Автореферат (1154727), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Доказана эффективность использованиядопплерометрии только маточных артерий как достоверного критерия эффективностипроведенной терапии, что значительно упрощает и удешевляет диагностический поиск.Обоснованацелесообразность(лимфоцитысфенотипомдинамическогоCD16+,CD56+,определенияCD20+,факторовCD138+,авоспалениятакжеклетки,экспрессирующие HLA-DR) в процессе лечения для оценки эффективности проведеннойтерапии.Научно обосновано использование комплексного физиотерапевтического лечения приХЭ. Разработан и внедрен в практическое здравоохранение результативный алгоритм6ведения пациенток с ХЭ после повторных НБ, позволяющий ускорить сроки реабилитации в2,0 раза (р<0,05), добиться восстановления репродуктивной функции у 93,3% (р<0,05) изавершить беременность срочными родами у 91,1% женщин.Методология и методы исследования.
Работа выполнена в период 2011–2016 гг. наклинической базе кафедры акушерства и гинекологии института последипломногообразования ГБОУ ВПО Кировская ГМА Минздрава России (зав. кафедрой — д.м.н., доцентХлыбова С.В.) – КОГБУЗ «Северная городская клиническая больница» (гл. врач – к.м.н.Ефремов Д.Н.).В ходе исследования обследованы и пролечены 97 пациенток с НБ в I триместре,заинтересованных в продолжении репродуктивной функции.Все пациентки были стратифицированы на 3 группы в зависимости от количества НБв анамнезе: первую группу (n=45), составили пациентки, имевшие в анамнезе три и более НБ(46,4%); вторую группу (n=41), составили пациентки, имевшие в анамнезе две НБ (42,3%);третью группу (n=11), составили пациентки, имевшие в анамнезе одну НБ (11,3%).Критерии включения: репродуктивный возраст (18–45 лет); наличие в анамнезе НБ в Iтриместре (в сроке до 12 недель); морфологически верифицированный ХЭ по даннымгистологического исследования; информированное добровольное согласие пациентки навыполнение всех необходимых лечебно-диагностических мероприятий.Критерии исключения: аденомиоз; тяжелые экстрагенитальные заболевания (в томчислекоагулопатии);острыеинфекционныезаболевания(втомчислеОРВИ);онкологические заболевания; туберкулез; болезни эндокринной системы, нарушения питанияи обмена веществ.Программаисследованиявключалаклинико-анамнестическоеобследование,лабораторные и инструментальные исследования (Рисунок 1).На каждую женщину заполняли статистическую карту.
Анализировали жалобыпациенток, возраст на момент обследования, экстрагенитальные заболевания, перенесенныегинекологические заболевания и оперативные вмешательства.Изучали характер менструальной (возраст менархе, особенности менструальногоцикла) и репродуктивной функций (паритет, течение и исход предыдущих беременностей).Проводили общий осмотр, стандартные клинико-лабораторные исследования в соответствиис медико-экономическими стандартами.Всем женщинам, включенным в исследование, были выполнены гистероскопия,гистологическое и иммуногистохимическое исследование биоптатов из полости матки,ультразвуковоеисследование(УЗИ)органовмалоготаза,допплерометрия,бактериологическое исследование содержимого цервикального канала, определение белкаАМГФ в менструальной крови.Забор биоптата для верификации ХЭ выполняли на 7-11 день менструального цикла(МЦ).Гистологическое исследование производили до и после окончания терапии, проводя7пайпель-биопсию эндометрия с помощью урогенитального зонда типа С (Пайпель) послеписьменного согласия пациентки.
Образцы эндометрия фиксировали 10% растворомформалина в течение 24 часов.Пациентки с НБ в анамнезе (n=97)Гистероскопия и гистологическое исследование биоптата из полости матки (n=97)Пациентки с НБ в анамнезе и верифицированным ХЭ (n=97)I группа – 3 и более НБ (n=45)II группа– 2 НБ (n=41)III группа – 1 НБ (n=11)Клинико-анамнестическое обследование (n=97):Анкетирование (n=97)Объективное исследование (n=97)Общеклиническое исследование (общий анализ крови, мочи, биохимический анализ крови,коагулограмма)Ультразвуковое и допплерометрическое исследование (n=97)Исследование АМГФ менструальной крови (n=97)+ Иммуногистохимическое исследование (n=86)Комплексное аппаратное ФТЛв провокационном режиме (n=45)Бактериологическое исследование содержимого цервикального канала и полости маткидля определения показаний к антибактериальной терапии (n=97) и терапия с учетомрезультатовКомплексное аппаратное ФТЛв лечебном режиме +гормонотерапия (n=45)Гормонотерапия (n=52)Сравнительная характеристика показателей:Ультразвукового и допплерометрического исследования (n=97)Количества АМГФ менструальной крови (n=97)Оценка морфологии биоптата (n=97)Оценка результатов иммуногистохимического исследования (n=86)Оценка репродуктивной функции: частота наступления беременности и ее исходы (n=97)Рисунок 1 — Программа исследованияВ дальнейшем использовали полученные после соответствующей обработки серийныепарафиновые срезы, окрашенные гематоксилин-эозином.
Для верификации диагноза ХЭприменяли стандартизованные морфологические критерии: наличие воспалительных8инфильтратов, наличие в инфильтратах плазматических клеток, очаговое фиброзированиестромы эндометрия, склеротические изменения стенок спиральных артерий эндометрия(Ахметов Ж.Б., 2012; Kitaya К. et al., 2014).Исследования факторов воспаления в биоптатах эндометрия у пациенток свыявленными нарушениями кровотока в маточном древе (n=45) проводили в лабораторииклиники «Мать и дитя Санкт-Петербург» (гл.
врач — к.м.н. Феоктистов А.А.). В биоптатеоценивали субпопуляционный состав лимфоцитов с фенотипами CD16+, CD56+, CD20+ иCD138+ и клеток, экспрессирующих антиген HLA-DR. Исследование фенотипическогосостава лимфоцитов в эндометрии выполняли иммуногистохимическим методом сиспользованием моноклональных антител фирмы «Novocastrа» (Великобритания), подсчетлимфоцитов производили в световом микроскопе при увеличении × 400 в трех полях зрения.Для количественного определения АМГФ у всех пациенток, включенных висследование, осуществляли забор менструальной крови на 2-3 день менструального цикла(МЦ) в сухую пробирку-эвакуэту и доставляли в лабораторию КОГБУЗ «Северная городскаяклиническаябольница».КонцентрациюАМГФопределялитвердофазнымиммуноферментным анализом, который включает иммунологическую реакцию антигенантитело по сэндвич-принципу и ферментативную реакцию.Для оценки количественного и качественного состава микрофлоры цервикальногоотделяемого материал получали с помощью специального стерильного урогенитальногозонда со щеточкой.
Зонд на 1,0-1,5 см вводили в цервикальный канал, осторожно ротировалипо часовой стрелке на 360°, извлекали, не допуская контакта со стенкой влагалища. Биоптатиз полости матки, полученный во время гистероскопии, также был исследован на составмикрофлоры.МатериалыпомещаливспециальныетранспортныеконтейнерыTRANSYSTEM AMIES W/O CH (производитель компания TRANSYSTEM, США). Влаборатории клинической бактериологии (КОГБУЗ «Северная городская клиническаябольница») производили посев материала на серию питательных сред для определенияразличных групп микроорганизмов: маннитсолевой агар для выделения стафилококков, 5%кровяной агар на основе бруцеллезного агара с добавлением витаминных ростовых факторовдля выделения анаэробов, среду Сабуро для выделения грибов, среду Левина для выделенияграмотрицательных бактерий.
Для культивирования анаэробов использовали анаэростатыфирмы «BectonDickinson» (США). Среды с кровяным агаром культивировали в термостате сповышенным содержанием углекислого газа (5-10%). Идентификацию микроорганизмов иопределениеихчувствительностикантибиотикампроводилиспомощьюбактериологического анализатора «Vitek» (производитель BioMerieux, Россия).
Учетрезультатов проводили по стандартам Национального комитета по клиническим илабораторным стандартам США (NCCLS) (1999–2000 г.). Отрицательным считали результатпри отсутствии роста на всех питательных средах в течение 72–96 часов.9Для диагностики методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) материал изцервикального канала получали с помощью стерильного урогенитального зонда, после чегоего помещали в специальную пробирку типа «Эппендорф» с транспортным раствором идоставляливлабораторию,гдепроводиливыявлениеоблигатно-патогенныхмикроорганизмов (Chlamydia trachomatis, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma genitalium иNeisseria gonorrhoeae).УЗИ органов малого таза, ЦДК и допплерометрию сосудов матки (n=97) проводилина стационарной ультразвуковой системе «MyLab 50» (Esaote S.p.A., Италия) на 7-11 деньМЦ и в период «окна имплантации».