Диссертация (1174188), страница 15
Текст из файла (страница 15)
8.86Таблица 8.Содержание (г/л) IgG и IgM в пуповинной и периферической кровинедоношенных новорожденных, г/л.ПоказательПодгруппа 1а, n=12Подгруппа 1б, n=15Рв пуповинной кровиIgM0,09±0,040,08±0,070,77IgG6,9±2,055,5±0,910,04в периферической венозной кровиIgM0,1±0,070,13±0,170,62IgG6,1±1,155,3±1,050,07Примечание: подгруппа 1а – недоношенные новорожденные без признаковинфекции, группа 2 – здоровые доношенные детиКоличество IgG в плазме пуповинной крови недоношенных детей сврожденной пневмонией было статистически значимо ниже, чем у детей безпризнаков инфекции. Активное проникновение IgG через плаценту происходитв третьем триместре беременности, поэтому содержание иммуноглобулиновэтого класса в пуповинной крови напрямую зависит от гестационного возрастаребенка.
По-видимому, более низкое количество IgG у детей из 1б подгруппыобъясняется меньшим гестационным возрастом. Значимых межгрупповыхразличий в содержании иммуноглобулинов классов G и M в плазмепериферической венозной крови выявлено не было (P>0,05), что согласуется сданными литературы [119].3.3.3. Цитокиновый статус недоношенных детей при рождении ина 3 сутки жизниВ табл.
9 представлены результаты определения провоспалительных ипротивовоспалительных цитокинов в плазме пуповинной и периферическойвенозной крови недоношенных детей без признаков инфекции и с врожденнойпневмонией.87Таблица 9.Содержание (пг/мл) провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в крови недоношенныхноворожденных, Ме (25-й – 75-й процентили)тельныепротивовоспали-провоспалительныеПоказательПодгруппа 1а, n=12пуповиннаяпериферическаяПодгруппа 1б, n=15пуповиннаяпериферическаяP п/гр.1а-п/гр.1бпуп.периф.IFNγ43,0 (17,72-78,97)91,5 (37,82-119,43)100,1 (47,26-140,92)24,6 (17,72-37,82) **0,0080,0042IL-1b2,7 (1,81-3,74)3,3 (2,47-4,65)4,3 (30,5-5,69)2,2 (1,81-2,91) *0,0100,020IL-613,9 (8,58-17,56)16,8 (11,7-35,89)25,3 (17,56-32,13)22,1 (12,06-58,90) **0,0210,430IL-127,0 (2,45-13,90)17,8 (5,34-30,20)21,7 (6,88-47,18)3,1 (1,13-6,88) **0,0400,012IL-21,8 (0,56-7,26)5,1 (2,02-8,48)12,5 (4,55-16,90)0,5 (0,47-2,23) **0,0040,039IL-90,9 (0,71-1,08)2,1 (0,66-6,35)5,7 (0,71-10,30)0,7 (0,34-0,86) **0,0570,048IL-153,1 (1,70-10,44)7,1 (4,78-11,75)12,4 (10,98-14,24)5,6 (2,48-10,57) **0,0080,69TNFα43,3 (16,17-88,42)57,0 (17,66-110,35)119,9 (55,81-211,68)17,8 (7,53-27,79) **0,0230,086IL-40,9 (0,16-3,52)2,2 (0,40-4,65)4,4 (1,75-6,54)0,2 (0,14-0,87) **0,0120,016IL-54,8 (1,50-7,60)7,6 (3,61-12,25)14,9 (3,61-16,64)3,2 (1,15-4,77) **0,0080,041IL-102,9 (1,65-5,65)7,5 (2,86-16,87)13,3 (10,50-24,01)4,7 (2,87-9,31)0,00030,470IL-134,6 (3,46-6,32)5,3 (4,04-6,74)7,2 (4,84-9,66)3,8 (3,65-4,63) **0,0180,072157,1 (76,32-259,30) *198,0 (105,25-230,72)109,2 (56,51-298,30)0,0080,830IL-1Ra 80,2 (20,04-143,78)Примечание: п/гр.1а – подгруппа 1а, п/гр.1б – подгруппа 1б* – Р<0,05, ** – Р<0,01 по сравнению с соответствующими показателями в пуповинной крови88У недоношенных детей с врожденной пневмонией (подгруппа 1б) былодостоверно повышено содержание ряда про- и противовоспалительныхцитокинов в плазме пуповинной крови по сравнению с соответствующимипоказателями у детей сходного гестационного возраста без признаковинфекции (подгруппа 1а).
Поскольку экспрессия большинства цитокиновначинаетсявпредположить,ответчтонаинфекциюзаражениеилидетейповреждениеиз1бтканей,подгруппыможнопроизошловнутриутробно.Анализсодержанияисследуемыхцитокиноввпуповиннойипериферической крови одних и тех же новорожденных показал, что к 3 суткамжизни в подгруппе недоношенных детей без признаков инфекции повышаетсясодержание IL-1Ra (P=0,03).
Данный антагонист рецептора IL-1 блокируетдействие провоспалительного цитокина IL-1, результатом чего являетсяуменьшение выраженности воспалительных реакций, опосредованных даннымцитокином.В 1б подгруппе недоношенных детей с врожденной пневмониейсодержание IFNγ, IL-1b, IL-6, TNFα, IL-12, IL-13, IL-4 в плазме периферическойкрови существенно ниже уровня данных цитокинов в пуповинной крови(Р˂0,01). Отношение TNFα к IL-4 (Р˂0,05) и IFNγ к IL-4 (Р˂0,01) у детей из 1бподгруппы достоверно выше на 3 сутки жизни, чем при рождении.
Наряду собнаруженной прямой корреляционной зависимостью средней силы междууровнем С-реактивного белка и содержанием IL-6 в плазме периферическойкрови детей в этом возрасте (r=0,58 Р=0,036), это может свидетельствовать оналичии воспаления и более выраженном Th1 иммунном ответе недоношенныхдетей с врожденной пневмонией.При сравнении содержания цитокинов в плазме периферической кровидетей в возрасте 3 суток было выявлено, что в 1б подгруппе уровень IFNγ, IL1b,IL-12,IL-2,соответствующимиIL-9,IL-4,показателямиIL-5узначимониженедоношенныхпосравнениюсноворожденныхсдыхательными нарушениями неинфекционного генеза (подгруппа 1а).89В регуляции воспалительного ответа принимают участие хемокины,контролирующие миграцию различных типов клеток в воспалительный очаг.Действие хемокинов является избирательным.
Нами было оценено содержаниеIL-8, MIP-1a, MIP-1b, MCP, IP-10 и Eotaxin в плазме крови недоношенныхдетей при рождении и в возрасте 3 суток (рис. 17).АEotaxin *БIL-8 **43210EotaxinMCP *1,5IL-810,5MCP0MIP-1bIP-10MIP-1bMIP-1a *IP-10MIP-1aРисунок 17. Сравнение содержания хемокинов в плазме пуповинной (А) ипериферической венозной (Б) крови недоношенных новорожденныхКрасным цветом показано отношение уровня цитокинов в плазме кровидетей с врожденной пневмонией к уровню цитокинов в плазме крови детей безпризнаков инфекции, синим – равенство значений.* - Р<0,05; ** - Р<0,01В пуповинной крови недоношенных детей с пневмонией содержание IL-8,MCP-1, MIP-1a и Eotaxin выше, чем у детей с дыхательными нарушенияминеинфекционного генеза.
Не обнаружено значимых различий в содержанииисследуемых хемокинов в периферической крови детей на 3 сутки жизни(Р>0,05).В периферической венозной крови недоношенных новорожденных безпризнаков инфекции содержание хемокинов IL-8 и IP-10 значимо выше, чем впуповинной(Р<0,05).Впроцессеисразупослерожденияребенкаустанавливается тесный контакт стерильного организма новорожденного сэкзогенными антигенами. Взаимодействие микроорганизмов со слизистымиоболочками приводит к активации эпителиальных, иммунных и других клеток,повышению миграционной активности лейкоцитов, что связано с заселением90ими барьерных тканей.
Данные процессы сопровождаются усилением синтеза исекреции цитокинов и хемокинов. Уровень исследуемых хемокинов прирождении и на 3 сутки жизни детей с врожденной пневмонией значимо неразличался (Р>0,05).Анализ содержания (пг/мл) ростовых факторов в плазме кровинедоношенных детей выявил существенно более высокий уровень FGF-basic,GM-CSF, IL-7 и PDGF-bb в пуповинной крови детей с врожденной пневмониейпо сравнению с новорожденными без признаков инфекции (рис.
18).АPDGF-bb *IL-7 *FGF-basic**121086420FGF-basic *10,80,60,40,20БG-CSFGM-CSF *PDGF-bb *IL-7G-CSFGM-CSFРисунок 18. Сравнение содержания ростовых факторов в плазмепуповинной (А) и периферической венозной (Б) крови недоношенныхноворожденныхКрасным цветом показано отношение уровня цитокинов в плазме кровидетей с врожденной пневмонией к уровню цитокинов в плазме крови детей безпризнаков инфекции, синим – равенство значений.* - Р<0,05; ** - Р<0,01Высокая концентрация тромбоцитарного фактора роста (PDGF) в кровиноворожденных из 1б подгруппы может быть обусловлена тем, что течениеврожденной пневмонии у детей сопровождается проявлением признаковвоспалительной реакции, а PDGF участвует в регуляции процессов остроговоспаления.Обращает на себя внимание тот факт, что уровень VEGF в плазмепуповинной крови детей с врожденной пневмонией (подгруппа 1б) был более,чем в 60 раз, выше, чем у новорожденных без признаков инфекции (P=0,025).91Синтез и секреция данного цитокина, обладающего мощным ангиогеннымдействием, во многом регулируется гипоксией.
Поскольку новорожденные изподгруппы 1б имели более выраженную степень асфиксии при рождении,можно предположить, что высокая концентрация VEGF в их пуповинной кровиявляется компенсаторным механизмом для увеличения оксигенации тканей засчет формирования новых сосудов. По данным ряда авторов, VEGF и PDGFявляются маркерами сепсиса у взрослых доноров [120].При сравнении содержания FGF-basic, GM-CSF, PDGF-bb и VEGF вплазме пуповинной и периферической венозной крови недоношенных детейбыло определено, что у детей с врожденной пневмонией содержание данныхростовых факторов существенно ниже на 3 сутки жизни, чем при рождении(Р<0,05 во всех случаях). Содержание исследуемых ростовых факторов вплазме пуповинной и периферической крови новорожденных без признаковинфекции значимо не различалось (Р>0,05).Таким образом, у недоношенных детей с пневмонией при рожденииотмечаются признаки активации иммунной системы: повышенное содержаниеCD16+ моноцитов и NKT-клеток, высокая экспрессия высокоаффинного FcγRIна нейтрофильных гранулоцитах, существенно более высокое содержаниеростовых факторов, хемокинов, провоспалительных и противовоспалительныхцитокинов в плазме пуповинной крови.
С другой стороны, малый гестационныйвозраст детей из данной подгруппы обусловливает низкое содержаниеиммуноглобулинов класса G в сыворотке пуповинной крови, недостаточнуюпродукциюкислородныхрадикаловфагоцитами,отражающуюнизкуюбактерицидную активность, что может быть причиной затяжного течениявоспалительного процесса.В течение первых дней после рождения у новорожденных без признаковинфекции повышается антиген-распознающий потенциал, поглотительнаяактивность клеток врожденного иммунитета, увеличивается содержание Трегуляторных и Т-хелперных клеток и ряда хемокинов, что может быть связанос активным заселением барьерных тканей иммунными клетками.92Изменения иммунной системы недоношенных детей с врожденнойпневмонией в это время носят противоположный характер: снижаетсясодержание патоген-распознающих нейтрофилов и антиген-презентирующихмоноцитов, CD16+ и NK-клеток. Значительно возрастает функциональнаяактивностьнейтрофильныхгранулоцитов,выражающаясявусилениипродукции активных форм кислорода.
На Т-клетках повышается экспрессиярецептора к ростовому фактору IL-2. Усиление экспрессии CD95 налимфоцитах наряду с нарастанием содержания В-лимфоцитов памяти можетбыть признаком дифференцировки и «обучения» иммунной системы, однакопреобладание клеток памяти, в которых не произошло переключения классовиммуноглобулинов,можетсвидетельствоватьонизкойэффективностигуморального ответа при повторном инфицировании. Существенное снижениеконцентрациипровоспалительных,противовоспалительныхцитокиновиростовых факторов в крови недоношенных детей с врожденной пневмониейможет служить признаком истощения секреторного потенциала клетокиммунной системы.93Глава IV. Обсуждение полученных результатовВ результате проведенного нами комплексного иммунологическогообследования здоровых доношенных новорожденных и недоношенных детейвыявлены особенности клеточного и гуморального звеньев иммунной системыдетей при преждевременном рождении.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
