Диссертация (1154746), страница 11
Текст из файла (страница 11)
7).23Печень0,8+0,6*0,40,20123Рис. 7 Активность ФМСФ-КП в здоровых тканях (n = 11),доброкачественных и злокачественных новообразованиях кишечника (n= 12 и 14 соответственно), желудка (n = 16 и 16 соответственно),молочной железы (n = 12 и 15 соответственно), почек (n = 12 и 11соответственно), легких (n = 11 и 11 соответственно) и печени (n = 11 и 13соответственно) человека.721 – здоровые ткани, 2 – доброкачественные новообразования, 3 –злокачественные новообразования, M ± m; * – р < 0,001 по сравнению создоровыми тканями, + – р < 0,01, ++ – р < 0,001 по сравнению сдоброкачественными опухолями.По результатам эксперимента показано, что активность ФМСФ-КПдостоверно выше в злокачественных новообразованиях молочных желез,желудка,кишечника,почекипечени,чемвдоброкачественныхновообразованиях в этих же органах.Активность КПЕ и ФМСФ-КП была существенно выше во всех типахзлокачественных новообразований, чем в фиброзах. Активность данныхкарбоксипептидаз в клетках доброкачественных опухолей достаточно низкая,в то время как в раковых клетках она достигает уровня активностисекреторных клеток.Полученные по карбоксипептидазам данные вносят большой вклад вфундаментальные сведения о роли основных карбоксипептидаз, посколькуактивность этих ферментов ранее не изучалась в раковых клетках почек,желудка, кишечника и легких человека.
Распределение активности ФМСФКП впервые изучено в тканях человека, ранее она изучалась только в тканяхживотных.В отличие от КПЕ, которая присутствует в соматических органах вследовых количествах, активность ФМСФ-КП более высокая и достигаетзначений КПЕ некоторых секреторных отделов головного мозга инадпочечников [35].
Это может согласовываться с высказанными ранеепредположениями о более широких функциях ФМСФ-КП, распределениеактивности которой у крыс соответствует интенсивности обмена белка ворганах и тканях [71, 23].Таким образом, ФМСФ-КП – фермент с широким спектром активности,однако, в отличие от других ферментов обмена регуляторных пептидов, егобиологическая роль изучена недостаточно полно.73РезультатыдисперсионногоанализаактивностиФМСФ-КПвисследуемых образцах представлены в таблицах 10-11.Таблица 10.
Дисперсионный анализ активности ФМСФ-КП вздоровых тканях и новообразованиях органов человека (значенияотношения Фишера Fф).*Исследуемый органFфкишечник17,02**желудок14,25**молочная железа18,8**почки15,7**легкие11,0*печень8,75*p<0,01, ** p<0,001Таблица 11. Постдисперсионный анализ Шеффе активностиФМСФ-КП в здоровых тканях и новообразованиях органов человека(величина критерия Шеффе Fш в порядке сравнения Ньюмена-Кейлса).Исследуемый органFш2-13-23-1кишечник16,27**22,3**25,45**желудок19,75**29,0**29,5**молочная железа15,4**13,75**16,03**почки13,75**14,25**16,08**легкие14,5**3,014,0**печень14,0**4,9**14,7**p<0,05, ** p<0,00174кишечникАжелудокмолочнаяжелеза18%24%12%почки14%11%легкие21%печеньБ17%17%17%16%16%17%4%6% 15%7%11%57%Рис.
8. Активность ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы вздоровых тканях (А), доброкачественных (Б) и злокачественных (В)новообразованиях753.5. Изучение активности пептидил-дипептидазы А0,8*0,60,40,200,82*0,40,20120,8*0,60,40,20120,40,20132Почки0,83++*0,60,40,2013Легкие++*0,61Молочная железа0,6Желудок0,83нмоль/мин на мг белканмоль/мин на мг белка1нмоль/мин на мг белка+1нмоль/мин на мг белкаКишечникнмоль/мин на мг белканмоль/мин на мг белка123Печень0,8*0,60,40,20123Рис. 9.
Активность пептидил-диптидазы А в здоровых тканях (n =11),доброкачественныхизлокачественныхновообразованияхкишечника (n = 12 и 14 соответственно), желудка (n = 16 и 16соответственно), молочной железы (n = 12 и 15 соответственно), почек (n= 12 и 11 соответственно), легких (n = 11 и 11 соответственно) и печени (n= 11 и 13 соответственно) человека.1 – здоровые ткани, 2 – доброкачественные новообразования, 3 –злокачественные новообразования, M ± m; * – р < 0,001 по сравнению создоровыми тканями, + – р < 0,01, ++ – р < 0,001 по сравнению сдоброкачественными опухолями.76Активностьпептидил-дипептидазыАвзлокачественныхновообразованиях была выше в кишечнике, желудке и почках по сравнениюс доброкачественными опухолями этих органов (рис.
9). При сравнениидоброкачественных и злокачественных новообразований молочной железе,легких и печени не выявлено изменений в активности исследованногофермента.Таблица12.Дисперсионныйанализактивностипептидил-дипептидазы А в здоровых тканях и новообразованиях органов человека(значения отношения Фишера Fф).*Исследуемый органFфкишечникжелудокмолочная железапочкилегкиепечень16,25**15,4**13,9**15,5**10,0*13,2**p<0,01, ** p<0,001Таблица 13. Постдисперсионный анализ Шеффе активностиипептидил-дипептидазы А в здоровых тканях и новообразованияхорганов человека (величина критерия Шеффе Fш в порядке сравненияНьюмена-Кейлса).Исследуемый органкишечникжелудокмолочная железапочкилегкиепечень*2-114,8***17,2***14,6***14,35***15,55***15,05***Fш3-29,9**15,3***3,215,0***2,41,93-117,05***18,5***15,1***18,75***16,2***15,78*p<0,05, ** p<0,01, *** p<0,001Данные дисперсионного анализа активности ПДА в исследуемыхобразцах представлены в таблицах 12-13.77Акишечникжелудок17%14%молочная железа16%17%22%14%почкилегкиепеченьБ17%14%16%18%15%17%16%17%17%21%18%14%Рис.
10. Активность пептидил-диптидазы А в здоровых тканях (А),доброкачественных(Б) и злокачественных новообразованиях783.6. Изучение активности лейцин-аминопептидазыВ злокачественных новообразованиях всех исследуемых органовактивность лейцинаминопептидазы была выше, чем в доброкачественныхопухолях: в молочной железе – более чем в два раза, в кишечнике, желудке ипочках – более чем на 80 %, легких и печени – на 60 % (рис. 11).Результаты дисперсионного анализа активности ЛАП в исследуемыхобразцах представлены в таблицах 11-12.Повышениеактивностипептидил-дипептидазыАилейцинаминопептидазы, наблюдаемое в злокачественных новообразованиях,выражено не так существенно, как для катепсина D, кислых протеаз, КПЕиФМСФ-КП, что может указывать на значительно меньший диапазон участияданных ферментов в механизмах канцерогенеза.
Поскольку ПДА и ЛАПобладаютширокойограничиватьсясубстратнойучастиемвспецифичностью,функциональноихрольможетактивированномобщемметаболизме пептидных молекул и цитоплазматическом этапном протеолизе.Кроме того, пептидил-дипептидаза А и лейцинаминопептидаза являютсяодними из ключевых ферментов, контролирующих уровни активных формпептидов с ангиогенным действием, таким образом, непосредственноучаствуя в процессе роста злокачественной опухоли. При этом отсутствиеповышения активности ПДА в легких и печени человека соотносится сданными о том, что ангиогенез в опухолях данных органов, как правило, неиграет ключевой роли в процессах развития новообразования по сравнению сдругими органами [107].79нмоль/мин на мг белка*0,40,200,82*0,40,2012*0,40,20120,102Почки33++0,6*0,40,201++0,60,23Легкие0,80,30,8+++*0,41Молочная железа0,6Желудок0,53нмоль/мин на мг белканмоль/мин на мг белка+0,61нмоль/мин на мг белка0,6Кишечникнмоль/мин на мг белканмоль/мин на мг белка0,823Печень0,8+0,6*0,40,20123Рис.
11. Активность лейцинаминопептидазы в здоровых тканях (n =11),доброкачественныхизлокачественныхновообразованияхкишечника (n = 12 и 14 соответственно), желудка (n = 16 и 16соответственно), молочной железы (n = 12 и 15 соответственно), почек (n= 12 и 11 соответственно), легких (n = 11 и 11 соответственно) и печени (n= 11 и 13 соответственно) человека.1 – здоровые ткани, 2 – доброкачественные новообразования, 3 –злокачественные новообразования, M ± m; * – р < 0,001 по сравнению создоровыми тканями, + – р < 0,01,доброкачественными опухолями.++ – р < 0,001по сравнению с80Таблица14.Дисперсионныйанализактивностилейцинаминопептидазыв здоровых тканях и новообразованиях органовчеловека (значения отношения Фишера Fф).*Исследуемый органFфкишечник14,3*желудок14,7*молочная железа13,95*почки14,55*легкие15,0*печень13,95*p<0,001Таблица 15.
Постдисперсионный анализ Шеффе активностилейцинаминопептидазы в здоровых тканях и новообразованиях органовчеловека (величина критерия Шеффе Fш в порядке сравнения НьюменаКейлса).Исследуемый орган*Fш2-13-23-1кишечник15,0**8,8*19,15**желудок16,45**14,93**18,95**молочная железа15,7**9,5*17,3**почки14,6**15,1**19,1**легкие15,0**14,8**18,85**печень13,95**10,0*16,85**p<0,01, ** p<0,00181Акишечникжелудок19%15%молочная железа15%почки19%15%17%легкиепеченьБВ17%16%16%17%16%17%17%17%18%17%15%17%Рис. 12. Активность лейцинаминопептидазы в здоровых тканях (А),доброкачественных (Б) и злокачественных (В) новообразованиях823.7.
Корреляционный анализ активности кислых протеаз, катепсинаD,карбоксипептидазыЕ(КПЕ),ФМСФ-ингибируемойкарбоксипептидазы (ФМСФ-КП), пептидил-дипептидазы А (ПДА) илейцинаминопептидазы (ЛАП) в злокачественных новообразованияхмолочной железы, желудка, кишечника, почек, печени и легкихчеловекакислые протеазыкатепсин DКПЕФМСФ-КПЛАППДАРис. 13.
Результаты корреляционного анализа активности кислыхпротеаз,катепсинаD,карбоксипептидазыЕ(КПЕ),ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы (ФМСФ-КП), пептидил-дипептидазыА(ПДА)илейцинаминопептидазы(ЛАП)взлокачественныхновообразованиях молочной железы, желудка, кишечника, почек,печени и легких человека. Здесь:всем исследованным органам.четырем и более органам.- положительная корреляция по- положительная корреляция по83ПовышениеактивностикислыхпротеазикатепсинаDвзлокачественных новообразованиях сопровождается ростом корреляционныхсвязейсактивностьюкарбоксипептидазыЕ,ФМСФ-ингибируемойкарбоксипептидазы, пептидил-дипептидазы А и лейцинаминопептидазы(рис.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
