нанейтрофилах и высоким содержанием цитокинов в плазме пуповинной крови.В раннем периоде постнатальной иммунной адаптации у недоношенныхдетей без признаков инфекции отмечается наличие признаков умеренногосистемного воспаления, что выражается в увеличении содержания хемокинов,повышении экспрессии патоген-распознающих рецепторов на фагоцитах ифагоцитарной активности нейтрофилов и моноцитов.
На фоне теченияврожденной пневмонии у недоношенных детей к 3 суткам жизни снижаетсяпатоген-распознающаяиантиген-презентирующаяактивностьклеток106врожденного иммунитета, содержание плазменных цитокинов, при этомбактерицидная активность клеток крови и содержание В-лимфоцитов памятистатистически значимо возрастает.107Выводы1. В пуповинной крови недоношенных детей без признаков инфекциисодержание CD114+ фагоцитов, CD116+ моноцитов и интенсивность экспрессиирецепторов к G-CSF (CD114) на фагоцитах статистически значимо выше, аэкспрессия CR3 (CD11b) на нейтрофилах и моноцитах – ниже, чем удоношенныхноворожденных.Унедоношенныхдетейсврожденнойпневмонией содержание CD16+ моноцитов выше в 1,6 раз, а интенсивностьэкспрессии CD64 на нейтрофильных гранулоцитах – в 1,2 раза по сравнению сноворожденными без признаков инфекции.2. Фагоцитарнаяиндуцированнаяактивность,способностьзимозан-индуцированнаяклетокпуповиннойкровииРМА-продуцироватькислородные радикалы значимо ниже в группе недоношенных новорожденныхпо сравнению с детьми, родившимися в срок.
У детей с пневмониейинтенсивность зимозан-индуцированной продукции активных форм кислороданиже в 1,8 раз, а РМА-индуцированной – в 3 раза по сравнению ссоответствующими показателями у недоношенных детей без признаковинфекции.3. У недоношенных детей в пуповинной крови выявлены более высокаяинтенсивность экспрессии рецепторов к ростовым факторам BAFF и APRIL,содержание CD19+CD5+ В1 лимфоцитов и CD19+CD27–IgM+IgD– незрелых Вклеток на фоне более низкого содержания CD27+ В-лимфоцитов памяти посравнению со здоровыми доношенными новорожденными.
Содержаниеисследуемых субпопуляций Т-клеток, в том числе Т-регуляторных, в данныхгруппах значимо не различается. У детей с врожденной пневмониейсодержаниеCD3+CD16+CD56+NKT-клетокв1,7развыше,чемунедоношенных новорожденных без признаков инфекции.4. СодержаниеиммуноглобулиновклассаGвпуповиннойкровинедоношенных детей в 1,3 раза ниже, чем у здоровых доношенных, и в 1,3 разаниже у недоношенных детей с пневмонией по сравнению с новорожденными108без таковой. Статистически значимых различий в содержании IgM в кровидетей исследуемых групп не выявлено.5.
Концентрацияисследуемыххемокинов,провоспалительныхипротивовоспалительных цитокинов у доношенных и недоношенных детей безинфекции статистически значимо не различается. В пуповинной кровинедоношенныхдетейсврожденнойпневмониейпосравнениюсноворожденными сходного гестационного возраста без признаков инфекцииконцентрация хемокинов повышена в 1,5-3,5 раза, ростовых факторов – в 2,511,1раз,провоспалительныхцитокинов–в1,6-6,9раз,противовоспалительных цитокинов – в 3,1-4,9 раза.6. Метод одновременной оценки интенсивности экспрессии CD64 нанейтрофильных гранулоцитах и зимозан-индуцированной продукции активныхформкислородафагоцитамипуповиннойкровиобладаетвысокимипоказателями чувствительности (75%), специфичности (80%), положительной иотрицательной прогностической значимости (85,7% и 66,7% соответственно) вобласти порогового значения и может служить основой для создания способаранней диагностики врожденной пневмонии у недоношенных детей.7.
Течение процесса ранней неонатальной адаптации у недоношенныхноворожденныхбезпризнаковинфекциисопровождаетсяповышениемпатоген-распознающего потенциала фагоцитов, содержания Т-клеток, в томчисле Т-хелперных и Т-регуляторных, IL-8 и IP-10 в плазме крови, снижениемколичества В-лимфоцитов. У детей с врожденной пневмонией к 3 суткам в 2,3раза уменьшается содержание NK-клеток, значимо снижается концентрацияпровоспалительных(IFNγ,TNFα,IL-1b,IL-2,IL-6,IL-9,IL-12),противовоспалительных (IL-4, IL-5, IL-13) цитокинов и ростовых факторов(GM-CSF, VEGF, FGF-basic, PDGF-bb) в крови, значительно возрастаетинтенсивность продукции активных форм кислорода клетками крови,происходит усиление в 1,4 раза экспрессии апоптотической молекулы CD95 налимфоцитах, в 1,7 раз увеличивается содержание «непереключенных» В-клетокпамяти.109Список сокращенийАРС – аллофикоцианинAPRIL – лиганд, индуцирующий пролиферациюBAFF/BLyS – фактор, активирующий В-лимфоциты/стимулятор В-лимфоцитовBAFF-R – рецептор к фактору, активирующему В-лимфоцитыBCMA – антиген, стимулирующий созревание В-клетокBCR – В-клеточный рецепторCCR – семейство хемокиновых рецепторовCD – кластер дифференцировкиCPAP–режимискусственнойвентиляциилегкихспостояннымположительным давлениемCR – рецептор к компонентам комплементаCTLA – белок, ассоциированный с цитотоксическими Т-лимфоцита15CXCL – семейство хемокиновFas – рецептор клеточной смертиFcγR – рецептор к константной части иммуноглобулинов класса GFGF – фактор роста фибробластовFITC – флуоресцеина изотиоцианатfMLF – формил-метионил-фенилаланинFOXP3 – транскрипционный фактор регуляторных Т-клетокGBS – гемолитический стрептококк группы BG-CSF – гранулоцитарный колониестимулирующий факторGM-CSF – гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий факторHLA – лейкоцитарный антиген человекаICAM – молекула клеточной адгезииIFN – интерферонIg – иммуноглобулинIL – интерлейкинIP – белок, индуцируемый интерфероном гаммаLFA – белок семейства интегринов110LIR – ингибиторный рецептор естественных киллерных клетокLPS – липополисахаридLTA – липотейхоевая кислотаMAPK – митоген-активируемая протеинкиназаMCP – моноцитарный хемотаксический белокМ-CSF – моноцитарный колониестимулирующий факторМНС – главный комплекс гистосовместимостиMIP – макрофагальный воспалительный белокMFI – интенсивность флуоресценцииNADPH – никотинамидадениндинуклеотидфосфатNK – естественная киллерная клеткаNKT – Т-клетка, обладающая свойствами естественной киллернойPBS – фосфатно-солевой буферPDGF – тромбоцитарный фактор ростаРЕ – фикоэритринPerCP – перидинин-хлорофилл-протеинPKC – протеинкиназа СРМА – форбол-12-миристат-13-ацетатPRR – паттерн-распознающий рецепторRANTES – белок семейства хемокиновTACI – рецептор факторов некроза опухолейTCR – Т-клеточный рецепторTFH – фолликулярная хелперная Т-клеткаTGF – трансформирующий фактор ростаTh – хелперная Т-клеткаTLR – толл-подобный рецепторTNF – фактор некроза опухолейVEGF – васкуло-эндотелиальный фактор ростаАПК – антиген-презентирующая клеткаАФК – активные формы кислорода111ВИ – врожденная инфекцияВП – врожденная пневмонияВПК – высокопоточные канюлиВЧОВЛ – высокочастотная осцилляторная вентиляция легкихИВЛ – искусственная вентиляция легкихмкАТ – моноклональное антителоОЗ – опсонизированный зимозанПР – преждевременные родыТрег – регуляторная Т-клеткаТТН – транзиторное тахипноэ новорожденныхХЛ – хемилюминесценция112Список литературы1.
Беляева, А.С. Нейтрофильные гранулоциты как регуляторы иммунитета /Беляева А.С., Ванько Л.В., Матвеева Н.К., Кречетова Л.В. // Иммунология. –2016. – Т. 37, № 2. – С. 129-133.2. Бениова, С.Н. Механизмы иммунной адаптации у новорожденных детейпри внутриутробных пневмониях / С.Н. Бениова, М.С. Полякова, О.В.Невмержицкая, Н.П. Блохина, М.Г. Шегеда // Медицинская иммунология. – Т.10, № 4-5 – С. 473-4763. Боконбаева, С.Д. Этиологическая структура врожденных пневмоний /С.Д.
Боконбаева, С.Т. Нуржанова, А.А. Какеева // Вестник Кыргызскороссийского славянского университета. – 2015. – Т. 15, № 4. – С. 26-28.4. Бородин, Е.А. Провоспалительные цитокины в крови новорожденных,подростков и взрослых / Е.А. Бородин, Т.В. Заболотских, М.В. Харченко, Н.А.Лукашова // Амурский медицинский журнал. – 2016. – № 13. – С. 52-56.5.
Володин, Н.Н. Роль про- и противовоспалительных цитокинов виммунной адаптации новорожденных детей / Н.Н. Володин, М.В. Дегтярева,А.С. Симбирцев, А.Ю. Котов, Л.В. Ковальчук, Л.В. Ганковская, В.В. Долгов,А.А. Липагина, Г.А. Асмолова, К.К. Бахтикян, Е.М. Карачунская, И.Г.Солдатова, О.В. Полякова // International Journal on immunorehabilitation. – 2000.– Т. 2, № 1, С. 175-185.6. Долгих,Т.И.Иммунофенотипированиелимфоцитовкровиноворожденных детей различного срока гестации с внутриутробной инфекцией/ Т.И. Долгих, М.В. Шелев, Э.В. Нестеренко, Т.Н.