Диссертация (1154691), страница 12
Текст из файла (страница 12)
Также6162обнаруживаются менее 40% неизмененных и менее 15% регенерирующихнервных волокон.Рисунок 6 – Морфологические препараты проксимального отдела седалищногонерва через 21 сутки после нейрорафии: А – малое увеличение (Объектив - 10х);Б– большое увеличение (Объектив – 40х)В дистальном отделе седалищного нерва среднее количество нервныхволокон статистически значимо снижается (р=0.000001) и составляет 33 (28; 35) вполе зрения при увеличении 1000.
Дистрофированных волокон обнаруживается всреднем 23 (20; 26), регенерирующих волокон – 9 (6; 13). Полностью отсутствуютнеизмененные нервные волокна (рис. 7Б).6263Рисунок 7 – Морфологические препараты дистального отдела седалищного нервачерез 21 сутки после нейрорафии: А – малое увеличение (Объектив – 10х);Б– большое увеличение (Объектив – 40х)Таким образом, при исследовании препаратов седалищного нерва группысравнения было установлено, что к 21-м суткам в оперированном нерве среднееколичество нервных волокон в дистальном отделе значимо ниже, чем впроксимальном.Длядистальногоотделахарактернополноеотсутствиенеизмененных волокон. Также отмечается увеличение доли дистрофированныхволокон от общего количества с 45% в проксимальном отделе до 70% – вдистальном.
Имеющийся характер морфологических изменений свидетельствуето выраженных дегенеративных процессах, развивающихся в оперированномнерве, как в проксимальном, так и в дистальном его отделах. При этом болееинтенсивно данные процессы протекают в дистальном отделе.Результаты проведенных исследований позволяют заключить, что приперерезке и нейрорафии седалищного нерва у животных развивается комплекстрофических и двигательных морфофункциональных нарушений.
Трофическиенарушения характеризуются появлением отеков на стопах оперированныхконечностей, выпадением волос в нижней трети голени, изъязвлениями на коже.При инструментальном исследовании обнаруживается снижение перфузии кожи6364оперированной конечности с максимально выраженное на 14-е сутки. Такжеснижение перфузионного показателя сопровождается повышением нейрогенноготонуса и угнетением эндотелиальной вазодилататорной функции. Полученныеданные характеризуют развитие денервационной гиперчувствительности сосудову животных после перерезки и нейрорафии седалищного нерва.Нарушения нервно-мышечной передачи, возникающие после оперативноговмешательства, приводят к выраженному ограничению двигательной функциипроявляющееся тем, что животные, ограничивают опору на конечность.ЭНМГ-исследование параметров свидетельствует, что частичное восстановлениепроводимостиОтсутствиечереззонунейрорафииМ-ответапристимуляции,происходитксвидетельствует21-мобсуткам.отсутствиисинаптических контактов регенерировавших волокон.Данныеисследованиягистологическихпрепаратовсоответствуютрезультатам функциональных тестов и свидетельствуют, что в оперированномнервесреднееколичествонервныхволоконзначимоснижаетсяотпроксимального к дистальному отделу.
Как в проксимальном, так и в дистальномотделе наблюдается большое количество дистрофически измененных нервныхволокон, при относительно малом числе регенерирующих нервных волокон, чтосвидетельствует об одновременно протекающих регенеративно-дегенеративныхпроцессах, с преобладанием дегенерации.64653.2 Изменение микроциркуляторных, электронейромиографических иморфологических показателей у крыс после нейрорафии седалищного нервапри аутотрансплантации полнослойного кожного лоскутав межлопаточной областиПри АТКПЛ в межлопаточной области, выполненной одновременно снейрорафией седалищного нерва у животных на 21-е сутки экспериментаотмечались аналогичные группе сравнения трофические и двигательныенарушения в оперированной конечности.
Однако, степень выраженноститрофических нарушений, в частности, изъязвлений на коже снижалась инаблюдались только в 20% случаев.3.2.1 Изменения микроциркуляторных показателей на фоне нейрорафииседалищного нерва при аутотрансплантации полнослойного кожноголоскута в межлопаточной области [А.Н. Иванов и др., 2016а]В связи с тем, что при пересечении и последующей нейрорафииседалищного нерва у крыс микроциркуляторные показатели на 7-е и 14-е сутки непретерпевают существенных динамических изменений, а максимальное снижениеперфузионного показателя, характеризующего общее угнетение кровообращения,происходит на 14-е сутки, у животных данной группы регистрация ЛДФ-граммосуществлялась на 14-е и 21-е сутки эксперимента.При анализе микроциркуляторных показателей было установлено, что на14-е сутки перфузионный показатель достоверно выше, чем аналогичныйпоказатель группы сравнения и не имеет отличий от контрольных значений.Регистрируется статистически значимое повышение нормированных амплитудэндотелиальных колебаний, отличающихся как от значений группы сравнения,так и от контрольных показателей.
При этом нормированные амплитудынейрогенных колебаний отличий от контроля не имеют, и значимо вышеаналогичных показателей в группе сравнения. Нормированные амплитудымиогенных колебаний на 14-е сутки после оперативного вмешательства снижены6566относительно контроля и группы сравнения, что вероятно носит компенсаторныйхарактер и свидетельствует о перераспределении активных механизмов контролямикроциркуляции (табл. 3).Таблица 3Динамика микроциркуляторных показателей кожи тыльной поверхности стопына 14-е сутки при нейрорафии и АТПКЛГруппаПоказателиКонтроль(n=15)АТПКЛ(n=15)10.3(8.8;12.5)р1=0.158466р2=0.00036213.019.4121.78(10.33;17.93)(8.34;11.76)(17.78; 23.0)Эндотелиальныхр1=0.005960р1=0.000671р2=0.00000311.37.110.29(10.52;12.62)(5.43;7.96)(6.66; 15.82)Нейрогенныхр1= 0.000005р1=0.213375р2=0.0097866.556.834.89(5.00;7.88)(5.27;8.1)(3.49; 5.64)Миогенныхр1= 0.828468р1=0.007941р2=0.015664Примечания: в каждом случае приведены медиана, верхний и нижний квартили; p1, p2 –Нормированные амплитудыколебаний, отн.
ед.Показатель перфузии,перф.ед.11.6(10.1;13.3)Группасравнения(n=15)7.45(6.65;8.45)р1= 0.000006по сравнению с контролем и группой сравненияПерфузионный показатель у животных данной группы на 21-е суткиэксперимента достоверно выше значений группы сравнения в аналогичные сроки,при этом не имеет отличий от контроля и данных, зарегистрированных на 14-есутки. Нормированные амплитуды эндотелиальных колебаний на 21-е суткиотличий от контроля, показателей группы сравнения не имеют, и достовернониже аналогичных показателей данной группы на 14-е сутки.
Нормированныеамплитуды нейрогенных колебаний не претерпевают существенной динамики поотношению к 14-м суткам данной группы и достоверно отличаются только отгруппыживотныхснейрорафией,которым66невыполняласьАТПКЛ.67Нормированные амплитуды миогенных колебаний не имеют различий сконтрольным уровнем значений (табл. 4).Таблица 4Динамика микроциркуляторных показателей кожи тыльной поверхности стопына 21-е сутки у животных при нейрорафии и АТПКЛГруппаГруппасравнения(n=15)21 сутки8.15(7.75; 10.00)Контроль(n=15)Показатели14 сутки21 сутки10.3(8.8;12.5)11.80(9.70; 13.10)Показатель перфузии,p1=0.917411перф.ед.p2=0.000145p3=0.17764713.0111.7121.7815.41(10.33;17.93)(8.59;13.32)(17.78; 23.0)(9.13; 18.99)p1=0.589739Эндотелиальныхp2=0.080119p3=0.00323011.37.6410.2910.54(10.52;12.62)(6.80;8.58)(6.66; 15.82)(6.06; 14.09)Нейрогенныхp1=0.589739p2=0.034289p3=0.9174116.557.194.896.03(5.00;7.88)(6.47;10.32)(3.49; 5.64)(4.93; 7.11)Миогенныхp1=0.361497p2=0.010773p3=0.081496Примечания: в каждом случае приведены медиана, верхний и нижний квартили; p1, p2, p3 –Нормированные амплитудыколебаний, отн.
ед.11.6(10.1;13.3)АТПКЛ (n=15)по сравнению с контролем, с 21-ми сутками группы сравнения, с 14-ми сутками группыживотных с нейрорафией и АТПКЛ.Такимобразом,отсутствиестатистическизначимыхотличийперфузионного показателя у животных с нейрорафией и АТПКЛ на всемпротяжении экспериментальных наблюдений свидетельствует о стимулирующемдействииаутотрансплантации,препятствующейразвитиюпризнаковденервационной гиперчувствительности в сосудах микроциркуляторного руслаоперированнойконечности.Наблюдаемоеулучшениекровообращенияпроисходит благодаря изменениям в работе активных механизмов контроля6768микроциркуляции, в частности, отмечается стимуляция вазодилатирующейактивности эндотелия сосудов, наиболее выраженное на 14-е сутки эксперимента,и нормализация нейрогенного тонуса.3.2.2 Изменения электронейромиографических показателейседалищного нерва у животных на фоне нейрорафии приаутотрансплантации полнослойного кожного лоскута[И.Е.
Шутров и соавт. 2016]При ЭНМГ-тестировании седалищного нерва на 21-е сутки у животных снейрорафией иАТПКЛ регистрировались низкоамплитудныеневральныепотенциалы, составляющие не более 33,7% от нормы, но значимо выше значенийВП нерва группы сравнения. Величины ЛП ВП нерва практически не отличались.Важным отличием данной группы являлось наличие низкоамплитудногомышечного ответа, регистрируемого с икроножной мышцы при стимуляции нервавыше места пересечения. (табл. 5).Таблица 5Показатели ЭНМГ-исследования седалищного нерва на 21-е сутки у животныхна фоне нейрорафии при АТПКЛПоказателиЛП нерва(мс)АмплитудаВП нерва(мкв)ЛПМ-ответа(мс)АмплитудаМ-ответа(мкв)Контроль(n=12)1.8(1.45; 2.7)222.5(199; 297)3.5(3.2; 4.85)19608(14163; 21372)Группасравнения(n=16)11.25(8.45; 13.6)p1=0.00001418(12; 30)p1=0.000009--АТПКЛ(n=8)11.7(9.9; 13.1)p1=0.000144p2=0.67112675(43.7; 82.7)p1=0.000191p2=0.00049810.6(10.5; 16.9)p1=0.00014465.3(61.9; 124)p1=0.000144ГруппаПримечания:вкаждомслучаеприведенымедиана,р1, р2- по сравнению с контролем и группой сравнения68верхнийинижнийквартили;69Таким образом, изменения ЭНМГ-показателей животных с нейрорафиейи АТПКЛ свидетельствуют, что на 21-е сутки эксперимента большее количествонервных волокон, чем в группе сравнения проводят возбуждение через зонунейрорафии.НаличиенизкоамплитудногоМ-ответасвидетельствуето реиннервации мышечных волокон и наступлении импульсной стадиирегенерации.3.2.3 Анализ морфологических изменений седалищного нерва на 21-е суткиу животных на фоне нейрорафии при аутотрансплантации полнослойногокожного лоскута [Г.А.
Коршунова и др., 2016]На 21-е сутки эксперимента у животных данной группы так же, как и вгруппе сравнения в проксимальном и дистальном сегментах нерва отмечаютсявыраженные отеки (рис. 8А, рис. 9А), в отдельных препаратах наблюдаютсякровоизлияния. При этом как в проксимальном, так и дистальном участках нервавизуализируются сосуды с неравномерным кровенаполнением (рис. 8А, рис. 9А).Рисунок 8 – Морфологические препараты проксимального отдела седалищногонерва через 21 сутки после нейрорафии: А – малое увеличение (Объектив - 10х);Б– большое увеличение (Объектив – 40х)При гистологическом исследовании препаратов проксимального отделаседалищного нерва на 21-е сутки эксперимента было установлено, что среднее6970количество нервных волокон в два раза превышает аналогичный показатель вгруппе сравнения и составляет 96 (72; 112) в поле зрения.